日度归档:2024年6月28日
高品胎牛血清XQ-B0050
高品胎牛血清
- 产品型号:XQ-B0050
- 简要描述:高品胎牛血清金畔生物供应:光度计,检测仪,免疫仪,全系荧光定量PCR耗材,PCR八联管,进口PCR板,移液器,钻石吸嘴,离心管,冻存管,培养皿,培养板,培养瓶,吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器.
- 产品简介
高品胎牛血清 上海金畔生物供应:光度计,检测仪,免疫仪,移液器,钻石吸嘴,离心管,冻存管,培养皿全系荧光定量PCR耗材。
CG编号 产品描述 包装规格 细胞培养血清 XQ-B0050 高品 胎牛血清50ml 一瓶/箱 XQ-B0100 高品 胎牛血清100ml 一瓶/箱 XQ-B0500 高品 胎牛血清500ml 一瓶/箱 |
高品胎牛血清
胎牛血清:
胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。 显然,胎牛血清是品质好的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分少。
储存:-10℃,避光 恒温冰箱
运输:干冰
牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份, 常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的小分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.某些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
胎牛血清
产品优势:金畔生物代理实验室耗材,PCR耗材品种全,可替代仪器原厂耗材,性价比高,质量稳定,对用户可以节省实验成本。
适应客户:医院检验科PCR实验室,中心实验室,肝病中心;第三方检测机构,科研院所,大专院校,制药厂,试剂生产厂家,疾控中心,检验检疫。
温馨提示:不可用于临床治疗
ISOGENOME DNA提取试剂
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 产品价格 |
318-08111 | ISOGENOME | 10 mL | – | – |
314-08113 | ISOGENOME | 100 mL | – | – |
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
ISOGENOME
ISOGENOME用于从组织及细胞提取基因组DNA。
本产品为含有胍及表面活性剂的溶液。加水分解RNA即可选择性回收DNA。操作简单,便于大量提取及进行多个样品的处理。此外,配合RNA提取用试剂 ISOGEN II使用,可从同一样本提取RNA和DNA。
往样品添加ISOGENOME,进行溶解或均匀化,再进行乙醇沉淀、乙醇清洗、溶解,可快速提取DNA。
◆特点
● 提取基因组DNA仅需30分钟左右
● 新鲜组织的基因组回收率达70%以上
● 配合ISOGEN II使用可提取RNA及DNA
● 产品不含苯酚,操作中亦无须使用
● 提取到的DNA可直接应用于各种实验 Southernblotting、斑点杂交dot-blot hybridization、
克隆、PCR等
◆使用实例
操作前的注意事项
● 除了本产品,需准备乙醇(99.5%)、75%乙醇、8 mM NaOH、1M HEPES(用于调整pH)。
● 如需使用1.5 mL容量的离心管,步骤所用溶液请按比例缩小到0.8倍。
● 可在室温进行全程操作,但建议于4~28°C环境下进行离心操作。
● 高分子的基因组DNA容易被切断,混合时应避免过于激烈的震荡或漩涡混合,应尽量平稳地进行充分的混
合。
操作流程A:分离基因组DNA
操作流程B:配合使用ISOGEN II分离RNA、DNA(简易操作流程)
Data 1 DNA回收量标准
样品 |
µg DNA/mg tissue |
肝脏 |
4.3 ± 0.7 |
肾脏 |
3.6 ± 0.2 |
脾脏 |
22.8 ± 4.1 |
心脏 |
2.0 ± 0.4 |
肺 |
2.5 ± 0.4 |
骨骼肌 |
0.8 |
一般情况下,分离后的基因组DNA纯度(A260/A280)为1.6~1.9,大小为20~100 kbp。
◆产品内容
ISOGENOME (10 mL、100 mL) |
|||
产品 |
包装 |
保存 |
备注 |
ISOGENOME |
1瓶 |
室温 |
外观:绿色溶液 |
备注 本产品若长时间的低温保存,可能会析出少量的盐,但是不影响品质及性能。若出现该情况,请对各容器进行55~65°C、30~60分钟左右的孵化,并适当混合,待析出物完全溶解后即可使用。
◆备注
● 本产品仅适用于实验研究。请勿用于医疗用途。
◆相关产品
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· Distilled Water, Deionized, Sterile 去离子蒸馏水
Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X)(D7259-4ml)
![Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X)(D7259-4ml)](http://www.jinpanlab.cn/wp-content/uploads/2019/04/20190425_5cc1cb5220936.jpg)
Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) |
产品编号: D7259-4ml |
产品包装: 400次 |
产品价格: 102.00元 |
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D7259-4ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 400次 | 102.00元 |
上海金畔生物科技有限公司的Easy-Load™ PCR Master Mix(Orange, 2X)是一种使用特别便捷的含有橙色染料(电泳位置约50bp)的2倍浓度的PCR预混液,含有2X Taq DNA Polymerase、2X PCR Buffer、2X dNTP和2X Loading Buffer,只需加入模板DNA、引物和水即可进行PCR扩增,并且扩增完毕后可以直接上样电泳。主要适用于cDNA或基因组DNA等的常规PCR扩增,特别适合于定性或半定量的PCR扩增,也可用于长度小于2kb的DNA片段的扩增和克隆。
Easy-Load™ PCR Master Mix(Orange, 2X)中已经含有所有的通用组分,用户只需自备引物、模板DNA和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作,使操作更加快捷,也减少了PCR操作过程中可能导致的污染,使PCR的重复性更好。
Easy-Load™ PCR Master Mix(Orange, 2X)可以扩增出长达8kb的片段,但通常更适合用于扩增2kb以下的DNA片段。
本产品中加入了橙色的电泳示踪染料,其在浓度为1%琼脂糖胶中的迁移位置大约位于50bp处。PCR结束后可直接进行电泳检测,无需再添加上样缓冲液。橙色示踪染料不会影响对相应DNA条带的观察和检测。
本产品稳定性高,经测试,反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。反复冻融15次前后,使用不同引物扩增100-
1500bp间不同长度目的片段的效果如图1所示。
图1. 本产品反复冻融15次前后扩增不同长度产物的效果图。A. 反复冻融前本产品进行PCR的扩增结果。B.反复冻融15次后的本产品进行PCR的扩增结果。除本产品是否反复冻融15次外,A和B的反应体系完全相同,电泳的上样量也相同。
每毫升Easy-Load™ PCR Master Mix若用于50微升的PCR反应体系,足够用于40个反应;若用于20微升的PCR反应体系,足够用于100个反应。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7259-1ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 1ml |
D7259-4ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 1ml×4 |
D7259-20ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 1ml×20 |
D7259-100ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 1ml×100 |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存至少一年有效。适当避免反复冻融。如需频繁使用,可取适量存放于4℃,至少3天内有效。
注意事项:
由于PCR反应非常灵敏,可使目的基因扩增超过1000万倍,在设置PCR反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
Taq DNA polymerase在PCR过程中每个循环的出错几率约为2.2×10-5,对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的DNA聚合酶,例如Pfu DNA polymerase、BeyoTaq DNA polymerase等。对于普通的PCR或RT-PCR进行定性或定量检测,Taq DNA polymerase是最佳选择。
尽管本产品经过15次反复冻融后仍具有和冻融前几乎相同的PCR扩增效果,但仍宜适当避免反复冻融本产品,多次反复冻融可能使产品性能下降。
使用本产品前,一定要完全融化,并上下颠倒轻轻混匀后才能使用,并尽量避免产生气泡。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
- 1.PCR反应体系的设置:
- a.室温融解Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X),上下颠倒轻轻混匀后低速离心数秒。
- b.参考下表在冰浴上设置PCR反应体系:
试剂 最终浓度 体积 体积 双蒸水或Milli-Q水 – (21-x)μl (8.4-y)μl 模板DNA 10pg-1μg xμl yμl 引物混合物(10μM) 0.8μM 4μl 1.6μl Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) 1X 25μl 10μl 总体积 – 50μl 20μl - 注意:(a)通常引物的终浓度为0.2μM时可获得良好的检测效果,也可以根据情况在0.1-1.0μM范围内调整引物的终浓度。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度。
- (b) 对于不同类型的模板在50μl反应体积中推荐用量如下:
- 哺乳动物基因组DNA:0.1-1μg;大肠杆菌基因组DNA:10-100ng;质粒DNA:0.1-10ng。过多的模板DNA容易导致非特异性的PCR产物。
- c.用移液器轻轻吹打混匀或轻微Vortex混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。
- d.如果所使用的PCR仪有热盖则省略本步骤。如果PCR仪没有热盖,则在管内滴入一滴矿物油(mineral oil,ST275)。
- e.各设置好的PCR反应管置于PCR仪上,开始PCR反应。
- 2.PCR反应参数的设置可以参考如下示例:
- STEP1(起始变性): 94℃ 3min
- STEP2(变性): 94℃ 30sec
- STEP3(退火): 55℃ 30sec
- STEP4(延伸): 72℃ 1min
- STEP5(循环): Go To STEP2 for 30 cycles
- STEP6(最终延伸): 72℃ 10min
- STEP7(临时保存): 4℃ forever
- a.PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件包括温度、时间和循环数等。
- b.STEP4(延伸)的时间设置需根据PCR产物的长度进行设置,通常每kb产物的延伸时间为1分钟。例如PCR产物的长度为1kb,则延伸时间可以设置为1分钟,PCR产物的长度为2kb,则延伸时间可以设置为3分钟,以此类推。
- c.对于初次进行的PCR,为尽量确保可以扩增出预期的PCR产物,可以把循环数设置为35。对于需进行半定量或定量的PCR反应循环数一定要进行适当优化,使PCR反应没有达到平台期。
- 3.结果检测PCR结束后直接取5-10μl进行电泳检测,无需添加上样缓冲液。
注意:
常见问题:
- 1.PCR产物非常少或没有特异性条带。
- a.引物设计不佳是PCR过程中最常见的问题。请选择适当的引物设计软件进行引物设计,注意引物的GC含量、二级结构、二聚体、退火温度、长度、特异性等方面的问题。在加入酶切位点等的引物中,一定要注意加入酶切位点等后整条引物的GC含量、二级结构、二聚体、退火温度、长度、特异性等方面的问题。在原有引物效果不佳的情况并且阳性对照引物可以正常工作的情况下,可以考虑更换引物。
- b.待扩增片断GC含量偏高。GC含量较高的情况下PCR会变得相对比较困难,此时可以使用适合扩增高GC含量DNA片断的GC-rich buffer,并相应地根据GC-rich buffer的要求或说明调整PCR反应参数的设置。
- c.长片段扩增。尽管Taq DNA polymerase可以扩增最长达8kb的DNA片段,但大多数时候比较适合扩增2-3kb以下的片段,更长片段的扩增推荐使用其它更适合长片段扩增的DNA聚合酶。
- d.PCR反应设置时在室温进行容易导致非特异性条件。推荐在冰浴上设置PCR反应。
- e.由于引物存在一定的二级结构或存在一定的引物二聚体,或引物偏短,导致退火效果不佳。此时可以采用Touch down等方法进行退火,通常采用从65℃逐步缓慢降温到55℃或50℃的方法,使退火更加充分。
- f.退火温度不佳,需要优化。如果有温度梯度PCR仪,则可以设置退火的温度梯度,摸索退火的最佳温度。如果没有温度梯度PCR仪,则可以通过多次PCR反应摸索最佳的退火温度。
- g.延伸时间不足。可按照每1kb片段延伸1分钟进行设置,对于较难扩增的片段可以设置为每1kb片段延伸1.5-2分钟。
- h.待扩增片段GC含量较高或长度较长,变性不够充分。可以调节起始变性条件至95℃ 1min甚至95℃ 2-4min。
- i.在不同PCR仪上进行PCR反应,避免有时PCR仪出现问题。
- j.循环数不足,适当延长PCR的循环数。通常循环数最高不必超过40,常用的循环数范围为25-35。
- k.模板含量太低,适当加大模板量,或采用巢式PCR(nested PCR)或二次PCR。巢式PCR即为在原先设计的PCR引物内侧再设计一对PCR引物,然后对第一次PCR产物进行稀释后再进行一次PCR扩增,这样一方面可以起到扩增作用,同时也可以从第一次PCR产物中扩增出特异性条带。二次PCR则为比较简单地用原有引物对第一次PCR产物进行稀释后再进行一次PCR扩增,可以起到扩增作用,但不能去除非特异性条带。
- l.模板中含有抑制PCR反应的物质,可以用适当的DNA纯化方法例如柱纯化等纯化模板DNA。
- m.当产生较多非特异性条带时,可以适当提高退火温度。
- n.注意设置适当的阳性对照和阴性对照通常会有很大帮助。
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D7255-20ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Green, 2X) | 2000次 |
D7255-100ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Green, 2X) | 10000次 |
D7259-1ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 100次 |
D7259-4ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 400次 |
D7259-20ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 2000次 |
D7259-100ml | Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X) | 10000次 |
产品图片
![Easy-Load™ PCR Master Mix (Orange, 2X)(D7259-4ml)](http://www.jinpanlab.cn/wp-content/uploads/2019/04/20190425_5cc1cb5273544.jpg)
Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液,20×
Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液,20×
¥185.00
货号:BL1089A
规格:500mL
品牌:Jinpan
产品简介:
Tris-MOPS电泳缓冲液为Bis-Tris体系预制胶系列产品研制的配套电泳液,也可用于其它MOPS缓冲系统聚丙烯酰胺凝胶。本产品含SDS,适用于蛋白的变性凝胶电泳,配方经过优化,使获得非常优越的电泳效果。
本产品为20X浓缩液,使用前需要稀释成1×工作液。
使用方法(仅供参考):
1.量取25mL母液,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水或去离子水至400mL,充分溶解。
2.定容到500mL,即为1×Tris-MOPS–SDS电泳缓冲液工作液。
3.混匀后即可使用。
4.未用完的电泳液可室温保存,通常室温可保存 2-3 天,4℃可保存1-2周。
注意事项:
1、1×工作液配制好后使用时间不宜超过2周。
2、本电泳液适用于Bis-Tris缓冲体系凝胶,请勿用于其它缓冲体系凝胶。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
室温保存,一年有效。
货号 | BL1089A |
规格 | 500mL |
品牌 | Jinpan |