GenomONE™ CAb EX 抗体导入试剂盒:GenomONE-Neo EX从2007年开始商品化销售,试剂盒内的IgG结合增强剂*,促使IgG分子能够更高效的进入到HVJ-E载体内;正是这个特性,GenomONE-Neo EX系统能够更有效的将IgG分子导入到细胞质内。
GenomONE™ CAb EX 抗体导入试剂盒
新一代细胞功能和胞内蛋白研究工具——通过HVJ-E将IgG抗体高校导入活细胞内!
◆原理
IgG抗体分子与HVJ-Envelope (HVJ-E) 混合后,形成HVJ-E载体。利用HVJ病毒衣壳蛋白的侵染能力,在融合蛋白(F)的作用下,直接与细胞融合,将分子转入目标细胞或组织。
GenomONE-Neo EX从2007年开始商品化销售,试剂盒内的IgG结合增强剂*,促使IgG分子能够更高效的进入到HVJ-E载体内;正是这个特性,GenomONE-Neo EX系统能够更有效的将IgG分子导入到细胞质内。
* 相关 GenomONE-CAb 研发文献: Kondo Y. et al., J. Immunol. Methods, 332,10-17(2008).
◆优点、特色
● 筛查细胞内的抗原抗体反应。
通过细胞内抗原抗体反应表现出的中和作用筛选 。
● 先进的胞内抗体导入技术(不同于现有的敲除法)。
不同于转录后基因沉默(RNAi干扰等),该方法通过识别蛋白质-蛋白质相互作用或翻译后修饰(添加
糖链等)方法,达到特异性抑制不产生非特异性反应(RNAi干扰的脱靶效应等)。
不同于转基因表达的方法,该法可快速简单地将大量抗体高效导入活细胞,适用于各种不同类型的研究
● 细胞内功能分析。
抗体导入活细胞后,检测目标分子的胞内分布情况。
抗体导入活细胞后,抑制或证明目标分子的作用。
活细胞成像。
● 用于检查、诊断和治疗。
检查和诊断的新一代试剂,利用抗体捕获活细胞内的分子靶标。
新一代抗体药,直接作用于细胞内分子靶标。
◆案例、应用
【Anti-α-tubulin antibody导入Hs68细胞】
【抗体】
Monoclonal Anti-α-tubulin, Clone DM1A, Mouse IgG1 (SIGMA, T6199)
【流程】
Hs68: 人包皮成纤维细胞(ATCC-CRL-1635), 1×104 cells/well,
0.5%FCS/DMEM (8 well-chambered coverglass;Nunc 155411)
● GenomONE- CAb与Anti-α-tubulinmAb (5μg) 混合后加入细胞
● 37℃培养2hr
● 清洗细胞 (PBS)
● 固定细胞 (4% PFA; for 15min at r.t., 0.2% Triton X-100; for 5 min at r.t.,1%BSA; o/n)
● Alexa Fluor 488-Goat Anti-Mouse IgG, F(ab’)2<Invitrogen A11017>
● 清洗细胞 (PBS)
● SYTO 82 (Invitrogen S11363)
● 激光扫描共聚焦显微镜下观察
抗体与微管蛋白细丝特异性结合细胞核用SYTO82染色(红)
【Anti-α-tubulin antibody导入Hs68细胞】
导入抗体后
导入anti-NPC antibody 后24hr,观察到的荧光强度和2hr时相比没有明显变化,这表明抗体可在2hr内捕获NPC,并且形成的复合物在24hr内稳定。
【细胞系】 HeLa S3: 人宫颈癌细胞(ATCC CCL 2.2)
【抗体】 Monoclonal Anti-Nuclear Pore Complex Proteins, Clone 414; Mouse IgG1(SIGMA, N8786)
◆试剂盒组成
Cat. # |
HVJ-E
(inactivated HVJ) |
ReagentⅠ (antibody incorporation enhancer) |
ReagentⅡ |
ReagentⅢ |
Buffer (for suspension |
ISK-AB001-EX |
1 vial |
1 vial |
1 vial |
1 vial |
1 vial |
ISK-AB004-EX |
4 vials |
4 vials |
1 vial |
4 vials |
1 vial |
*1 vial HVJ-E zui多可转52块8孔细胞培养板
产品编号 |
产品名称 |
产品规格 |
ISK-AB-001-EX |
GenomONE(TM)-CAb EX 1 vial Antibody Delivery Reagents |
1 set |
ISK-AB004-EX |
GenomONE(TM)-CAb EX 1 vial Antibody Delivery Reagents |
1 set |
详细信息请见:http:///product/show/186.html