特超敏ECL化学发光底物

特超敏ECL化学发光底物

¥1350.00

货号:BL520B

规格:500ml

品牌:Jinpan

ECL化学发光底物(特超敏) 

产品简介:

ECL化学发光底物(特超敏)可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物的免疫印迹实验提供明亮的信号和低皮克级检测灵敏度。该ECL底物能够兼容各种膜、封闭液和宽范围抗体稀释液以出色性能、通用性和高性价比满足用户的免疫印迹应用需求。

用途:用于HRP标记抗体的Western BlotHRP标记探针的核酸杂交。

产品特点:

1、低皮克级灵敏度:检测硝化纤维素膜或PVDF膜上皮克级的蛋白条带;

2、长信号持续时间:在条件优化情况下经底物孵育的印迹条带能够持续输出6-8小时的可检测光信号;

3、稳定试剂:工作液在24小时内保持稳定;

4、成像方法:适用于X射线胶片、CCD或激光凝胶成像仪;

5、价格经济:针对稀释的抗体浓度条件进行了优化:

0.21.0 µg/mL一抗(以1 µg/mL储存液稀释1:1,0001:5,000倍)

1050 ng/mL二抗(以1 µg/mL储存液稀释1:20,0001:100,000倍)

6、简单易用:可替代其它公司的ECL发光底物操作步骤无需进行特别优化;

使用方法:

1、执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意用HRP标记IgG或用一抗链亲和素生物素-HRP夹法。

2Western Blot最后一次洗膜的同时配制发光工作液:分别取等体积的A液和B放入干净容器中混合(注意吸取A液和B液的吸头一定要分开避免试剂污染)。建议立即使用工作液室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3Western Blot最后一次洗膜后用镊子将膜取出用滤纸吸去多余的洗涤液(切勿接触膜的蛋白面)然后置于一洁净保鲜膜上或塑料容器内。

4、根据膜的大小按比例滴加配置好的ECL工作液到膜上确保工作液均匀覆盖在膜上放置1-3分钟。

5、取膜用滤纸吸去多余的液体将膜放在两片保鲜膜中间随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。

6、压片检测:将膜固定于X光胶片暗盒内(注意蛋白面向上)。暗房内压X光胶片分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。

7、化学发光成像仪检测:将膜放置到化学发光成像仪内参考仪器说明书进行检测。

     注:建议第一次曝光 60 之后可调整曝光时间以达到最佳结果。化学发光反应在底物孵育后的前 5-30 min期间是最强烈的。这一反应可以持续几个小时但强度会随时间下降如有底物孵育后较长时间后曝光曝光时间可能需要延长以获得较强信号。

注意事项:

为获得最佳效果需优化该系统包括样品量、一抗和二抗浓度、膜和封闭试剂的类型。

1、没有一种封闭试剂对所有系统而言都是最佳的所以为每一个免疫印迹检测系统找到最合适的封闭缓冲液非常必需。

2、使用亲和素/生物素检测系统时避免使用牛奶作为封闭试剂牛奶中含有的不定量内源性生物素会导致高背景信号。

3、实验中避免印迹膜变干。

4、叠氮钠是 HRP 的抑制物不要使用叠氮钠作为缓冲液的防腐剂。

5、避免手与膜直接接触实验过程应戴手套或使用干净的镊子。

6、短时间暴露于实验室常规照明不会损害该工作液但应避免长期暴露在强光下。

保存条件:

室温运输,4 ℃密封避光保存一年短期可放置室温。

货号 BL520B
规格 500ml
品牌 Jinpan
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