日本和光Wako药物分析—— ICH-harmonized溶剂
这些用于药物检测的试剂符合三大药典的要求，即日本药典、美国药典和欧洲药典。目前，Wako已发布了22种用于普通药物检测的试剂， 这些用于药物检测的试剂将有助于开发全球医药产品市场。

ICH-harmonized溶剂用于药物分析检测

符合日本药典、美国药典、欧洲药典

这些用于药物分析的试剂符合三大药典的要求，即日本药典、美国药典和欧洲药典。目前，Wako已发布了22种用于普通药物分析的试剂， 这些试剂将有助于开发全球医药产品市场。

ICH: International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (人用药品注册技术要求国际协调会)

◆ 认证体系

●      日本药典(JIS special grade reagent)

●      美国药典 (ACS Specification)

●      欧洲药典

◆认证检测项目 (例: 丙酮)

                              * 表示Wako厂家自己添加的检测项目

◆ 产品列表

   *表示符合两大药典 (日本药典和 欧洲药典). Wako还可以提供符合美国药典的检测结果 (仅有部分检测项目).

可用于活细胞的不可逆GST抑制剂
CNBSF ＜Irreversible GST Inhibitor＞
CNBSF（2-chloro-5-nitrobenzensulfonyl fluoride）是针对谷胱甘肽 S-转移酶（GST）的不可逆性抑制剂。与目前已知的作为GST抑制剂广泛使用的利尿酸相比，抑制活性明显更高，且因其不可逆性，可长期保持GST失活。

可用于活细胞的不可逆GST抑制剂

CNBSF ＜Irreversible GST Inhibitor＞

　　CNBSF（2-chloro-5-nitrobenzensulfonyl fluoride）是针对谷胱甘肽 S-转移酶（GST）的不可逆性抑制剂。与目前已知的作为GST抑制剂广泛使用的利尿酸相比，抑制活性明显更高，且因其不可逆性，可长期保持GST失活。

※ 本产品基于名古屋大学 理科研究科 阿部洋教授的研究成果商品化而成。

※ 本产品仅供研究，研究以外不可使用。

　　添加CNBSF至HeLa细胞中不可逆地抑制细胞内的GST后，使用用于活细胞的GST活性检测探针DNs-Rh（#FDV-0030）观察残留的GST活性。可发现， CNBSF的添加显著地抑制了细胞内GST的酶活性。

◆GST以及抑制剂的含义

　　谷胱甘肽S-转移酶（GST）家族是广泛存在于细菌和动植物的酶家族，具有在细胞内将疏水性外源性物质（xenobiotics）结合到谷胱甘肽（GSH）中并转换为GSH共轭物（GSH-conjugate）的活性。MRP（multidrug resistance-associated protein）转运蛋白积极地将GSH共轭物释放到细胞外，有着去除杂质的功能。因此，GST作为解毒因子，将可能成为细胞毒素的外来化合物排出细胞而起作用。

　　另一方面，由于大多数抗癌药等药物也会通过GST转换为GSH共轭物排出细胞外，因此GST作为耐药因子，也呈现出了降低药效的负面影响。尤其是随着癌症的恶化，特定GST亚型（GSTP1）的表达水平增强，由此可推断出癌细胞获得了强耐药性。虽然可以期待通过抑制GST活性提高抗癌药在细胞内的滞留性，然而迄今使用的GST抑制物质并不完善。传统的GST抑制物质主要使用与GSH竞争抑制的竞争性抑制物质。然而，尽管这些竞争性抑制物质在体外实验中展现出色的抑制活性，但从细胞内的情况来看，GSH浓度约为数毫摩尔便算是极高浓度，在细胞内引发竞争、获得充分的抑制效果是十分困难的。

◆新型GST抑制策略 BSF抑制剂

　　名古屋大学的阿部洋教授等人使用benzensulfonyl fluoride（BSF）基作为新的GST抑制策略，致力于制造在细胞内的不可逆性抑制物质，并在最后成功开发出在活细胞内呈现出色抑制活性的CNBSF ^1）。CNBSF拥有细胞膜穿透性，进入细胞后与GST的杂质识别部位H-site结合。GSH与GST的G-site结合，CNBSF在GST的蛋白内部附着到GSH上转换为GSH共轭物（GS-5NBSF），而GS-5NBS立刻与GST的Tyr108（GSTP_1-1时）发生不可逆反应。这个反应使GS-BSF无法从GST上脱离，并且由于堵塞了H-site、G-site，使GST失活。与传统竞争性抑制物质相比，这个方法能够使GST不可逆性地失活，达到长期抑制的效果。

◆详细原理

■　抑制反应机构模型（以GSTP_1-1为例）

1.　CNBSF和GSH分别与GST的H-site、G-site结合，GST的酶活性依赖GSH的硫醇根阴离子与CNBSF反应。CNBSF的氯离子CI^–作为离去基团而脱离。

2.　在GST酶内生成GS-5NBSF。

3.　在GS-5NBSF的benzensulfonyl fluoride基中GSTP_1-1与Tyr108发生羟基反应。

4.　伴随着氟离子F⁻的脱离，GST与GS-5NBSF通过共价键交联。

◆特点

●　拥有膜穿透性，可用于活细胞

●　在细胞内通过GST附着于GSH，作为GST抑制物质发挥功能

●　因为是不可逆性抑制物质，可长期抑制。另外，不同于传统的可逆性化合物，在清洗后仍然保持抑制作用

●　与已知GST抑制物质ethacrynic acid（EA）相比，在活细胞实验中呈现高抑制活性

●　可与广泛的GST家族反应

●　经质谱确认本产品与内源性GST（GSTP1-1）共价结合

◆原著文献

1. Shishido, Y., et al., ChemBioChem. (in press),

1. “A covalent inhibitor for Glutathione S-Transferase Pi (GSTP1-1) in human cells.”

◆应用实例

■　不可逆性GST抑制活性

　　使用GSTP_1-1重组体在体外实验评价抑制活性。GSTP_1-1在含有0.1 mM抑制物质的情况下于37°C反应2小时，在有和无超滤清洗后，使用1 μM的GST活性检测探针DNs-Rh（#FDV-0030）评价GST活性。从清洗后GST活性恢复可知，ethacrynic acid（EA）是可逆性抑制物质，从CNBSF清洗后仍保持抑制活性来看，CNBSF对GST的抑制是不可逆的。

■　活细胞中GST的抑制活性

　　用胰蛋白酶脱离NCI-H522细胞使其悬浮，然后添加1 mM的抑制物质在37°C下孵育15分钟。用PBS清洗细胞后，添加2.5 μM DNs-Rh（#FDV-0030），在37°C下反应1小时。然后再次使用PBS清洗细胞，去除未反应的试剂后，用流式细胞仪（Ex 490/Em 520 nm）定量。添加了CNBSF的细胞中，GST活性几乎完全消失，而且效果更甚于EA。

■　质谱鉴定GS-5NBSF结合位点

　　将化学合成的GS-5NBSF与纯化GSTP_1-1反应制备不可逆的加合物。质谱处理后，通过肽片段的MS / MS分析鉴定结合位点。结果显示，GS-5NBSF在Tyr108处结合。

◆产品列表

◆相关产品

可用于活细胞的GST活性检测成像探针DNs-Rh

　　DNs-Rh是拥有膜通透性并响应GST酶活性而发出荧光的探针。与广泛的GST家族成员交叉，轻松观察细胞的总GST活性。

可用于活细胞的不可逆GST抑制剂

金属吸附催化剂系列
由于可回收，人们一直使用金属吸附催化剂，特别是使用钯碳催化剂（Pd/C）的加氢反应被广泛应用在工业生产中。
现在，*Pd/C的制造商N.E.CHEMCAT公司开始发售金属吸附催化剂。

优点
含水产品，起火性低
从工业化生产到普通研究都可使用
全部品种全部包装现货销售

金属吸附催化剂系列

由于可回收，人们一直使用金属吸附催化剂，特别是使用钯碳催化剂（Pd/C）的加氢反应被广泛应用在工业生产中。

现在，*Pd/C的制造商N.E.CHEMCAT公司开始发售金属吸附催化剂。

 优点

含水产品，起火性低

从工业化生产到普通研究都可使用

全部品种全部包装现货销售

日本和光Wako食品分析-虾和蟹过敏原检测-甲壳类检测试剂盒 （胶体金免疫试纸法）
本产品是使用免疫层析法检测食品中甲壳类（虾，蟹）的试剂盒。只需1ppm起样品20分钟即可快速得到检测结果，对甲壳类，特别是虾/蟹特异性高，可靠性高的试剂盒。

日本和光Wako食品分析-甲壳类检测试剂盒

      2008年6月3日，日本的食品卫生法修订了新的实施规则，以“虾”以及“蟹”为原材料的加工食品，有义务在包装上表示出来。2010年6月起完全推行实施此规则。本产品是使用免疫层析法检测食品中甲壳类（虾，蟹）的试剂盒。

　　请利用本产品活用于日常的过敏源管理。

◆特点

●　检测快速：反应时间只需20分钟

●　高灵敏度：从1ppm起便可检测出来

●　特异性：对甲壳类，特别是虾、蟹特异性高。

●　可靠性

　　*请注意不能区分原料是虾还是蟹。

　　与甲壳类试剂盒「MARUHA」（#306-34861）有高关联性。

◆检测原理

操作方法

1.前处理

把食品样品用搅拌机均匀地粉碎。

2.提取

在粉碎的检验样品中加入提取液，高速搅拌器等搅拌30秒，搅拌3次后提取。

3.离心分离

用3,000×g以上离心20分钟，回收上清液。

4.过滤

用滤纸过滤上清液，得到的滤液作为检测溶液备用。

5.检测

把测试条放入样品中通常为3秒钟，在室温下静置20分钟，让它反应。

日本和光Wako食品分析-3-MCPD及其脂肪酸酯标准品
氯丙醇是国际公认的食品污染物，包括单氯取代的3-氯-1，2-丙二醇（3-MCPD）和2-氯-1,3-丙二醇（2-MCPD）以及双氯取代的1,3-二氯-2-丙醇（1,3-DCP）和2,3-氯-1-丙醇（2,3-DCP）。其主要污染来源于酸水解植物蛋白（HVP）以及食用油的精制中的副产品。氯丙醇不仅具有致癌作用，还有抑制精子活性的作用。

日本和光Wako食品分析-3-MCPD及其脂肪酸酯标准品

       3-氯-1,2-丙醇（3-MCPD）是在食品的加工和储藏过程中所形成的一种氯丙醇化合物。3-MCPD的其主要污染来源于酸水解植物蛋白（HVP）以及食用油的精制中的副产品，是公认的食品污染物，具有潜在致癌性。

　　3-MCPD可作为一个单独的化合物，也可与脂肪酸发生酯化反应。3-MCPD酯是一种稳定的中间体，由脂肪（油）转换成3-MCPD的一种副产物。研究表明3-MCPD酯存在于很多加工和未加工的食品以及食品调料中。一般来说，任何食品和食品调料中单独的3-MCPD的量都要远远小于由3-MCPD酯水解出来的3-MCPD量。

◆相关的国标

　　GB/T 5009.191-2006 食品中氯丙醇含量的测定

　　本标准*法适用于水解植物蛋白液、调味品、香肠、奶酪、鱼、面粉、淀粉、谷物和面包中3-氯-1 2-丙二醇（3-MCPD）含量的测定。

　　第二法适用于酱油、食醋、鸡精、蚝油等调味品、水解植物蛋白液、香肠、方便面调味包等食品中单氯取代的3-氯-1,2-丙二醇（3-MCPD）和2-氯-1 3-丙二醇（2-MCPD）以及双氯取代的1 3-二氯-2-丙醇（1 3-DCP）和2 3-氯-1-丙二醇（2 3-DCP）含量的测定。

　　第三法适用于酱油、食醋、鸡精、水解植物蛋白液等食品、调味品中3-MCPD、1 3-DCP和2 3-DCP 含量的测定。

　　GB/T 18782-2002 调味品中3-氯-1,2-丙醇的测定

　　本标准适用于酱油、酱油粉、酸水解植物蛋白调味液（粉）和其他调味液（粉）中3-氯-1,2-二氯含量的测定。

　　文献：油脂性食品中脂肪酸氯丙醇酯检测方法的研究进展

◆可提供的产品信息