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pnabio具有NLS的Cas9蛋白

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pnabio具有NLS的Cas9蛋白

 

Cas9 Protein with NLS

 

与引导RNA结合的Cas9蛋白比质粒或mRNA转染为CRISPR / Cas9技术提供了优势。大的好处是您可以使RNP复合物易于在体内工作。Cas9蛋白寿命短（细胞中半衰期约为24小时），因此将脱靶效应和镶嵌性降至低。您还可以通过简单的裂解分析轻松地体外测试指导RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常稳定，与mRNA相比，活性确认要容易得多。后，由于它不需要转录或翻译，因此它在线虫，昆虫，植物和非典型模型系统等更广泛的生物中具有活性。

PNA Bio提供的Cas9蛋白与NLS偶联，可以注射/转染。

Cy3-Cas9可以很容易地富集被CRISPR / Cas9复合物转染的细胞。

体外裂解测定

将PCR产物与各种量的Cas9蛋白一起孵育并在凝胶上电泳。体外裂解测定是检查sgRNA活性的简单方法。

RNP复合体的转染

sgRNA的RNP复合体和各种Cas9蛋白通过电穿孔（Neon）或脂转染胺（LF2000）转染到NIH3T3细胞中。

注射RNP复合物

对于小鼠胚胎注射，将60ng / ul的Cas9蛋白和15ng / ul的两个sgRNA各自的RNP复合物注射到小鼠胚胎中。从幼犬中提取尾巴DNA并进行T7E1检测。灰色代表野生型，绿色代表大缺失（＃2,3,4,8），红色代表小in / del（＃5,6,7），蓝色代表纯合子。小in / del（＃9，10）。

 

Cas9蛋白

 

  • 化脓性链球菌 NLS的Cas9蛋白
  • 注射，转染就绪
  • 通过体外裂解测定，电穿孔（作为RNP复合物）和
    每批小鼠胚胎注射验证的活性
  • 标准浓度（CP01，重构为1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）
  • 高浓度（CP02和CP03，重构为5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03，250 ug x 4）
  • 包装：CP01为20 ug或50 ug，CP02 / CP03为250 ug
  • 建议使用CP01进行显微注射，建议使用CP02 / CP03进行电穿孔
  • 也可用：D10A切口酶（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白
  • 如果美国东部时间下午5点之前收到订单，Cas9蛋白通常在同一天发货
  • 欲了解更多，请联系我们 order@pnabio.com或单击此处。

 

 

Cas9蛋白的液体形式

 

  • 可用量为1 mg / ml或5 mg / ml
  • CP04-100：1毫克/毫升（6 uM），20 ug x 5管
  • CP04-500：5毫克/毫升（30 uM），100 ug x 5管

 

 

高保真SniperCas9蛋白 

 

  • 具有高保真度且不影响活性的Cas9蛋白变体
  • 通过定向进化方法发现
  • 可用1 mg / ml（CSP01）或5 mg / ml（CSP02）
  • 阅读有关SniperCas9的新出版物
  •  
  • 切口酶和dCas9蛋白

 

  • 化脓性链球菌的带有NLS的D10A Cas9切口酶蛋白（CN01和CN02）
  • D10A / H840A Cas9用化脓性链球菌（CD01和CD02）的NLS裂解死亡蛋白
  • 有50 ug大小（CN01 / CD01，重构为1 mg / ml）或250 ug大小（CN02 / CD02）。

 

 

Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白

 

  • Cy3用NLS（CP06）标记的Cas9蛋白，可对转染的细胞进行分类和可视化
  • 共聚焦显微镜检测荧光
  • 通过体外裂解测定和细胞转染证实活性
  • 提供25 ug，50 ug，100 ug或200 ug（CP06-200）
  • 浓度1 mg / ml或5 mg / ml
  • 也提供Cy3标记的dCas9蛋白（CD07）

 

Cy3-Cas9蛋白的活性通过电穿孔进入细胞，然后进行T7E1分析来确认。通过共聚焦显微镜确认荧光。

 

 

产品 描述 可用尺寸
CP01 
Cas9蛋白		 具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
重构为1 mg / ml（6 uM）		 20 ug（120 pmol / 6 uM x 20 ul）
50 ug（300 pmol / 6 uM x 50 ul）
200 ug（50 ug x 4管）
CP02 
高浓度
Cas9蛋白		 具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
重构为5 mg / ml（30 uM）		 250 ug（1530 pmol / 30 uM x 50 ul）
CP03 
高浓度
Cas9蛋白		 具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
重构为5 mg / ml（30 uM）		 1毫克（250 ug x 4）
CP04-100 
Cas9蛋白		 具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
液体形式，1 mg / ml（6 uM）		 100 ug（20 ug x 5）
CP04-500 
高浓度
Cas9蛋白		 具有NLS的Cas9蛋白（可注射）；
液体形式，5 mg / ml（30 uM）		 500 ug（100 ug x 5）
CS01 
SniperCas9蛋白		 HF Cas9 protein with NLS (injection ready);
reconstitutes to 1 mg/ml (6 uM)		 50 ug (300 pmol / 6 uM x 50 ul) 
200 ug (50 ug x 4 tubes)
CS02 
High conc 
SniperCas9 protein		 HF Cas9 protein with NLS (injection ready); 
reconstitutes to 5 mg/ml (30 uM) 		 250 ug (1530 pmol / 30 uM x 50 ul)
CN01 
nickase protein		 Cas9 D10A Nickase protein injection ready with NLS; reconstitutes to 1 mg/ml (6 uM) 50 ug
CN02 
nickase protein		 Cas9 D10A Nickase protein injection ready with NLS; reconstitutes to 5 mg/ml (30 uM) 250 ug
CD01 
dCas9蛋白		 具有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 
准备注射，复溶至1 mg / ml（6 uM）		 50微克
CD02 
dCas9蛋白		 具有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 
准备注射，复溶至1 mg / ml（6 uM）		 250 ug（50 ug x 5管）
CP06 
Cy3-Cas9蛋白		 Cy3用NLS标记Cas9蛋白； 
1 mg / ml或5 mg / ml溶液（30 uM）		 25 ug / 50 ug / 100 ug / 200 ug
CD07 
Cy3-dCas9蛋白		 Cy3用NLS标记Cas9死亡蛋白； 
5 mg / ml溶液（30 uM）		 50微克
200微克