2×Taq PCR MasterMix for PAGE(含染料)
¥50.00
货号:BL631A
规格:1ml
品牌:biosharp
商品详情:
2×Taq PCR Master Mix for PAGE(含染料)
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
BL631A |
2×Taq PCR Master Mix for PAGE(含染料) |
1 ml |
BL631B |
2×Taq PCR Master Mix for PAGE(含染料) |
5×1 ml |
产品简介:
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、Mg2+以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物,使用时只需再加入模板和引物并用水补足体系至反应浓度为1×,即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出“A”碱基,可直接克隆于T载体中。本产品经过特殊优化处理,针对丙烯酰胺凝胶电泳背景更低,观察效果更好。
产品特点:
直接上样:含染料PCR产物可直接上样进行凝胶电泳分析;
高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性;
无基因组污染:扩增产物纯度高;
高效扩增:优化的缓冲体系发挥更强的扩增性能;
重复性好:体系预混合,减小加样误差,降低污染机会;
批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测。
使用说明:
1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
20μl反应体系 |
|
2×Master Mix |
10 μl |
上游引物(10μM) |
0.4-1 μl |
下游引物(10μM) |
0.4-1 μl |
模板 |
× μl* |
水 |
补至20μl |
*:模板量:10ng-1ug 基因组DNA,1-30ng 质粒。
注:以上为常规PCR体系,仅供参考,实际操作可根据具体情况适当调整反应体系。
3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪上执行以下程序:
步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
预变性 |
94℃ |
2 min |
1 |
变性 |
94℃ |
30 sec |
25-35* |
退火 |
55℃-65℃* |
30 sec |
|
延伸 |
72℃ |
60s/kb |
|
最后延伸 |
72℃ |
5-10 min |
1 |
注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,根据比例放大或缩小体系,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
5、电泳检测:含染料的2×PCR Master Mix for PAGE可以直接上样。
注意事项:
1、 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
2、 应根据实验目的选择合适循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。
3、 根据引物 Tm 值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特异性扩增;过高可能扩增不出来。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃保存两年有效;4℃可稳定贮存6个月。经常使用时,一旦融化后请4℃贮存,尽量避免反复冻融。
注:如保存温度长期低于-30℃或遇干冰急冻,本产品颜色会变浅直至变黄(与急冻程度相关)。经测试,该变化不影响使用效果。
货号 | BL631A |
规格 | 1ml |
品牌 | biosharp |
说明书下载 | 点击下载 |