外泌体提取试剂盒(细胞培养基上清)
¥1800.00
货号:BL920A
规格:50ml
品牌:Jinpan
产品简介:
外泌体(Exosome)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。外泌体被认为是特定细胞间效应物及信号大分子传递的信使,然而,人们对外泌体的形成,组成成分及所参与的生物学过程仍不完全清楚。对外泌体功能及转运机制进行生物学研究,需要研究者首先能够分离、提取出完整的外泌体, 但目前所使用的提取方法复杂繁琐, 且特异性不高。
外泌体提取试剂(细胞培养基上清)提供了一种从细胞培养液样品中浓缩、分离完整外泌体的简单且可靠的方法。通过试剂中的亲水性基团锁住样品中的水分子,迫使外泌体从细胞培养液样品中分离出来,然后通过短暂低速离心来收集总外泌体。
操作提示:
由于细胞培养常规所用的胎牛血清(FBS)本身含有较高含量的外泌体,为了确保所分离的外泌体来源于你感兴趣的目的细胞,建议使用无外泌体胎牛血清(FBS)培养目的细胞,否则会导致所收集的细胞来源外泌体掺入胎牛血清外泌体,出现污染现象。若无法获得无外泌体胎牛血清,一些细胞系也可采用无血清培养的方式培养长达12小时,即可避免外泌体污染现象。
使用方法(仅供参考):
1.收集细胞培养上清液,3000xg离心15分钟以去除上清液中的细胞及细胞碎片。
2.取上清转移至新的洁净EP 管中,切记不要搅动上清液中的团状沉淀物。
3.向步骤2中所收集的不含细胞的细胞培养上清液中加入0.5 倍体积的外泌体提取试剂(如:1 mL 细胞培养上清液中加入0.5 mL外泌体提取试剂;10 mL细胞培养上清液中加入5 mL外泌体提取试剂)。
4.轻摇或涡旋混匀细胞培养上清液/外泌体提取试剂混合物,直至成为均质溶液,4℃孵育过夜。
5.完成步骤4后,将样品置于4℃,10000xg离心30分钟。
6.吸弃上清液,EP 管底部的米色或白色沉淀物即含有外泌体(大部分情况下肉眼不可见)。
7.用适量PBS缓冲液或同类缓冲液重悬沉淀物(如:1 mL细胞培养上清液所得外泌体沉淀物,重悬体积为:25-100 µL;10mL细胞培养上清液所得外泌体沉淀物,重悬体积为:100-1000 µL)
8.沉淀物被重悬后,所获得的总外泌体即可用于下游分析鉴定实验,或进一步纯化总外泌体。分离提取获得的总外泌体可于4℃保存长达1周,-20℃长期保存。
注意事项:
1、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
4℃保存,一年有效。
货号 | BL920A |
规格 | 50ml |
品牌 | Jinpan |
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