| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | 297-79201 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 90tests | 供货周期 | 一个月 |
| 主要用途 | 培养物上清的外泌体定性·定量分析 |
原装进口-PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgG POD）
培养物上清的外泌体定性·定量分析
本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析，以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。
原装进口-PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgG POD）
培养物上清的外泌体定性·定量分析
◆特点
采用PS结合分子Tim4包被板
● 通过磷脂酰丝氨酸（PS）结合分子进行捕捉。※1
● 可检测出0.1μL培养上清液细胞外囊泡。
● 用纯化细胞外囊泡为标准品※2进行定量检测。
● 可通过WB法※3进行50～1,000倍高灵敏度检测。
↓↓
培养上清的细胞外囊泡高灵度定性·定量检测
※1比通过抗体包被板ELISA法能更好进行外囊泡的定性·定量分析。
※2请使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡标准品。
※3WB法：免疫印迹实验
zui优化试剂盒
● zui优化对照用一抗※4
● zui优化检测用二抗※5
● 采用显色法
↓↓
操作简便，实验重复性高
※4附加抗人CD63抗体。检测其他表面标记蛋白可利用任意小鼠单抗。
※5附加抗小鼠IgG抗体-HRP标记。
◆测定原理·产品概述
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本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析，以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸（PS）特异性结合的蛋白包被到板上，细胞外囊泡与其反应固定后，用任意外囊泡表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗，试剂盒的HRP标记小鼠IgG抗体为二抗，可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外囊泡。另外，试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗，可检测出人CD63阳性外囊泡。 通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS（Code No.: 293-77601）提纯细胞培养上清和体液样品中的外囊泡，通过本试剂盒对细胞外囊泡的表面标记蛋白进行免疫印迹实验，可50～1,000倍高灵敏度且简便进行检测。另外，从细胞上清中利用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡作为标准品，可对细胞上清外囊泡进行定量分析。 |
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◆试剂盒组成
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试剂盒组成（96次） |
包装 |
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捕获外泌体96孔板 |
1个(8well×12strips) |
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反应/洗涤缓冲液（10×） |
50mL×2瓶 |
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外泌体结合增强子（100×） |
10mL×1瓶 |
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对照一抗Anti-CD63（100×） |
120μL×1瓶 |
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二抗HRP缀合抗小鼠IgG（100×） |
120μL×1瓶 |
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TMB溶液 |
12mL×1瓶 |
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终止液 |
12mL×1瓶 |
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封板膜 |
4个 |
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说明书 |
1本 |
◆案例
各种细胞培养上清纯化外囊泡定性分析
将各种细胞获得的纯化外囊泡1ng添加至板孔中，利用能检测表面标记蛋白CD9/CD63/CD81的一抗通过本试剂盒对各表面标记量进行定性比较。
另外，作为比较参考数据，将各细胞纯化150ng外囊泡进行电泳，利用能检测表面标记的CD9/CD63/CD81的一抗对各表面标记蛋白量进行定性分析。
ELISA系统和WB分析之间，已确认标记蛋白表达模式具有相关性！！
正常人血清纯化细胞外囊泡的定性分析
将从正常人血清的6个样品纯化的细胞外囊泡，通过BCA检测外囊泡膜上的蛋白浓度。分别添加40、20、10ng到孔中，用可识别表面标记CD63的对照组检测一抗测定OD值进行定性比较。
使用从体液样品纯化的细胞外囊泡具有良好的线性！！
细胞培养上清纯化细胞外囊泡的检测灵敏度参考数据
COLO201细胞培养上清纯化外囊泡，比较本试剂盒和免疫印迹实验的检测灵敏度。
免疫印迹实验和ELISA的检测灵敏度比较
（a），（b）使用各种抗CD63抗体（其他公司产品，Wako产品：Code No. 012-27063）进行免疫印迹实验检测灵敏度数据
样品：COLO201细胞培养上清纯化外囊泡（使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS纯化）
★：各抗体免疫印迹实验的检测限。
（c）Exosome ELISA Kit检测限数据
用本试剂盒对COLO201细胞源纯化外囊泡（使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS纯化）进行梯度稀释的样品以及缓冲液的空白值进行测定，制作COLO201标准曲线。利用此标准曲线可算出COLO201源纯化样品的zui低检测灵敏度。（测定各浓度点n=6，空白点n=12）
比免疫印迹实验可高灵敏度检测标记蛋白。
细胞培养上清样品的稀释线性（Linearity）参考数据
COLOC201细胞培养上清纯化外囊泡为标准品制作标准曲线，以COLO201细胞培养上清5个梯度稀释样品（1:100-1:1600）进行稀释线性进行评估。
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COLO201细胞培养上清 |
|||||
|
CM量 （μL） |
稀释 |
测定值 （ng/mL） |
期望值 （ng/mL） |
预期百分比 |
|
|
比率 |
稀释因子（×） |
||||
|
0.0625 |
1：1600 |
0.000625 |
0.89 |
0.91 |
98.4 |
|
0.125 |
1：800 |
0.00125 |
1.82 |
1.72 |
105.6 |
|
0.25 |
1：400 |
0.0025 |
3.44 |
3.52 |
97.8 |
|
0.5 |
1：200 |
0.005 |
7.04 |
6.78 |
103.9 |
|
1 |
1：100 |
0.01 |
13.6 |
— |
— |
标准品：COLO201细胞源外泌体
（使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS纯化）
测定样品：COLO201细胞培养上清
一抗：试剂盒附带抗CD63抗体
良好的稀释线性，已确认可检测0.1μL培养上清的细胞外囊泡。
原装进口-PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒（抗小鼠IgG POD）
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可代替超速离心法纯化标准高纯度细胞外囊泡。
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产品编号 |
产品名称 |
保存 |
包装 |
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293-77601 |
MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS |
2-10℃ |
10次*1 |
*1 所使用的磁珠可重复再利用4次。内附充足缓冲液。若同一样品反复提取及不会发生污染的情况下，zui多可使用50次。
更多应用说明，请点击：
新型亲和性外泌体纯化法与外泌体高灵敏度检测应用
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