KpnI | NEB酶试剂 New England Biolabs

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KpnI

我们很高兴宣布，我们即将完成把所有反应缓冲液转换为无 BSA（牛血清白蛋白）缓冲液。从 2021 年 4 月开始，NEB 将含有 BSA 的缓冲液转换为含有重组白蛋白（rAlbumin）的缓冲液，用于限制性内切酶和某些 DNA 修饰酶。网站上的所有信息均已根据此变化更新。如需了解更多信息，请访问 www.neb.cn/BSA-free。

  • Catalog # R0142 was discontinued on December 15, 2021
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同裂酶 | 单字母标示 | Pronunciation: KpnI | NEB酶试剂 New England Biolabs
  • 可提供高保真（HF®）版本酶（NEB #R3142），随附 rCutSmart™ 缓冲液
  • 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料 
  • 限制性内切酶酶切位点：GGTAC/C

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Reduce Star Activity with High-Fidelity Restriction Enzymes

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产品信息

本酶提供高保真版 KpnI-HF®（NEB #R3142）。

高保真（HF）限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性；统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶（Time-Saver）标准，可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA，也可实现过夜酶切，而且不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时便将性能作为重要指标，可在更宽的条件范围下具有完全活性，最大限度地减少非特异性酶切产物，同时为实验设计提供灵活性。

产品来源

大肠杆菌菌株，其携带来自肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）OK8（ATCC 49790）的 KpnI 基因。

产品类别:
Discontinued Products

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 下，1 小时内酶切 1 µg pXba DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ r1.1
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ r1.1
    10 mM Bis-Tris-Propane-HCl
    10 mM MgCl2
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7 @ 25°C)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ r1.1: 100%
    NEBuffer™ r2.1: 75%
    NEBuffer™ r3.1: <10%
    rCutSmart™ Buffer: 50%

    稀释兼容性

    • 稀释液 A

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    否

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 不敏感
    dcm 甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 不敏感

    同裂酶

    Acc65I
    Asp718I
    KpnI-HF

  • 相关产品

    相关产品

    • KpnI-HF®
    • Monarch® Plasmid Miniprep Kit 
    • Monarch® DNA Gel Extraction Kit
    • Monarch® PCR & DNA Cleanup Kit (5 μg)
    • Nuclease-free Water

  • 注意事项
    1. Acc65I 是 KpnI 的同裂酶。
    2. KpnI 产生一个 4 碱基 3´ 突出末端，而 Acc65I 产生一个 4 碱基 5´ 突出末端。
    3. 在 rCutSmart 缓冲液中可能出现星号活性。
    4. 对于不能热失活的酶，我们建议进行柱纯化（如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒），或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收（建议使用 Monarch 胶回收试剂盒），或酚/氯仿抽提。
    5. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化不敏感。
    6. 延长酶切时间、高浓度酶或 >5% 的甘油浓度可能产生星号活性

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明
    1. Optimizing Restriction Endonuclease Reactions
    2. Restriction Digest Protocol
    3. Double Digest Protocol with Standard Restriction Enzymes

  • 使用指南
    • Activity at 37°C for Restriction Enzymes with Alternate Incubation Temperatures
    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Cleavage Close to the End of DNA Fragments
    • Dam and Dcm Methylases of E. coli
    • Digestion of Agarose-Embedded DNA: Info for Specific Enzymes
    • Double Digests
    • Effects of CpG Methylation on Restriction Enzyme Cleavage
    • Heat Inactivation
    • NEBuffer Activity/Performance Chart with Restriction Enzymes
    • Optimizing Restriction Endonuclease Reactions
    • Restriction Endonucleases – Survival in a Reaction
    • Restriction Enzyme Diluent Buffer Compatibility
    • Restriction Enzyme Tips
    • Single Letter Codes
    • Star Activity
    • Traditional Cloning Quick Guide

工具 & 资源

  • 选择指南
    • Alphabetized List of Recognition Sequences
    • Cleavage of Supercoiled DNA
    • Compatible Cohesive Ends and Generation of New Restriction Sites
    • Dam-Dcm and CpG Methylation
    • Frequencies of Restriction Sites
    • Isoelectric Points (pI) for Restriction Enzymes
    • Isoschizomers
    • NEB Diluent and Buffer Table
    • Time-Saver™ Qualified Enzymes
    • Why Choose Recombinant Enzymes?

  • Web 工具
    • Competitor Cross-Reference Tool
    • DNA Sequences and Maps Tool
    • Double Digest Finder
    • Enzyme Finder
    • NEBcutter™ v3.0
    • NEBioCalculator®
    • REBASE®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs
    1. How can this enzyme be inactivated?
    2. Why is my Restriction Enzyme not cutting DNA?
    3. Why do I see a DNA smear on an agarose gel after a restriction digest?
    4. Why do I see additional DNA bands on my gel after a restriction digest?
    5. How many nucleotides do I have to add adjacent to the RE recognition site in order to get efficient cutting?
    6. Which NEB restriction enzymes are supplied with Gel Loading Dye, Purple (6X)?
    7. Is this enzyme sensitive to dam, dcm or mammalian CpG methylation?
    8. Can you tell me more about the switch from BSA to Recombinant Albumin (rAlbumin) in NEBuffers?

  • 问题解决指南
    • Restriction Enzyme Troubleshooting Guide

引用 & 技术文献

  • 引用文献

    产品引用文献查找工具

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质控、安全 & 法规

  • 质控分析
    每一新批次的 NEB 产品都要经过质控，以满足指定的质量标准，对特定产品的质量标准和每一批次的检测数据可以通过产品说明表格、COA、产品信息卡或者产品手册进行查阅或下载。关于 NEB 产品质控的详细信息，可从此处查阅。

  • 产品说明与变更通知

    产品说明与变更通知

    产品说明表包含产品的储存温度、有效期和规格，这些文件的命名规则如下：[货号]_[规格]_[版本]

    • R0142M_v2
    • R0142S_L_v2

  • CoA
    CoA 文件包含单个批次产品的储存温度、有效期和质控，这些文件的命名规则如下： [货号]_[规格]_[版本]_[Lot#]

    • R0142M_v1_0541306
    • R0142S_L_v1_0541306
    • R0142S_L_v1_0551312
    • R0142M_v1_0531301
    • R0142M_v1_0551405
    • R0142S_L_v1_0531301
    • R0142S_L_v1_0551405
    • R0142M_v1_0551410
    • R0142S_L_v1_0551410
    • R0142S_L_v1_0551504
    • R0142M_v1_0551504
    • R0142M_v1_0551509
    • R0142S_L_v1_0551509
    • R0142S_L_v1_0551604
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    • R0142S_L_v1_0551611
    • R0142M_v1_0551705
    • R0142S_L_v1_0551706
    • R0142S_L_v2_0551711
    • R0142M_v1_0551802
    • R0142M_v2_10011694
    • R0142S_v1_10017500
    • R0142M_v2_10028883
    • R0142L_v2_10034188
    • R0142M_v2_10036368
    • R0142S_v2_10034186
    • R0142L_v2_10055603
    • R0142S_v2_10055601
    • R0142M_v2_10051022
    • R0142L_v2_10058271
    • R0142L_v2_10060398
    • R0142S_v2_10058272
    • R0142S_v2_10064914
    • R0142S_v2_10073072
    • R0142L_v2_10077703
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    • R0142S_v2_10082046
    • R0142L_v2_10088071
    • R0142M_v2_10092125
    • R0142S_v2_10091178
    • R0142S_v2_10095184
    • R0142M_v2_10098812
    • R0142M_v2_10101747
    • R0142S_v2_10107517
    • R0142L_v2_10111170
    • R0142M_v2_10114220
    • R0142L_v2_10017548

  • SDS
    以下 SDS 文件可以帮助您安全地使用该产品

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