| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 产品价格 |
| – | – |
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- 参考文献
人iPS细胞·小鼠ES细胞冻存用
StemSure® 细胞冻存液 Update！！
本产品是可用于冻存以小鼠ES细胞为代表的各种通用细胞株的无血清型细胞冻存液。含BSA和10%DMSO 。标准测试中用小鼠ES细胞D3株冻存、复苏，确认其细胞存活率。本产品采用缓慢冻存法冻存细胞，无需使用程序降温盒。
使用本产品对小鼠ES细胞D3株在-80℃进行保存，可冻存2年；普通细胞在-150℃下可冻存30个月，并且可维持很高的存活率。
另外，本产品已确认可用于冻存人iPS细胞。
◆特点
● 可在维持人iPS细胞、小鼠ES细胞未分化能力的状态下，直接进行冻存。
● 可在-80℃下进行长时间冻存。
● 冻存的通用动物细胞株的细胞存活率好。
● 无血清型
● 无需自行配制试剂
● 无需使用程序降温盒
◆测试项目
● 细胞存活率时间（使用小鼠ES细胞D3株进行实验）
● 无菌实验
● 内毒素实验
● 支原体实验
◆使用方法
人iPS细胞的冻存
1. 冻存
① 去除人iPS细胞培养皿中的营养液，用PBS清洗后，用Accutase等剥离细胞。
② 添加含有10μmol/L Y-27632的人iPS培养基（hPSC培养基（+ROCKi）），用移液器吹打成单细胞。
③ 将吹打分散的细胞悬浮液移至样本管，离心（1,000rpm，3min，室温）后去除上清液。
④ 添加含hPSC培养基（+ROCKi）的培养基，用移液器悬浮。
⑤ 计算细胞数量。
⑥ 以1×106clls/管分注在细胞悬浮液保存管中。
⑦ 离心（1,000rpm，3min，室温）后去除上清液。
⑧ 使用50μL/管本产品进行悬浮，在-80℃下进行冻存。
2. 复苏
① 在冻存管中添加hPSC培养基（+ROCKi），复苏冻结细胞（不使用温水浴法）。
② 离心（1,000rpm，3min，室温）后去除上清，再次添加hPSC培养基（+ROCKi），悬浮。
③ 计算细胞数量。
④ 在培养皿中按照2×105cells/6cm进行细胞培养。
小鼠ES细胞、通用动物细胞株的冻存
1. 冻存
① 收集细胞至样本管中。
② 离心，去除上清。
③ 在样本管中加入本产品，悬浮。
④ 分注至悬浮液保存管中。
⑤ 将保存管在-80℃冻洁一晚。
⑥ 保存于-150℃或-80℃
2. 复苏
① 将冻存管置于37℃的水浴槽中解冻。
② 在培养用的培养基中进行悬浮。
③ 离心去除上清后用培养基进行重悬。
④ 在培养容器内培养细胞。
◆人iPS细胞201B7细胞系的冻存 Update！！
将人iPS细胞201B7株分散为单细胞后，在StemSure® 冻存液中悬浮，并在-80℃下冻存4天。反复冻结、复苏3次之后，确认细胞存活率和各种未分化标记（Oct3/4、Sox2、SSEA-4、Tra-1-81）的表达。
细胞生存率
未分化标记表达的确认
◆小鼠ES细胞D3细胞系的冻存
-150℃保存（30个月）
-80℃保存（24个月）
<冻存>
① 在1mL本产品中悬浮1~2×106cells，分注至冻存管中。
② 在-80℃冻存1天后转移至-150℃冻存。或者在-80℃冻存。
<复苏>
③ 在37℃的温浴槽中复苏。
④ 在细胞培养基中悬浮、离心。
⑤ 弃上清，用细胞培养基重悬细胞并进行培养。
○确认细胞集落形成
培养细胞数：500个细胞/孔（含胶原蛋白涂层的6孔板）
培养时间：10天
◆冻存通用动物细胞系后的细胞存活率
用StemSure® 细胞冻存液冻存各种动物细胞株。可确认到冻存30个月后仍维持高存活率，且复苏后细胞可移植。
|
细胞种类 |
存活率（%） |
细胞移植 |
||
|
2个月 |
4个月 |
30个月 |
||
|
人 |
||||
|
HeLa |
97 |
93 |
97 |
○ |
|
293T |
96 |
95 |
95 |
○ |
|
K562 |
91 |
84 |
84 |
○ |
|
灵长类 |
||||
|
COS-7 |
97 |
93 |
92 |
○ |
|
Vero |
95 |
94 |
91 |
○ |
|
狗 |
||||
|
MDCK |
98 |
99 |
100 |
○ |
|
小鼠 |
||||
|
NIH/3T3 |
93 |
93 |
89 |
○ |
|
P19 |
93 |
76 |
77 |
○ |
|
STO |
90 |
91 |
91 |
○ |
|
L929 |
94 |
90 |
91 |
○ |
|
仓鼠 |
||||
|
CHO |
97 |
96 |
98 |
○ |
<冻存>
① 在1mL本品中悬浮1~2×106cells，分注至冻存管中。
② 在-80℃冻存1天后转移至-150℃分别冻存2个月、4个月、30个月。
<复苏>
③ 在37℃的水浴槽中复苏。
④ 细胞培养用培养基中悬浮、离心。
★其他冻存液★
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
容量 |
|
031-24051 |
CultureSure® DMSO |
细胞培养用 |
10mL×10 |
|
039-23511 |
CultureSure® Freezing Medium |
细胞培养用 |
10mL |
◆相关产品
★StemSure® 系列★
本系列产品适用于培养ES细胞和iPS细胞。每个批次产品都适用小鼠ES细胞D3细胞系进行品质实验检测。
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
容量 |
|
197-16275 |
StemSure® D-MEM (High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate |
细胞培养用 |
500mL |
|
191-18375 |
Stemsure® Serum Replacement |
细胞培养用 |
500mL |
|
198-15781 |
StemSure® 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution ( x 100) |
细胞培养用 |
100mL |
|
195-15791 |
StemSure® 50 mmol/L Monothioglycerol Solution ( x 100) |
细胞培养用 |
100mL |
|
190-15805 |
StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution |
细胞培养用 |
500mL |
|
199-16051 |
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution |
细胞培养用 |
106 units |
|
195-16053 |
StemSure® LIF,Mouse,recombinant,Solution |
细胞培养用 |
106 units×10 |
★rBC2LCN-FITC★
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