总SOD活性检测试剂盒（WST-1法）

￥380.00

货号：BL902A

规格：100T

品牌：biosharp

Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-1

总SOD活性检测试剂盒（WST-1法）

产品简介：

       超氧化歧化酶（SOD）能够催化超氧阴离子（O2。-）歧化，生成过生成过氧化氢(H2O2)和单质氧气（O2），是一种重要的抗氧化酶。目前有许多间接或者直接测定SOD的方法，其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用，但是，NBT法有几个缺点，例如生成的染料水溶性差，而且会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应。虽然cytochrome C法也常被用来做SOD检测，但它和超氧化物反应过于剧烈，不能测定低水平的SOD。目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性和灵敏度较好的WST-1法。使用了易溶于水的噻唑盐：WST-1（2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐），能够和超氧阴离子反应生成水溶性的染料，因此可以简便地进行SOD的检测。WST-1与超氧阴离子反应的剧烈程度比cytochrome C小70倍；因此，它的检测灵敏度非常高，并且能够通过将样品用buffer稀释，使背景的吸光度最小化。WST-1不会和黄嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase, XO）的还原型发生反应，因此，能够检测SOD 100%的抑制率。WST-1被超氧阴离子还原的比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关，并且会被SOD所抑制（见下图）。因此，SOD或者SOD类似物的IC50（50%的抑制浓度）就能用比色法来测定。

      WST-1的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时WST-1法测定SOD酶活力时，最大抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒（NBT法）。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒（NBT法）相同，等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法，线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞，无需匀浆，操作更加便捷。

本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。

产品组成：

注意事项：

1、待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。

2、细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。

3、抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。所以需要设置使用说明中的空白对照3来消除样品中的抗氧化物的干扰。

4、标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时，标准品也建议使用SOD样品制备液进行稀释；当样品为血液等无需处理的样品时，建议使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。

5、酶溶液有时会被分成两层，因此忽略离心混匀步骤会导致实验结果不准确。

6、为提高实验准确性，建议每个样品进行复孔实验

7、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-20℃避光保存，有效期一年。