Formedium植物媒介促进大肠杆菌培养


Formedium植物媒介促进大肠杆菌培养

Formedium在其培养基中添加了六种植物培养基,用于培养大肠杆菌。在所有六种植物培养基中,对于以下LB Miller培养基,LB Lennox培养基和2YT培养基的配方,胰蛋白胨已被大豆蛋白胨替代。胰蛋白胨和酵母提取物作为生长和蛋白质表达的一般氮源存在。两者都是氮的*来源,另外酵母提取物提供B型维生素,碳水化合物和生长因子。

在植物培养基中,因此避免了用动物来源的成分污染培养基,用大豆蛋白胨代替胰蛋白胨。与作为牛奶酪蛋白的胰腺消化物的胰蛋白胨相反,其替代大豆蛋白胨通过大豆粉的Papaic水解制备。与胰蛋白胨相比,大豆蛋白胨的氮含量(9.5%)略低,其氨基氮含量(3%)相同。这种差异小于2%,并且不会显着影响生长和蛋白质表达。

使用胰蛋白胨作为氮源和大豆蛋白胨作为替代来源的比较研究显示生长没有差异。

在液体培养基中,通过680nm处的光密度测量大肠杆菌的细胞生长,这在LB Miller Broth,LB Lennox Broth和含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的2YT肉汤培养基中培养的细胞的生长曲线之间未显示任何显着差异。
在LB Lennox Agar的菌落形成单位(CFU)的固体培养基计数中,含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的LB Miller琼脂和2YT琼脂彼此没有显着差异。

含有大豆蛋白胨和胰蛋白胨的培养基之间没有显着差异。与在液体和固体培养基中使用胰蛋白胨相比,大豆蛋白胨也表现良好。

在所有三种培养基LB Miller Vegetal培养基,LB Lennox Vegetal培养基和包含大豆蛋白胨的2YT植物培养基中,不存在动物来源的成分。由于没有动物源组件Formedium证明;

  • 在本产品的制造过程中,不使用源自动物或来自动物的原料。
  • 生产中使用的材料符合经指令1999/82 / EC修订的欧洲指令75/318 / EEC。

因此,Formedium Ltd.认为该产品在牛海绵状脑病(BSE)或传染性海绵状脑病(TSE)方面没有任何风险。

Formedium Vegetal媒体

方法:
肉汤培养:在LB Lennox,LB Miller和2YT培养基中测量细胞生长。
每种培养基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制剂中。

  • 将单菌落在5ml所有三种培养基中孵育(3胰蛋白胨对3大豆蛋白胨)O / N在37℃,180rpm。
  • 在第1天:100稀释后,在150ml烧瓶中培养30ml,温度为37℃,180rpm。通过每小时测量的680nm的光密度测量生长
  • 3生物重复
  • LB Lennox(g / l); 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10,酵母提取物5,NaCl 5. 
    LB Miller(g / l); 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10,酵母提取物5,NaCl 10. 
    2YT; (克/升); 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16,酵母提取物10,NaCl 5。

 

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Formedium Vegetal媒体

方法:
平板上的琼脂培养:在LB Lennox,LB Miller和2YT琼脂平板上测量菌落形成单位的数量。
每种培养基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制剂中。

  • 将单菌落在5ml所有三种培养基中孵育(3胰蛋白胨对3大豆蛋白胨)O / N在37℃,180rpm。
  • 第100天,将100μl10倍稀释系列(至10-6)涂布在与琼脂相同的培养基上(例如,Miller肉汤菌落到Miller琼脂上,Lennox-Soya菌落到Lennox-Soya琼脂上)。在37°C下孵育O / N.
  • 3个生物重复的菌落计数(cfu / ml)
  • LB Lennox(g / l); 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10,酵母提取物5,NaCl 5,琼脂15. 
    LB Miller(g / l); 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10,酵母提取物5,NaCl 10,琼脂
    15。2YT; (克/升); 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16,酵母提取物10,NaCl 5,琼脂15。

 

 

 

VLB-Broth Lennox

SKU 包装尺寸 价钱
VLBBL1L 1升装 £ 2.56
VLBBL2L-1 2升装 £ 4.12
VLBBL5L 5升装 £ 5.90
VLBBL10L 10L装 £ 10.24
VLBBL20L 20升装 £ 16.37
VLBBL0250 250克 10.80 英镑
VLBBL0500 500克 £ 19.59
VLBBL1000 1公斤 35.73 英镑
VLBBL6000 6 x 1kg £ 167.40

 

克/升

大豆蛋白胨 10
酵母抽提物 5
氯化钠 5
终pH值 在25°C时为7.0±0.2

 

 

 

 

 

 

 

将20克粉末介质悬浮在1升蒸馏水中,在室温下干燥。

 

 

MCLAB 大肠杆菌 DNA连接酶

 

Molecular Cloning Laboratories(MCLAB)成立于1998年,是为生命科学界提供基因组研究耗材和服务的先进者。

MCLAB提供具有成本效益的消耗品和试剂,专注于代以及新一代测序和DNA片段分析。我们提供大量分子生物学相关产品,包括抗体,生化试剂,克隆试剂盒,酶,PCR试剂盒,蛋白质凝胶和溶液等。作为我们自己的制造商,我们可以控制生产流程,并大限度地减少定制和大规模订单的延迟。它有助于确保我们的客户获得高的质量和价值。

MCLAB拥有一支由20 多位经验丰富的科学家组成的团队,致力于为研究人员提供高质量的服务。我们专注于基因组学领域,拥有DNA测序,发酵,片段分析,分子克隆,过表达,蛋白质纯化和蛋白质合成方面的专家。我们采用量身定制的客户服务方式,让您有机会定制您的项目,并直接与我们的科学家团队交流以获得技术支持。凭借二十多年的经验,我们才华横溢,技术的员工致力于为您提供所需的成果。

大肠杆菌 DNA连接酶

E. coli DNA Ligase

大肠杆菌 DNA连接酶是NAD +依赖性酶,其催化dsDNA的互补3'-羟基和5'-磷酰基末端之间的磷酸二酯键的形成。

 

名称

货号

尺寸

浓度

大肠杆菌DNA连接酶

EDLA-100

1,000个单位

10,000 U / ml

大肠杆菌DNA连接酶

EDLA-200

5,000个单位

10,000 U / ml

大肠杆菌DNA连接酶

EDLA-OEM

任何尺寸

 

描述:
大肠杆菌 DNA连接酶是NAD +依赖性酶,其催化dsDNA的互补3'-羟基和5'-磷酰基末端之间的磷酸二酯键的形成。该酶与内聚的dsDNA末端一金畔挥*作用,并且对切口DNA也有活性。平末端可以在冷凝试剂例如聚乙二醇或聚蔗糖的存在下结扎®。酶提供10x反应缓冲液。

来源:
大肠杆菌含有的过量生产克隆菌株大肠杆菌 DNA连接酶。

应用:
– 克隆连接
– 冈山和Berg cDNA克隆

单位定义:
一个单位的大肠杆菌DNA连接酶定义为在标准温度16°C下30分钟内提供连接(> 50%)Hind III消化的噬菌体λDNA(5'-DNA末端浓度为0.12μM,300μg/ ml)所需的酶量测定条件。

反应条件:
10× 大肠杆菌 DNA连接酶反应缓冲液
温育在16℃下

10倍的大肠杆菌 DNA连接酶反应缓冲液:
300mM的Tris-盐酸
40毫摩尔MgCl 2
260μMNAD 
的10mM DTT 
的pH 8.0 @ 25℃

具体活动:  10,000单位/ m g

推荐储存条件: -20°C 

参考文献:
1。Zimmerman,SB和Pheifer,BH(1983)Proc。国家科。科学院。Sci。,USA 80,5852-5856。
2. Okayama,H。和Berg,P。(1982)Mol。细胞。生物学。2,161-170。

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

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westbioscience大肠杆菌系统的优缺点

 

所有West Bioscience定制的蛋白表达和纯化均在我们的加利福尼亚工厂进行,以确保的质量和的客户满意度。我们一直是提供高质量重组蛋白表达和纯化服务的,尤其是在定制蛋白设计领域。我们向客户交付了数千种蛋白质。

 westbioscience大肠杆菌系统的优缺点

 优点

  • 表达水平可能很高
  • 低成本
  • 快速增长
  • 可扩展
  • 简单的转换协议
  • 可以更改许多参数以优化表达式

 缺点

  • 低效的二硫键形成
  • 蛋白在细胞质中折叠不良
  • 包涵体形成
  • 体外重折叠方案效率低下–可能会抵消优势
  • 密码子的用法不同于真核生物
  • 少的翻译后修饰
  • 内毒素

克隆

我们将通过标准亚克隆或PCR克隆将您的插入片段克隆到表达载体中。  将用于将目的基因转移到表达载体中。将对克隆进行*排序以进行验证。

 表达筛选

含有目的基因的表达载体将被转化到大肠杆菌的表达菌株中以产生蛋白质。几个单独的克隆将在小规模的诱导实验中进行筛选。表达结果将通过SDS / PAGE和蛋白质印迹进行分析。

 表达优化

表达条件将通过诱导时间,温度和培养基条件来优化。结果将通过SDS-PAGE和Western blot确认。

 蛋白质表征

将测试小规模的培养物,并对表达的蛋白质进行表征,以区分纯化标签的细胞位置,溶解度,产量和可及性。将设计生产和纯化蛋白质的详细策略。

 蛋白质生产

使用摇瓶将以升量进行大规模生产。如果您喜欢自己纯化蛋白质,则将收到细胞沉淀物以及带有SDS-PAGE和Western blot分析结果的完整报告。

 蛋白质纯化

 

可以使用多种方法纯化蛋白质,例如包涵体制备或亲和柱纯化。

 

biogenes 大肠杆菌|360-HCP 抗体说明书

biogenes 大肠杆菌|360-HCP 抗体说明书


E.coli|360-HCP Antibodies

大肠杆菌|360-HCP 抗体

用于 ELISA 应用的检测抗体。

用于蛋白质印迹中直接抗原检测的一抗

矿物介质 LB培养基
E型:W3110 C型:W3110

 

Product
Product code
Price
  1. Anti-E.coli antibody Type C
    IP 213
    €535.00

     *

  2. Anti-E.coli Antibody Type E
    IP 215
    €535.00

     *

 

C型抗大肠杆菌抗体

€535.00

 *

抗大肠杆菌抗体,亲和纯化的抗大肠杆菌-HCP-IgG(C 型,在山羊体内制备)在稳定溶液中。

0.5 毫克
1 毫克/毫升; 0.5 mL 在 TBS 缓冲液 pH 7.5 中,用 0.02% NaN3 稳定

大肠杆菌克隆表达菌株


大肠杆菌克隆表达菌株

简要描述:大肠杆菌克隆表达菌株

详细介绍

产品咨询

大肠杆菌克隆表达菌株

 

Pict 产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
DC-J001 BL21(AI) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J002 BL21(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J003 BL21(DE3)plysS 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J004 Bl21codonplusRIPL 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J005 C2566 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J006 DH5a 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J007 DH5a(pir) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J008 E2566 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J009 ER2529 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J010 HB101 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J011 HMS174(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J012 JF1125 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J013 JM101 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J014 JM103 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J015 JM105 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J016 JM107 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J017 JM109 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J018 JM110 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J019 K802 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J020 M15 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J021 MG1655 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J022 Novablue(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J023 Orgami(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J024 OrgamiB(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J025 Rosetta 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J026 Rosetta(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J027 Rosetta(DE3)plys 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J028 Rosetta-gami(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J029 Rosetta-gamiB(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J030 Rosetta-gamiB(DE3)plysS 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J031 SG1117 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J032 TB1 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J033 TG1 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J034 *0 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J035 *0F 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J036 Tuner(DE3) 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J037 XL blue 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J038 XL-10gold 甘油菌(0.5ml) 600元
DC-J039 阴沟肠杆菌 甘油菌(0.5ml) 600元