上海金畔生物科技有限公司amsbio专业代理，AMSBIO成立于1987年，公司由艾伦和亚历克斯联合创立，总部位于西班牙马德里，AMSBIO在意大利，瑞士和英国均有办事处。AMSBIO的使命是成为一个生命科学研究的试剂和服务帮助客户开发创新的方法，过程，产品和药品的首要供应商，为学术团体和生物技术合作伙伴提供的技术和成本有效的解决方案。

Amsbio  STEM-CELLBANKER® 说明书

品牌：Amsbio

货号： 11897 

品名： STEM-CELLBANKER

描述：GMP Grade Stem Cell Cryopreservation Media

产品信息

产品描述

STEM-CELLBANKER ^®是GMP下生产的ES细胞和iPS细胞冻存液 产品特点是化学成分清晰，无动物源成分，专门针对ES细胞和iPS细胞特点设计的细胞冻存液

·  化学成分清楚和无动物源成分

·  按照日本，欧盟，美国和PIC / S GMP指南生产

·  复苏后保持细胞的高活力

·  解冻复苏后依然保持干细胞的多能性

·  实现细胞的长期冻存，不管是-80度还是液氮保存都可以保证活性10年以上

·  可以不需要液氮就可以长期保存

·  同样可以适合组织冷冻保存及其他珍贵细胞冻存

·  STEM-CELLBANKER 已经得到美国食品药物管理局的认证（生物制品评价和研究中心）

STEM-CELLBANKER ^®是*无的血清和动物源性成分的，所有成分*欧洲药典或美国药典的要求， 是干细胞治疗和应用zui合适的细胞冻存液，STEM-CELLBANKER ^®使用方便，不需要特殊设备和仪器就可以实现干细胞高存活率的冻存和长达10年以上的长期保存。

STEM-CELLBANKER ^®还显著增加细胞活力，同时保持细胞多能性，和细胞的正常核型和增殖能力，是一般冻存液无法达到的。

应用实例

使用STEM-CELLBANKER对人体胚胎干细胞（hESC） 和诱导多能（iPS）干细胞进行实际冻存测试。

测试冻存液：STEM-CELLBANKER冻存液 vs 常规细胞冻存液（细胞培养基 + 10% DMSO + 血清代替品）
细胞存活率评估方法：trypan Blue 和 Live/Dead assay kit试剂盒

测试结果：使用STEM-CELLBANKER冻存液的细胞存活率明显提高，HS293, HS306 and ChiPSA 分别高达９３%、９６%　和９０％，比只有５０％存活率的常规细胞冻存液高一倍。同时，结果也显示STEM-CELLBANKER冻存液没有给细胞的增殖、分化和染色体组形带来影响。

STEM-CELLBANKER用于小鼠肾脏组织冻存比较图：

图2.将小鼠肾脏切碎成约5平方毫米。将组织样品或者立即固定用10％福尔马林或冷冻保存与在-801毫升STEM-CELLBANKER的^ø C一周。冷冻保存的样品在解冻后立即用10％福尔马林固定。两种样品的石蜡切片用H＆E或抗活性半胱天冬酶3抗体染色。在新鲜和冷冻保存的组织样品中，坏死或细胞凋亡的迹象都可以忽略不计。在来自各种小鼠器官的组织样品的情况下获得了类似的结果。

STEM-CELLBANKER保存的细胞MRNA保存水平图

图3.总RNA从小鼠肺成纤维细胞系的任收获后立即或在-80与STEM-CELLBANKER冻存后的细胞中提取^ø C一周和解冻。通过DNA微阵列分析比较两个样品中的mRNA水平，结果显示93％的mRNA在±1.6倍差异的范围内。

 使用STEM-CELLBANKER小鼠胚胎干细胞（129SV）进行实际冻存测试。

细胞株：129SV (Mouse ES cell) 
测试冻存液：ZENOAQ 产品（CELLBANKER 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER）
常规自培冻存液（90% FBS+10%DMSO 和 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程图：

使用手册:

细胞冷冻保存方法

选择冻存处于对数生长数的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

1.    按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。

2.    按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。
（参考：5×105 至 5×106 cells/ml）。

3.    取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞(参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)。移去离心管中的上清液。

4.    加入适量的CELLBANKERⓇ 细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为 5×105 至 5×106 cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。

5.    将离心管中的细胞混合液分装于已标示*的冷冻保存管中。

6.    直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。

7.    若研究者需要液氮保存时，可将*冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。

冻存细胞复苏方法

1.    从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37℃ 振动水浴槽中快速解冻。

2.    待冻存管中细胞混合液*融化后，立即加入1ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有9ml该细胞培养基的试管中，混合均匀。

3.    离心收集培养细胞((参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)，移去上清液。

4.    清洗细胞，充分洗净残留冻存液。

5.    加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后，将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。

6.    精检后，研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。

储存方法和保质期

储存于４度以下。 保质期３年。3个月以上没有使用CELLBANKER冻存液的计划时，尽可能冷冻保存。为避免重复冻结–解冻过程可能导致的CELLBANKER品质下降和性能降低，推荐将 100mL 产品分装小瓶后，再存放于 4℃以下或－20℃冰箱冻存。

质量保障承诺

1.    STEM-CELLBANKER 细胞冻存液经过严格内毒素、pH、渗透压和微生物检查，确保产品不含细菌、霉菌以及支原体。

2.    使用小鼠胚胎干细胞（Mouse ES Cells）、Jurkat　和SK-007细胞验证性能测试冻存细保存活率达８０％以上．

注意事项

1.    CELLBANKER系列产品只供实验室研究使用，是试剂级产品。

2.    我们推荐用户在使用本产品之前，事先对所使用的细胞进行至少为期 1 周的
试验性细胞冷冻保存培养。确认性能后再进行冻存。

3.    免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

amsbio 其它产品信息：

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多个品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

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6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

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