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Wako 组织透明化技术相关试剂——VA-044 (聚合物引发剂)
VA-044 作为组织透明化技术中起关键作用的水溶性偶氮引发剂,普遍适用于高分子合成的水溶液聚合与乳液聚合。在CLARITY 方法中,VA-044 作为引发剂,催化丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺和 PFA 形成水凝胶。
Wako 组织透明化技术相关试剂——VA-044 (聚合物引发剂)
一个世纪以来,生物学家们一直梦想着能够透过器官甚至整个机体,亲眼看到细胞连接和精细结构,现在随着组织透明化技术的完善,这一梦想终于成为了现实。
VA-044 作为组织透明化技术中起关键作用的水溶性偶氮聚合物引发剂,普遍适用于高分子合成的水溶液聚合与乳液聚合。在CLARITY 方法中,VA-044 作为引发剂,催化丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺和 PFA 形成水凝胶。
CLARITY 技术:可使全身组织呈现多孔水凝胶网络化的透明形式。
VA-044 (聚合物引发剂)的特点
操作简单,固定蛋白后只需进行电泳;
可保持组织、器官和全身结构的完整性;
可进行原位杂交和免疫组化实验,可进行多轮染色和脱色步骤
2013 年 3 月, 斯 坦 福 大 学 的 KarlDeisseroth 博 士 领 导 的 团 队 在 Nature 杂 志 上 发 表 了论文,文中介绍了制备组织的方法 CLARITY。该方法是将组织浸透在水凝胶单体溶液中(HydrogelMonomerSolution)中,经电泳使组织呈现透明。这种水溶胶—组织杂交的方式可以维持组织的原有结构,使生物分子结合到水凝胶的网孔上。重要的是脂类不会结合到水凝胶上,因而可以通过这种方式将脂类有效去除。通过这种方法制备的组织样品可用于后期的影像实验,免疫染色,原位杂交等实验。
Clarity 介绍
PARS 介绍
图 A.PARS 建立的小鼠透明化肠,并用凝集素(lectin)、亚甲基蓝 (methyleneblue)、DAPI 进行免疫标记后成像,并获得三种免疫标记的叠加图(merge)。
图 B.PARS 建立的小鼠透明化肾脏并用抗微管蛋白抗体和 DRAQ5 进行免疫标记后成像,并获得两种免疫标记的叠加图。
CLARITY 和 PARS 这两种技术都与组织透明化有关,研究人员用一种水凝胶来替换组织、器官甚至全身中的脂类,由于 VA-044 具有引发组织凝胶化聚合的作用,上述单体在组织、器官或全身形成水凝胶高分子网络。这一网络能够支持组织、器官和全身所有结构,但不会结合脂类。随后研究人员使用离子去垢剂快速将脂类抽出,即可获得完整透明的 3D 组织、器官和全身,斯坦福大学CLARITY 研究成果大脑中的神经元、轴突、树突、突触、蛋白、核酸等等都完好的维持在原位,PARS 新方法可以处理动物的整个身体或完整的胚胎。VA-044 在 CLARITY 和 PARS 两种技术中都起到引发单体聚合成水凝胶网络的关键性作用。Wako 组织透明化技术相关试剂——VA-044 (聚合物引发剂)
参考文献
1)ChungK.etal.:Nature.,497,332(2013).
2)YangB.etal.:Cell.,158:1-14(2014)
Wako 组织透明化技术相关试剂——VA-044 (聚合物引发剂)
产品信息
产品编号 | 产品名称 | 级别 | 容量 | CAS NO. |
223-02112 | VA-044 | 细胞生物学级别 | 25g | 27776-21-2 |
225-02111 | VA-044 | 细胞生物学级别 | 100g | – |
227-02115 | VA-044 | 细胞生物学级别 | 500g | – |