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Merck蛋白抽提产品

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Merck蛋白抽提产品

简要描述：BugBuster蛋白抽提试剂用于温和破坏大肠杆菌细胞壁以释放活性蛋白。作为激烈的机械法（如弗式压榨法和超声波法）的替代方法，这种试剂处理起来非常简便、快速，且成本低廉，适合制备表达蛋白用于下游的纯化等应用。

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Merck蛋白抽提

MERCK蛋白抽提

 
1、BugBuster®蛋白抽提试剂——尤其适用于GST融合蛋白的抽提
BugBuster蛋白抽提试剂用于温和破坏大肠杆菌细胞壁以释放活性蛋白。作为激烈的机械法（如弗式压榨法和超声波法）的替代方法，这种试剂处理起来非常简便、快速，且成本低廉，适合制备表达蛋白用于下游的纯化等应用。
 
2、BugBuster Master Mix预混蛋白抽提试剂
BugBuster Master Mix是将BugBuster蛋白抽提试剂，Benzonase核酸酶和rLysozyme™溶菌酶溶液按*化配比混合好的一种非常方便使用的蛋白抽提试剂，有助于在*化条件下获得可溶活性蛋白。
Product
Size
Cat.No.
Price（￥）
BugBuster® Protein Extraction Reagent
100 ml
70584-3
750.00
500 ml
70584-4
3,789.00
BugBuster® Master Mix
100 ml
71456-3
1,700.00
500 ml
71456-4
5,200.00
CytoBuster™ Protein Extraction Reagent
50 ml
71009-3
824.00
250 ml
71009-4
3,122.00

 
 
          
Comparison of E. coli lysis methods
50 ml samples of an induced 500 ml culture of BL21（DE3） containing pET-41a（+） encoding GST were harvested by centrifugation and resuspended in 2 ml 1X PBS, another commercially available protein extraction reagent, or BugBuster Reagent. The sample in PBS was sonicated with 10 pulses at 50% duty for 30 s total. Samples in lysis reagent were treated according to their respective protocols. Extracts were clarified by centrifugation and assayed for GST enzymatic activity.
 
3、Benzonase® 核酸酶——赛多利斯病毒纯化试剂盒推荐使用
应用范围
  •    ² 蛋白抽提操作中降低样品粘度
  •    ² 双向电泳中样品制备过程
  •    ² 重组蛋白样品制备中去除核酸污染
Product
Size
Cat.No.
Price（￥）
Benzonase® Nuclease, Purity > 90%
10 ku
70746-3
1,200.00
2.5 ku
70746-4
400.00
 
 
 
 
 
 
 
Viscosity reduction by Benzonase Nuclease
E. coli BL21（DE3） cells containing a pET construct were suspended in BugBuster Reagent （5 ml/g wet weight）. Aliquots of the suspension were treated with the indicated amounts of Benzonase Nuclease for 10 min at

蛋白酶抑制剂混合物（哺乳动物样品抽提用， 100×）

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供蛋白酶抑制剂混合物（哺乳动物样品抽提用， 100×） ，欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 PIC008
英文名称 Protease Inhibitor Cocktail (for mammalian cell and tissue extracts, 100×)
中文名称 蛋白酶抑制剂混合物（哺乳动物样品抽提用， 100×）
别    名 Protease Inhibitor Cocktail (for mammalian cell and tissue extracts, 100×); Protease Inhibitor Cocktail(100×); Protease Inhibitor Cocktail; 100×PIC; Protease Inhibitor Mixture(100×); Protease inhibitor cocktail for mammalian cell and tissue extracts, 100X; Protease Inhibitor Cocktail (for mammalian, 100×)  蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100×); 蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品提取, 100×); 蛋白酶抑制剂混合物（100x in DMSO）;
蛋白酶抑制剂混合物（哺乳动物样品抽提用， 100×）
Specific References  (6)     |     PIC008 has been referenced in 6 publications.
[IF=3.024] Deng W et al. Hsa_circRNA_101036 acts as tumor-suppressor in oral squamous cell carcinoma cells via inducing endoplasmic reticulum stress. Eur Rev Med Pharmacol Sci . 2020 Jun;24(11):6111-6121.  WB ;  
PubMed:32572876

[IF=3.024] Deng W et al. Hsa_circRNA_101036 acts as tumor-suppressor in oral squamous cell carcinoma cells via inducing endoplasmic reticulum stress. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2020 Jun;24(11):6111-6121.  WB ;  
PubMed:32572876

[IF=2.682] Xu Shu. et al. The Effect of Acute Kidney Injury on TGF-β1 and Smad3 in Patients with Coronary Heart Disease after Off-Pump Coronary Artery Bypass Grafting. J Healthc Eng. 2021;2021:1361242  Other ;  Human.  
PubMed:34795878

[IF=2.238] Su Qunxue. et al. miR-204-5p Hampers Breast Cancer Malignancy and Affects the Cell Cycle by Targeting PRR11. Comput Math Method M. 2022;2022:4010947  Other ;  Other.  
PubMed:35126622

[IF=2.031] Yujing Wang. et al. SIRT1 promotes proliferation, migration, and invasion of cervical cancer cell and is upregulated by human papillomavirus 16 E7 oncoprotein. Gynecol Obstet Inves. ;:  WB ;  Human.  
PubMed:34808628

[IF=1.785] An J et al. A clinical and basic study of optimal endometrial preparation protocols for patients with infertility undergoing frozen‑thawed embryo transfer. Exp Ther Med . 2020 Sep;20(3):2191-2199.  WB ;  
PubMed:32765695

保存条件 Store at -20℃ stable for at least 12 months.
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 蛋白酶抑制剂(Protease Inhibitor)是指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合，使蛋白酶活力下降、甚至消失、但不使酶蛋白变性的物质。蛋白酶抑制剂有很多种，包括 EDTA、E-64、NaVO3、Bestatin、Leupetin、PepstatinA、Aprotinin 等，均可分别抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、胃蛋白酶、金属蛋白酶等各种蛋白酶的活性，从而有效地抑制蛋白质的降解，并维持原有的蛋白结构。

哺乳动物细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。

Bioss生产的蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100×) (Protease inhibitor cocktail for mammalian cell and tissue extracts, 100×) 是一种用于哺乳动物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物，主要成分有：105mM AEBSF, 80uM Aprotinin, 5mM Bestatin, 1.5mM E64, 2mM Leupeptin and 1.5mM Pepstatin A in DMSO，并提供一支独立包装的0.5M EDTA, pH 8.0，以便选择性使用。注：如果所提取的蛋白质用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA。

本产品为100×浓缩液，使用时请按1:100的比例加入裂解液中，用于哺乳动物细胞或组织蛋白的提取，可有效抑制蛋白降解。该产品可以抑制绝大多数蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱胺酸蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。所提取的蛋白质可以用于 Western Blot、免疫共沉淀等试验。

不同类型的蛋白提取物中含有不同类型的蛋白酶。例如，哺乳动物细胞提取物中通常含有高丰度的丝氨酸蛋白酶，细菌细胞提取物通常含有较多的丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶，哺乳动物组织提取物中主要含有丝氨酸、半胱氨酸和金属蛋白酶，植物提取物中常含有大量的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶，还有一些含有天冬氨酸蛋白酶。为此Bioss针对不同类型样品的蛋白提取，提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂混合物以供选择。

本产品仅用于科研领域，不用于临床诊断。

蛋白酶抑制剂混合物（细菌抽提用，100×）

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供蛋白酶抑制剂混合物（细菌抽提用，100×） ，欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 PIC004
英文名称 Protease inhibitor cocktail (for bacterial cell extracts, 100×)
中文名称 蛋白酶抑制剂混合物（细菌抽提用，100×）
别    名 Protease inhibitor cocktail for bacterial cell extracts, 100X;   蛋白酶抑制剂混合物（细菌抽提用, 100×）;
保存条件 Store at -20℃ stable for at least 12 months.
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 蛋白酶抑制剂(Protease Inhibitor)是指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合，使蛋白酶活力下降、甚至消失、但不使酶蛋白变性的物质。蛋白酶抑制剂有很多种，包括 EDTA、E-64、NaVO3、Bestatin、Leupetin、PepstatinA、Aprotinin 等，均可分别抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、胃蛋白酶、金属蛋白酶等各种蛋白酶的活性，从而有效地抑制蛋白质的降解，并维持原有的蛋白结构。

细菌提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物等样品中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。

本产品包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及氨基肽酶抑制剂，是一种用于细菌蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物。

Bioss生产的蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用, 100×)是一种用于细菌蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物，主要成分有：23mM AEBSF, 2mM Bestatin, 0.3mM E64 and 2mM Pepstatin A in DMSO，并提供一支独立包装的0.1M EDTA, pH 8.0，以便选择性使用。注：如果用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA。

本产品为100×浓缩液，使用时请按1:100的比例加入裂解液中，用于细菌蛋白的提取，可有效抑制蛋白降解。

该产品可有效抑制细菌提取物中的各种蛋白酶活性，如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中Aprotinin是丝氨酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂；Bestatin是氨基肽酶可逆抑制剂；E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂；Leupeptin是丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制剂；EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂。

不同类型的蛋白提取物中含有不同类型的蛋白酶。例如，哺乳动物细胞提取物中通常含有高丰度的丝氨酸蛋白酶，细菌细胞提取物通常含有较多的丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶，哺乳动物组织提取物中主要含有丝氨酸、半胱氨酸和金属蛋白酶，植物提取物中常含有大量的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶，还有一些含有天冬氨酸蛋白酶。为此Bioss针对不同类型样品的蛋白提取，提供了不同类型的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂混合物以供选择。

本产品仅用于科研领域，不用于临床诊断。

细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒说明书

发表于由

细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EA10011-100T

100T

询价

 产品描述

浆核蛋白的分离提取属于生物学研究的重要实验之一，对于探究细胞中的不同组分以及蛋白在细胞中的定位具有重要的意义，促进亚细胞蛋白组学发展，提取的核蛋白可以用于后续转录调控方面研究，例如Pull Down，EMSA，footprinting等，为分子机制深入探索提供可靠技术支持。

基本原理如下：细胞在低渗条件下胞膜会发生胀破，释放浆蛋白，离心得到细胞核沉淀，最后利用高盐溶液抽提得到核蛋白，本试剂盒利用该原理，优化配方组分和提取方法提供了一种高效提取浆核蛋白的方法，较大保持蛋白的天然活性，同时浆蛋白与核蛋白之间存在极少的交叉污染，为后续研究提供可靠的样本。本试剂盒只适用于细胞样品的核浆蛋白提取，每T约适用于约一个大皿细胞量的提取。

产品组成

名称

规格

细胞浆蛋白抽提试剂A

50 mL

细胞核蛋白抽提试剂B

5 mL

试剂C

0.5 mL

运输与保存

–20℃保存，一年有效

实验步骤

1.试剂准备：

室温溶解试剂盒中三种组分，溶解后混匀冰上放置备用

（1）自备100 mM PMSF母液；

（2）浆蛋白抽提工作液：用细胞浆蛋白抽提试剂A将试剂C稀释至1X用，临用前加入PMSF母液使其终浓度为1mM（现配现用）；

（3）核蛋白抽提工作液：用细胞浆蛋白抽提试剂B将试剂C稀释至1X用，临用前加入PMSF母液使其终浓度为1mM（现配现用）。

2. 收集细胞沉淀

①对于贴壁细胞：弃去原来培养基，PBS清洗一遍，用细胞刮或消化收集细胞沉淀，尽可能吸净上清，留下沉淀备用（推荐使EDTA溶液代替胰酶消化，以免胰酶残留降解目的蛋白；每个样品可用小离心机或原来离心机进行二次离心，充分弃去残留上清以保证后续提取效果不受影响）；②对于悬浮细胞：离心收集细胞，PBS清洗一遍，尽可能吸净上清，留下沉淀备用。

3. 浆蛋白的提取

（1）约50 μL体积的细胞沉淀中加入200 μL细胞浆蛋白抽提工作液，反复吹打混匀十多次至沉淀散离，冰浴10 min后再次吹打混匀十多次，继续冰浴裂解5 min。

（2）高速剧烈涡旋5s，4℃ 600g离心5 min，此时得到的沉淀为细胞核沉淀，上清为粗提的浆蛋白，将此上清再次4℃ 12000g离心10 min去除杂质即得到纯净的细胞浆蛋白。

4.核蛋白的提取

（1） 对于步骤3-(2)中获得的细胞核沉淀加入400 μL细胞浆蛋白抽提试剂A（此时使用的试剂A不含试剂C），吹打混匀十多次至沉淀分散，4℃，冰浴5 min 600 g离心5 min，弃去上清保留沉淀，得到的沉淀重复该操作一次，最后尽最大努力弃去上清保留沉淀。

（2）对于步骤4-(1)中获得的沉淀加入100 μL细胞核蛋白抽提工作液，冰浴裂解30min，期间多次涡旋振荡10-15s以充分裂解（核蛋白裂解后，如果条件允许建议使用超声以大功率的提取核蛋白，增加蛋白质的溶解度，提高实验结果一致性，超声3次，每次5秒，功率90w）。

（3）4℃ 12000g离心10 min收集上清为细胞核蛋白。抽提得到的浆核蛋白可立即使用，也可-80℃保存备用。

 

实验案例分析

细胞刮收集A549，H1299，Hela三种细胞沉淀样品，每种细胞约一个大皿的细胞量，按照试剂盒使用说明进行核浆蛋白的分离提取，得到的浆蛋白和核蛋白用于western blot分析，考察其核浆分离效果，结果如下图所示：

         

图3.三种细胞样品的浆核蛋白western blot分析结果

注意事项

（1）需自备PMSF。PMSF母液用无水乙醇配制，临用前2-3 min内加入，以免在水溶液中很快失效；

（2）所有的抽提步骤都需要在冰上或者4℃进行；

（3）本试剂盒只适用于细胞样品浆核蛋白的提取分离，提取到的蛋白样品可直接用BCA法进行蛋白浓度测定；

（4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套；

（5）本产品仅作科研用途！