细胞死亡M65 EpiDeath^® ELISA试剂盒

M65 EpiDeath^® ELISA

 

 

◆原理         M65 EpiDeath® ELISA检测新一代生物标记物角蛋白18。检测细胞培养上清，血清和血浆样品中可溶性的角蛋白18。 K18 的含量反应了所有上皮细胞的死亡情况，不管是由于凋亡还是坏死引起的死亡都可以检测到。

 

 

◆优点・特色

●    只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况

●    检测更稳定，特异性更高。

●    夹心法ELISA检测，可拆卸的96孔板。试剂即开即用

●    肝脏疾病：检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。

●    肿瘤：监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。

●    毒理学：临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。

 

细胞凋亡或者坏死引起细胞死亡。细胞死亡的模式取决于刺激的类型 (比如：细胞毒素和化疗后的肿瘤，或者肝脏损伤)和组织类型(比如：肿瘤)。M30 Apoptosense ELISA and 和M65 EpiDeath ELISA配套使用不仅定量检测细胞死亡的数量，而且确定细胞死亡的模式。（凋亡或者坏死）（样品包括血清，血浆和细胞培养上清）

肿瘤中使用的细胞毒素会尽量克服细胞凋亡过程中的紊乱状态，刺激细胞发生凋亡。不同的肿瘤细胞和细胞毒素也会引起细胞坏死。细胞内ATP产生缺失通常会引起细胞凋亡，但有时候也会导致细胞坏死(Leist et al., 1997).

肝脏损伤可能会引起肝细胞的死亡– 凋亡和坏死均可导致。有报道称细胞死亡模式的确定可用于不同肝脏疾病的临床诊断，预判和评估治疗效果(Volkmann et al., 2006)。角蛋白18（K18）是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数K18分子在细胞内是非可溶性的，但也报道有可溶性K18池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间，细胞内K18会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因” (由细胞凋亡和细胞坏死引起) (Kramer et al., 2004)。K18在细胞凋亡期间被caspase催化发生水解， caspase-cleaved片段释放到细胞外。因此细胞外的caspase-cleaved K18 (ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30：M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(Kramer et al., 2004).

M65 EpiDeath^® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗，评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense^® ELISA 特异性检测在caspase-cleavage d K18 在Asp396形成的新表位 (K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope) ，反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002; Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒的单位根据统一标准校对过，可以计算caspase-cleaved 和总K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放，M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡，只有K18的水平是升高的，所以M30:M65 比值较低

        M65 EpiDeath^® ELISA 和 M65^® ELISA的区别，请参考相关资料。

M65 EpiDeath^® ELISA 是 M65^® ELISA 的升级版，用于患者血清/血浆或细胞培养样品中总CK18 的测定。

特异性	人
样品类型	人血清或血浆、人细胞系的培养上清液或裂解液
灵敏度	25 U/L
范围	0–5,000 U/L
检测目标物	可溶性CK18
特点	可进行定量检测；试剂盒包含两个阳性对照；预铺ELISA板，即用试剂，操作方便；可用于自动化
稀释线性	用M65 EpiDeath StandardA   稀释，平均值是95%（范围88-101%）；用血清释，平均值是93%（范围82-101%）

更多运用案例

M65 EpiDeath^® ELISA 和M65^® ELISA的比较

M65 EpiDeath^® ELISA 和M65^® ELISA的运用完全一致。

检测的样品类型一致，检测的目标物一致。

 M65 EpiDeath^® ELISA与 M65^® ELISA使用相同的单抗。为了与 M30 Apoptosense^® ELISA匹配, 使用单抗M5作为捕获抗体 (在M65^® ELISA使用单抗M6)。

M65 EpiDeath^® 与 M65^® ELISA相似和区别：

●M65 EpiDeath^® ELISA可以更好的区分健康人群和病患（患有导致循环角蛋白18（K18）增加的疾病）。这是由于该试剂盒中的抗体有更好的结合特异性，在健康人群中检测到的值更低

●M65 EpiDeath^® ELISA 和M65® ELISA 检测含有K18的病患样品，检测值差不多(见图中提供的资料，相关性系数r² = 0,84). 这些检测的主要区别是用M65^® ELISA检测，检测值在200 – 300 U/L范围内的样品用M65 EpiDeath^® ELISA检测，检测值<100 U/L 。

●由于M65 EpiDeath^® 和M65^® ELISA检测同一样品，检测值不一样，所以如果是特定的实验/项目，只能使用其中一种试剂盒。

●M65 EpiDeath^®的检测范围是0~5000U/L， M65^® ELISA的检测范围是125~2000U/L。

 

使用M65 EpiDeath^® 和M30 Apoptosense^® ELISA确认细胞死亡形式

M65 EpiDeath^® ELISA和 M30 Apoptosense^® ELISA使用相同的捕获抗体，使用M30 Apoptosense^® 和M65 EpiDeath^® ELISA检测 “M30：M65 比” (见Kramer et al., 2004) 希望反应细胞死亡形式。有些案例中，用M30 Apoptosense^® ELISA检测，样品的值高于用M65 EpiDeath^® ELISA检测, 可能反应了表位如何在复合体中递呈。

注意：“M30:M65 比” 只有在K18含量提升的样品（比如，用M65 EpiDeath^® ELISA检测，值>300 U/L ）有意义。(见 Linder et al., Expert Reviews in Molecular Diagnostics 10, 353, 2010).

 

                                                                       

                                          PEVIVA                                    PEVIVA肿瘤及肝病上皮细胞死亡检测试剂盒

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