双组份TMB显色液

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产品编号 C04-03002
英文名称 TMB Two-Component Substrate solution(for Elisa)
中文名称 双组份TMB显色液
别    名 TMB kit; ELISA TMB kit; TMB Color liquid;   双组分TMB显色试剂盒;TMB显色试剂盒;TMB显色液; ELISA酶-底物显色液; TMB显色液(ELISA HRP显色用); TMB Chromogen Solution for ELISA, TMB Substrate Solution for ELISA or TMB Solution for ELISA;
双组份TMB显色液
Specific References  (4)     |     C04-03002 has been referenced in 4 publications.
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保存条件 Store at 2-8℃ for one year.
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 产品简介:
目前酶免疫分析(EIA)技术,已被广泛应用于抗原,半抗原或抗体的定量或定性检测分析。辣根过氧化物酶(HRP)及其偶联物是酶联免疫分析技术中常用的一种酶,3,3’5,5’-四甲基联苯胺二盐酸(3,3´,5,5´tetramethylbenzidine,TMB)为过氧化物酶底物,常用作ELISA等免疫检测的显色剂。TMB被过氧化氢氧化时(由HRP催化)可形成蓝色产物,主要吸收峰在370nm和652nm。加入硫酸等酸性终止液后,变成黄色,最大吸收峰为450nm。TMB灵敏度很高,达到相同的检测灵敏度需要的量比ABTS少,但这也可能产生较高的背景,所以要求使用较少的蛋白或较低的抗体浓度。

显色步骤:
1、加液:待样品孔中加完HRP结合物并孵育一定时间后,用适当洗涤液洗板3-5次,每孔加底物显色液A、显色液B各50ul(A、B液先混合再加入孔中),轻轻混匀,根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
2、终止:每孔加入50ul终止液C终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
3、终止反应后15分钟内在450nm处测定各孔溶液的吸光值。
4、对照:空白对照不加HRP标记的抗体/抗原和阴性对照结果应无色。阳性对照及加HRP标记的抗体/抗原产生深蓝色产物。
5、注意:如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。

注意事项:
1、实验用品应该专一,避免交叉污染。
2、TMB对人体有刺激性,请注意适当防护。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。