凝胶回收试剂盒(含柱)

上海金畔生物科技有限公司提供凝胶回收试剂盒(含柱) ,欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 C6203
英文名称 DNA Extraction Kit
中文名称 凝胶回收试剂盒(含柱)
别    名 Gel Extraction Kit (with column);   DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒;
保存条件 室温干燥可保存一年,4℃保存可更长时间。
使用时如发现结晶,可于 37~55˚C水浴加热助溶。离心吸附柱不建议低温或大于 30˚C 保存,否则可能影响吸附效率。
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 产品简介
胶回收试剂盒利用硅基质材料在高盐缓冲系统对 DNA 高效、专一吸附的原理,配备聚合美自主研发的膜结合液(又称溶胶液)和高性能的硅胶膜离心吸附柱,可在 15 分钟内清除凝胶、核酸染料及其他杂质,高效回收 DNA 片段。本试剂盒配套的膜结合液和离心吸附柱的最大吸附量为 20µg,对 100-10000 bp 线性双链 DNA 片段的回收效率可高达 50-90%,也可用于单链 DNA 片段和质粒 DNA 的纯化。因回收率受 DNA 片段大小、浓度等因素的综合影响,故应尽量加大电泳的 DNA 片段浓度,以提高回收率。回收后的 DNA 片段可以直接用于酶切、连接、测序、标记、杂交和体外转录等多种分子生物学实验。

回收效率
50 bp 回收效率:30-50%
100-200 bp 回收效率:50-70%
200-5000 bp 回收效率:70-90%
5 kb-10 kb 回收效率:50-70%

产品组份
膜结合液(MB):25ml (50T)
膜漂洗液(MW):15ml (50T) 初次使用前请按瓶标说明加入无水乙醇混匀
洗脱缓冲液(EB):10ml (50T)
平衡液(BL):25ml (50T) 请使用当天平衡液处理过的吸附柱
离心吸附柱及收集管:50(50T) 室温密闭干燥保存

实验准备
用户需自行准备的材料:含 DNA 样品的琼脂糖凝胶,无水乙醇,异丙醇, 55ºC 水浴,切胶设备,台式离心机。
初次使用本试剂盒,请按瓶标说明向膜漂洗液(MW)中加入相应体积的无水乙醇(用户自备),并在试剂瓶上做标记。

操作步骤
1. 柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入 400 μl 的平衡液 BL,12,000 rpm (-13,400×g ) 离心 1 min,弃收集管中滤液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子,这一步很重要,试剂盒放置时间长不用,处理一下效果如新,减少浪费。如果新开封马上用,可以不做柱平衡)
2. 切胶:用干净刀片将目的 DNA 条带切下,尽量切除不含 DNA 的凝胶。注意:紫外线对 DNA 片段有损坏作用,切胶要迅速,避免长时间照射,同时做好眼睛及皮肤的防护。
3. 称重:将切下的含有目的 DNA 条带的凝胶切成小块,放入已称重的 1.5 ml 塑料离心管中,再称重(总重-空重=净重)。
4. 溶胶:加入等体积膜结合液(MB),60℃水浴,每隔 2-3 min 上下振荡,直到凝胶完全溶解。注意:如凝胶重量为 100 mg,其体积可视为 100 ul,则加入 100 ul 膜结合液;如凝胶浓度大于 2%,所用膜结合液体积加倍;对于 回收<300 bp 的小片段或者大于 3000bp 的大片段,可在凝胶完全溶解后再加入 1> 5. 吸附:待溶液冷却后加入离心吸附柱中,室温静置 2 min,让 DNA 片段与吸附柱中的硅胶膜充分结合,然后 12,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中滤液。注意:如总体积超过 750 ul 可分 2 次将溶液加入同一离心吸附柱中;为增加目的 DNA 片段的洗脱浓度,也可将多管溶胶液加入到同一离心吸附柱中。
6. 清洗:加入 600 ul 的膜漂洗液(MW),12,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中废液。注意:膜漂洗液(MW)按要求加入乙醇,用后应立即盖紧瓶盖,以防酒精挥发; 如后续实验要求纯度较高,可再清洗一次。
7. 干燥:将离心吸附柱于 12,000 rpm 离心 2 min,甩干残留漂洗液。注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续实验。
8. 洗脱:将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管中,在吸附柱中央加入 30-50 ul 洗脱缓冲液(EB),室温放置 2 min。12,000 rpm 离心 1 min 收集 DNA 片段。注意:为增加回收效率,可将洗脱液在 60℃预热,也可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置 2 min,再次离心收集。如需使 用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0-8.5 之间)。