巨噬细胞去除实验

去除巨噬细胞是研究巨噬细胞功能的重要方法。巨噬细胞可吞噬clodronate Liposome,在溶酶体的作用下,clodronate可释放出来,当其达到一定浓度时,可引起巨噬细胞的凋亡,从而去除巨噬细胞。clodronate Liposome可局部注射去除注射部位临近的巨噬细胞,如肺、膝关节、肿瘤局部和脑等;也可尾静脉或腹腔注射去除循环途径中的单核巨噬细胞,如肝脏和脾脏中的巨噬细胞。

 

1.       脂质体的准备

美国的FormuMax Scientific可以提供多种clodronate Liposome 具体产品可以上http://www.liposomeexpert.com查询  

www.jinpanbio.com  021-50837765

 

2.       脂质体的体内注射

隔日尾静脉注射200ul clodronate liposome,根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化或流式检测巨噬细胞的去除效率。

 

尾静脉注射方法:

1.       将小鼠放在倒扣的饭盒内,从孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉;

2.       将纱布浸泡于约70度的温水中,拿出后包裹尾巴,以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的;

3.       行尾部静脉注射时,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出约2cm一段,使皮肤紧张,静脉更为充盈,右手持1ml针头注射器,使针头与静脉平行小于30°,从尾巴的下1/4处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,可注入药物。

有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部移动,更换血管位置注射给药。拔出针头后,用棉球按住注射部位轻压1-2min,止血。

immunotools重组人巨噬细胞集落刺激因子

 

immunotools重组人巨噬细胞集落刺激因子标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准物质,以效价单位(U)表示。包括:化学计量标准品、药检标准品,中药标准品,Sigma标准品,usp标准品,化学标准品,进口标准品。对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质.


immunotools重组人巨噬细胞集落刺激因子 血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。类别有胎牛血清immunotools重组人巨噬细胞集落刺激因子(现货)、透析型胎牛血清、天然低IGG胎牛血清 、干细胞培养胎牛血清 、特殊用途胎牛血清、活性炭/葡萄糖处理胎牛血清、胎牛血清替代物、小牛血清 、新生牛血清 、供体马血清 、兔血清 、鸡血清 、猪血清 、马血清 、其他动物血清 、合成血清替代品。


immunotools重组人巨噬细胞集落刺激因子实验仪器,是自然科学具体实验时用到的仪器,主要是物理学、化学、生物学使用仪器较多,是用以检出、测量、观察、计算各物理量、物质成分、物性参数等的器具或设备。仪器用途多种多样,在科学研究的实验室里、在医学研究和实践中仪器是非常重要的科研工具和装置.


                                                                                             

货号 品名 规格 品牌
11343384 rh MCP-1 20μg immunotools
21330701 anti-human cd70 100 μg in 100 μl immunotools
11343015 rh TNF-alpha 50μg immunotools
11340013 rh IL-1beta 10μg immunotools
12343016 rm TNF-alpha 100μg immunotools
11344170 Recombinant Human Eotaxin-2 (CCL24) 5ug immunotools
11343415 Recombinant Human Hepatocyte Growth Factor (rh HGF) 50µg immunotools
11343013 Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha 10ug immunotools


重组人肿瘤坏死因子α

(rh TNFα)

同义词:肿瘤坏死因子配体超家族成员2、恶病质、DIF、TNFSF2、坏死素、细胞毒素。

简介:肿瘤坏死因子是一种参与全身炎症的细胞因子,是一组刺激急性期反应的细胞因子之一。TNFalpha主要由巨噬细胞分泌。

TNFalpha导致凋亡细胞死亡、细胞增殖、分化、炎症、肿瘤发生和病毒复制,并参与脂质代谢和凝血。TNF的主要作用是调节免疫细胞。TNFalpha的失调,尤其是生产过剩,与多种人类疾病有关——自身免疫性疾病、胰岛素抵抗和癌症。

说明:在大肠杆菌中产生的重组人TNF-α是一条单一的非糖基化多肽链,包含158个氨基酸,分子量为17483.77道尔顿。rh-TNF-α通过标准色谱技术纯化。

来源:大肠杆菌

外观:无菌过滤白色冻干(冻干)粉末。

配方:从0.2µm过滤溶液中加入含有200mM NACl的25mM乙酸钠(pH 6.5)进行冻干。

1µg的等份含有5%(w/vol)的海藻糖,以便更好地回收。

溶解度:建议在不小于100µg/ml的无菌H2O中重新配制冻干rh TNFα,然后再将其稀释到其他水溶液中。

稳定性:冻干的rh-TNF-α虽然在室温下稳定3周,但应在-18°C以下干燥保存。重组后,rh-TNF-α应在2-7天之间在4°C下保存,以备将来在-18°C以下使用。对于长期保存,建议添加载体蛋白(0.1%HSA或BSA)。

请防止冻融循环。

纯度:SDS-PAGE测定大于98.0%。

氨基酸序列:测定前五个N端氨基酸的序列,发现其符合Val-Arg-Ser-Ser。

内毒素:LAL法测定的内毒素水平小于1 EU/µg

生物活性:放线菌素存在下小鼠L929细胞的细胞裂解测定的ED50<0.05 ng/ml,对应于

比活度为2 x 107 IU/mg。

本材料仅供研究使用。不用于人体。仅供体外使用。ImmunoTools将不对

i负责

 

使用我们的产品时可能发生的侵权或其他违规行为。


small 10 µg Cat.N° 11343013

medium 50 µg Cat.N° 11343015

large 250 µg Cat.N° 11343017

x- large 1000 µg Cat.N° 11343018


 

Clodronate liposomes巨噬细胞清除试剂详细介绍


clodronateliposomes

 

巨噬细胞清除试剂Clodronate Liposomes详细介绍

 

上图就是由Liposoma B.V.公司生产的Clodronate Liposomes,

去除巨噬细胞(depletion of macrophages)是研究巨噬细胞功能的重要方法。荷兰阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授开发的一款Clodronate Liposomes,可以利用巨噬细胞的内吞机制,将膜不通透性的氯磷酸(clodronate)带入细胞内,从而达到去除巨噬细胞的目的。

作用原理:

两亲性磷脂分子在水中可以形成同心圆形式的磷脂双分子层球体,磷脂双分子层中间通过水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸盐在形成脂质体的过程中被包裹进磷脂双分子层之间的水相中(如图1)。游离的氯磷酸盐不能自由的通过脂质体的磷脂双分子层。随着脂质体被巨噬细胞吞噬,在巨噬细胞溶酶体磷酸酶的作用下,溶解在脂质体水相中的氯磷酸盐就可以被逐步释放出来,并累积在细胞内,当其达到一定浓度时,巨噬细胞将会受到不可逆转的损伤,从而进入凋亡过程(如图2)。从死亡的巨噬细胞中释放出来的氯磷酸盐在细胞外的半衰期极短(大约15min),可以通过泌尿系统排除体外。

 

 

1氯磷酸脂质体Clodronate liposomes复合物。在脂质体的形成过程中氯磷酸通过溶解在水溶液中被包裹进磷脂双分子层之间的水相中。

 

 

2巨噬细胞清除原理。包裹着氯磷酸(方块)的脂质体通过巨噬细胞的内吞作用进入细胞,与溶酶体(L)融合后,在磷脂酶(箭头)的作用下,释放出氯磷酸,当细胞内氯磷酸的浓度达到一定浓度,就会对巨噬细胞造成不可逆转的损害,从而迫使其进入细胞凋亡。

产品性质:

1ml脂质体体悬液中所含的氯磷酸大约为5mg。所用的磷酸盐缓冲液为10 mM Na2HPO410 mM NaH2PO4140 mM NaCl

脂质体体内注射:

隔日尾静脉注射200μl clodronate liposome,根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化或流式检测巨噬细胞去除效率。

尾静脉注射方法:

1)将小鼠放在倒扣的饭盒内,从孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉;

2)将纱布浸泡于约70度的温水中,拿出后包裹尾巴,以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的;

3)行尾部静脉注射时,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出约2cm一段,使皮肤紧张,静脉更为充盈,右手持1ml针头注射器,使针头与静脉平行(小于30°),从尾巴的下1/4处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,可注入药物。

4)有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部移动,更换血管位置注射给药。拔出针头后,用棉球按住注射部位轻压1-2min,止血。

效果展示:

案例一:

 

案例二:

 

 

 

左图显示的是正常脾脏细胞中阳性巨噬细胞的染色结果。右图为clodronate-liposome注射2天后观察的结果,可以发现只剩下少量的巨噬细胞。

 

左图表示正常肝脏细胞中阳性的Kupffer细胞。右图表示clodronate-liposomes注射2天后,肝脏Kupffer细胞染色结果,Kupffer细胞基本被清除。

 

FAQ:

Q:收到Clodronate liposomes后该如何操作?

A:收到氯磷酸脂质体后,如果不能马上使用,需要放置在4℃冰箱。禁止冻存!使用时作为原液使用,不能进行稀释。脂质体很容易发生沉淀,建议使用之前轻轻混匀,另外4℃的氯磷酸脂质体不能马上使用,需要恢复到室温才能进行注射。

Q: Clodronate liposomes能否用于体外巨噬细胞清除?

A:产品可以用于体外巨噬细胞的清除,但是这种方法比较适合体内实验。主要是由于在体外培养过程中,从死亡细胞释放的氯磷酸或者是从脂质体中渗漏出来氯磷酸,会一直存在于培养基中,但是在体内,氯磷酸的半衰期很短,很快就会被肾脏清除。虽然游离的氯磷酸不会进入细胞也不会进入脂质体,但是一旦他们在培养基中积累就会慢慢地进入细胞中。

Q:在静脉注射Clodronate liposomes后动物很快就死亡了,是什么原因?

A:一方面有可能是动物注射了不均一的脂质体悬液。建议在使用之前轻轻摇晃混匀。脂质体在体外一段时间后会发生沉降。如果在很长一段时间内需要一次注射多只动物,那么脂质体便会在注射器中发生沉淀,形成不均一悬液,这样一来,只注射的计量与后一只注射的计量就会发生明显的变化。另外一方面有可能是脂质体刚从冰箱取出后,没有恢复到室温。

Q:动物在注射Clodronate liposomes后几天就死亡了?

A:这个可能是受到细菌的污染,体内清除巨噬细胞后会增加例如病毒粒子,细菌或者酵母感染的几率。

Q:静脉注射Clodronate liposomes后大鼠脾脏/肝脏中的ED1+细胞并没有*消失?

A:大鼠中成熟的巨噬细胞呈现ED1ED2双阳性,但是有一些没有吞噬功能的或者吞噬作用小的前体细胞也是ED1+,但是呈现ED2-。因此,所有ED2+的细胞都可以被*清除,但是ED1+的细胞却只能被部分清除,清除的比率取决于前体/成熟巨噬细胞的比例。

Q: Clodronate liposomes没有达到期望的效果?

A:氯磷酸脂质体都是大批量的生产,每批次都会对氯磷酸的浓度以及一些可能的污染物进行检测,确保无误后才会销售给客户。另外,脂质体容易收到温度的影响。正确的运输和储存方式是4~8℃,悬液既不能被冻存,也不能被加热超过30℃。自收到货物起,需要在3个月内使用完,不然有可能会影响使用的效果。

Q:在静脉注射时,能不能增加注射的体积?

A:静脉注射时需要依据动物的体重,不能超过0.1ml/10mg,但是进行腹腔注射可以适当的增加注射的体积。皮下注射需要根据注射位点的容量进行决定。

 

货号

品名

CAS

价格¥

规格

品牌

78clp100ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

43569

100ml

clodronateliposomes2018

78clp010ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

7500

10ml

clodronateliposomes2018

78clp015ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

10830

15ml

clodronateliposomes2018

78clp020ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

14000

20ml

clodronateliposomes2018

78clp025ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

17500

25ml

clodronateliposomes2018

78clp030ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

20245

30ml

clodronateliposomes2018

78clp040ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

24704

40ml

clodronateliposomes2018

78clp050ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

28992

50ml

clodronateliposomes2018

78clp060ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

32422

60ml

clodronateliposomes2018

78clp070ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

35852

70ml

clodronateliposomes2018

78clp080ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

38424

80ml

clodronateliposomes2018

78clp090ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

40997

90ml

clodronateliposomes2018

78clp005ml

Clodronate Liposomes and PBS Liposomes

4-5周到货

4000

5ml

clodronateliposomes201

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发,欢迎合作。

 

Clodrosome 8901 标准巨噬细胞消耗试剂盒产品说明书

Encapsula NanoSciences是一家美国专业生物纳米技术公司,致力于在学术和工业领域的客户和合作伙伴提供研究,开发,知识产权和制造专业知识,以生产脂质纳米粒子(也称为脂质体)。封囊通常提供脂质体包封的化合物的定制实验室规模的制剂。

封装是用于抗体和肽缀合的表面活性脂质体(Immunosome),Clodronate脂质体(Clodronome),Clodrosome(Encapsome),多柔比星脂质体(Doxosome),DNA和RNA脂质体(Genesome),荧光  脂质体氟脂质体),冷冻干燥的ATP脂质体(ATPsome),用作人造细胞模型(Cellsome)的脂质体的各种制剂和脂质体包封的抗肿瘤药物。

Encapsula还提供了可以在皮肤病学和化妆品(可以使用的脂质体的各种制剂Cosmesome),营养补充剂,如姜黄素脂质体(Curcusome)和肌醇脂质体(Inosisome),和营养补充剂的宠物(Taurosome)。

Clodrosome  ® ,Encapsome  ® 和Fluoroliposome  ® 是Encapsula纳米科学LLC的注册商标。12多年来,Encapsula为数百所大学,研究机构,政府实验室和生物技术/制药公司提供巨噬细胞消耗试剂盒和巨噬细胞消耗的定制配方。

 

货号:8901

品名:Standard macrophage depletion kit (composed of one vial of Clodrosome:emoji: and one vial of Encapsome:emoji:)(标准巨噬细胞消耗试剂盒)

 

 

货号

品名

规格

目录价

品牌

8901

Standard macrophage depletion kit (composed of one vial of Clodrosome:emoji: and one vial of Encapsome:emoji:)

2ml

3400

clodrosome

5ml

6800

clodrosome

10ml

11900

clodrosome

15ml

17000

clodrosome

20ml

22950

clodrosome

25ml

28050

clodrosome

 

Clodrosome巨噬细胞消耗试剂盒由一小瓶Clodrosome®和一小瓶Encapsome®组成

  • 含有未修饰的多层脂质体,类似于大多数已发表的枯竭研究中使用的脂质体
  • 脂质体大小范围(0.3-3μm)对于立即吞噬细胞识别和摄取是*的
  • 试剂盒包含等量的每个试剂,包装在带有多剂量瓶适配器的带塞的玻璃瓶中
  • 选择荧光试剂盒在体外体内可视化对照脂质

每个Clodrosome巨噬细胞消耗试剂盒含有Clodrosome和等体积的对照脂质体。

 

1)Clodrosome ®(脂质体氯膦酸)

 

Mg/ml

mM

Clodronate二钠盐

5

17

L-α磷脂酰胆碱

18.5

24

胆固醇

4.2

11

悬浮于pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水中

 

  • 氯膦酸盐包封在多层脂质体水性空间内
  • 通过2μm膜挤出以确保脂质体轻松通过肺毛细血管
  • 在无菌条件下制备和包装

 

2)Encapsome ®(对照脂质体)

 

Mg/ml

mM

L-α磷脂酰胆碱

18.8

24

胆固醇

4.2

11

悬浮于pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水中

 

  • 除Clodronate不添加外,与Clodrosome*相同
  • 由于吞噬细胞可以响应脂质体摄取,因此需要控制
  • 通过2μm膜挤出以确保脂质体轻松通过肺毛细血管
  • 在无菌条件下制备和包装

 

3)氟 脂质体-DiI (荧光对照脂质体)

 

 

Mg/ml

mM

L-α磷脂酰胆碱

18.8

24

胆固醇

4.2

11

DiI(亲脂性荧光染料:ex / em〜550 / 580nm)

0.0625

0.065

悬浮于pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水中

  准备与Clodrosome相同(不含氯膦酸盐;含荧光团)

  由于吞噬细胞可以响应脂质体摄取,因此需要控制

  可以通过荧光方法(共焦显微镜,FACS等)进行追踪。

  通过2μm膜挤出以确保脂质体轻松通过肺毛细血管

  在无菌条件下制备和包装

 

4)氟脂质体-DiO(荧光对照脂质体)

 

 

Mg/ml

mM

L-α磷脂酰胆碱

18.8

24

胆固醇

4.2

11

DiO(亲脂性荧光染料:ex / em〜484 / 501nm)

0.0625

0.071

悬浮于pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水中

  • 准备与Clodrosome相同(不含氯膦酸盐;含荧光团)
  • 由于吞噬细胞可以响应脂质体摄取,因此需要控制
  • 可以通过荧光方法(共焦显微镜,FACS等)进行追踪。
  • 通过2μm膜挤出以确保脂质体轻松通过肺毛细血管
  • 在无菌条件下制备和包装

 

5)氟脂质体-DiD(荧光对照脂质体)

 

 

Mg/ml

mM

L-α磷脂酰胆碱

18.8

24

胆固醇

4.2

11

DiD(亲脂荧光染料:ex / em〜648 / 680nm)

0.00625

0.0065

悬浮于pH 7.4的磷酸盐缓冲盐水中

  • 准备与Clodrosome相同(不含氯膦酸盐;含荧光团)
  • 由于吞噬细胞可以响应脂质体摄取,因此需要控制
  • 可以通过荧光方法(共焦显微镜,FACS等)进行追踪。
  • 通过2μm膜挤出以确保脂质体轻松通过肺毛细血管
  • 在无菌条件下制备和包装

 

产品链接:https://www.clodrosome。。com/products/

 

 

 

巨噬细胞去除实验–专业

巨噬细胞去除实验

  去除巨噬细胞是研究巨噬细胞功能的重要方法。巨噬细胞可吞噬 clodronate Liposome, 在溶酶体的作用下,clodronate 可释放出来,当其达到一定浓度时,可引起巨噬细胞的凋亡, 从而去除巨噬细胞。clodronate Liposome 可局部注射去除注射部位临近的巨噬细胞,如肺、 膝关节、肿瘤局部和脑等;也可尾静脉或腹腔注射去除循环途径中的单核巨噬细胞,如肝脏 和脾脏中的巨噬细胞。
1. 脂质体的准备 可以自己制备或者购买商品话的脂质体 荷兰clodronaiposomes和美国Formumax Scientific公司都可以提供现成的商品化的高质量clodronate Liposome 具体信息如下
 
 
货号 品名 包装 价格 品牌   
F70101C-N Clodronate Liposomes 不含对照 去除率85% 2ml 2985 FormuMax   
F70101C-N Clodronate Liposomes 不含对照 去除率85% 10ml 10485 FormuMax   
F70101-N Control Liposomes 对照 2ml 1485 FormuMax   
F70101-N Control Liposomes 对照 10ml 5235 FormuMax   
F70101C-NC Control Liposomes 含对照 去除率85% 2ml 3585 FormuMax   
F70101C-NC Control Liposomes 含对照 去除率85% 10ml 12585 FormuMax   
F70101C-A Clodronate Liposomes 不含对照 去除率95% 2ml 4485 FormuMax   
F70101C-A Clodronate Liposomes 不含对照 去除率95% 10ml 15735 FormuMax   
F70101C-AC Clodronate Liposomes 含对照 去除率95% 2ml 5235 FormuMax   
F70101C-AC Clodronate Liposomes 含对照 去除率95% 10ml 15735 FormuMax   
Clodronate  Clodronate Liposomes and PBS Liposomes per 10ml 10ml 4500 clodronaiposomes 

2. 脂质体的体内注射 隔日尾静脉注射 200ul clodronate liposome,根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化 或流式检测巨噬细胞的去除效率。
尾静脉注射方法: 尾静脉注射方法:
 1. 将小鼠放在倒扣的饭盒内,从孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3 条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉;
2. 将纱布浸泡于约 70 度的温水中,拿出后包裹尾巴,以达到使尾部血管扩张及软化表皮 角质的目的;
3. 行尾部静脉注射时,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出约 2cm 一段,使皮肤紧张, 静脉更为充盈,右手持 1ml 针头注射器,使针头与静脉平行(小于 30°角),从尾巴的下 1/4 处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明 已刺入血管,可正式注入药物。
4. 有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部 移动,更换血管位置注射给药。拔出针头后,用棉球按住注射部位轻压 1-2min,止血。

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