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重组胰蛋白酶(RTrypsin)
◆概述
胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全*,分子量为24 kDa,最适pH为7.0-9.0。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;
重组胰蛋白酶(RTrypsin)
◆概述
胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶完全*,分子量为24 kDa,最适pH为7.0-9.0。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;蛋白质的酶解、测序;各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。
◆优势
● 批量生产规模大,批间小
● 高纯度,高比活性
● 重组表达生产,无外源性病毒污染,生产过程不使用动物来源原料
◆纯度
SDS-PAGE显示纯度>95%。
◆来源
重组毕赤酵母菌株,其克隆有来自猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因。
◆使用方法
保存:10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2;溶解后分装-15 ℃以下保存。
酶切体系:25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。
推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:100(肽图或蛋白组学研究),1:200~1:2000(多肽/蛋白生产工艺)。
◆保存条件
储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2溶解后分装储存于-15 ℃以下,反复冻融5次,未能观察到活性损失;溶解后2~8 ℃保存建议不超过7 d。
运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定
◆应用实例
RTrypsin特异性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:100,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。
Peak# |
R.T. |
M.W. |
Sequence |
Peak 1 |
6.70 min |
366.42 |
YGK |
Peak 2 |
7.61 min |
552.6 |
YGKR |
Peak 3 |
17.67 min |
445.56 |
LWK |
Peak 4 |
19.53 min |
601.75 |
RLWK |
Peak 5 |
19.97 min |
950.15 |
YGKRLWK |
◆产品信息
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
比活 |
RTP0102 |
RTrypsin |
10 mg |
3800 USP/mg |
RTP0103 |
RTrypsin |
1 mg |
3800 USP/mg |
RTP0104 |
RTrypsin |
10 μg |
3800 USP/mg |
◆相关产品
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
储存温度 |
其他信息 |
MDRK0101 |
RTrypsin ELISA Kit |
96 孔 |
2~8 ℃ |
检测范围 |
IRTP0101 |
immobilized Recombinant Trypsin |
1.0 mL |
-15 ℃以下 |
1.0 mL含1.0 mg |
重组胰蛋白酶(RTrypsin)