Nvigen K61003-快速提取cfDNA专业技术

说起肿瘤、癌症,已经不再像多年前一样让谈癌色变,但仍旧为人们所恐惧。成功治疗肿瘤还是以早发现早治疗为主。那么尽早检测和发现肿瘤便是*的核心。液体活检(Liquid biopsy)的检测方法,可以捕获到进入血液的其它细胞或DNA,从而替代了疾病的诊断,例如肿瘤。近比较火热的液体活检有:cfDNA(Circulating cell-free DNA)、CTC和外泌体的检测。

 

 

对于CTC和外泌体的信息,我们已发表过2篇文章描述,欲知详情,请浏览:

 

 

游离循环DNA(cfDNA)存在于血液,包含双链DN**段,绝大多数是短链,而且通常浓度很低。在健康人体中,血浆cfDNA被认为来自于正常的造血细胞。cfDNA的循环半衰期很短,这提示它需要在细胞凋亡时被持续的释放。在特定的生理条件或疾病过程中,有相当一部分cfDNA会与在健康的时候不同,基于这一结果,近年来cfDNA已被用于无创性诊断。在孕妇中,约有10%-15%的cfDNA来自于胎盘滋养层,现在cfDNA多用于在高危孕妇中筛查胎儿的遗传缺陷,这就是是当前火热的无创唐氏筛查的基础!在肿瘤病人中,通过cfDNA的量化突变来检测肿瘤已被越来越多的人认可。而在移植方面,移植排斥反应也与供体移植器官中的cfDNA水平相关。

 

Figure.2 血液中的复杂组分

而循环肿瘤DNA(ctDNA)是来源于肿瘤细胞的cfDNA,属于cfDNA的一种类型。两者为包含关系,ctDNA仅为cfDNA很小的一部分。ctDNA来自肿瘤细胞的体细胞突变,不同于遗传突变的是其存在于体内每个细胞。往往在提到循环肿瘤DNA的时候,大家往往简单的将它认为是肿瘤患者外周血中游离的DNA。其实不然,虽然ctDNA所占cfDNA的比例波动范围非常大,约0.01%~90%,但实际上,大多数ctDNA在cfDNA中的占比约为0.2%。

 

如何有效分离提取cfDNA(ctDNA)用于检测,已成为科研工作者必须突破的问题!

 

 

Nvigen是一种纳米技术,支持个性化医疗创新。

Nanopsy™是由先进的分子工程纳米粒子Magvigen™和Myquvigen™实现的,能够有效地从蛋白质、细胞和核酸中捕获和识别分子信息。我们正在将nanopsy™开发成可在成百上千家医院部署的、自动化和FDA批准的临床仪器和试剂盒,将致命的癌症转变为可控制的疾病。

用链霉亲和素珠和生物素探针捕获DNA
Magvigen™、Myquvigen™和Maxvigen™纳米颗粒是多功能和可生物降解的磁性和/或荧光磁性纳米颗粒,在加利福尼亚大学、伯克利大学、斯坦福大学和NVIGEN经过18年的严格研究和开发后达到。

上海金畔生物Nvigen K61003-快速提取cfDNA专业技术

捕获血浆中cfDNA的磁珠

 

 

产品名称 应用 目录号 规格/价格(1ml, USD)
MagVigen™ – Plasma DNA Capture Kit 对血浆中的 cfDNA 的捕获 
 
K61003

Sizes (Plasma)
100 ml $499.00

1,000 ml $3,999.00

 

 

产品介绍: MagVigen™ Plasma DNA Capture 磁性纳米颗粒专为捕获血液中的cfDNA而设计,为科研, 分子检测工作者提供了一种简单、快速、的血液cfDNA提取方法。整个实验过程中无需离心或者过柱。DNA提取可以线性比例扩大,输入血浆范围为100 uL至10mL 。分离出的cfDNA 可以用Agilent Bioanalyzer 直接定量分析。

下游应用: PCR, DNA测序,二代测序技术(NGS), 以及测序文库构建。

产品特点:

  • 高产量
  • 高质量DNA提取
  • 工作流程简单
  • 血浆体积可线性扩展
  • 质量稳定,提取结果高度一致

实验例子:

Figure 1. cfDNA extraction yield and size from 1.5 ml plasma samples with (blue) and without (red) spiking in DNA. Calculated yield of spiking in DNA by subtraction of endogenous cfDNA from total DNA were 80% using picogreen assay and 91% with bioanalyzer quantification.

Figure 2. cfDNA extracted from 100 µl to 5 ml of plasma was quantified by pico-green analysis.

Figure 3. cfDNA extraction yield was quantified by pico-green analysis following DNA isolation with the MagVigen™ Plasma DNA Capture Kit and kit C.

Figure 4. Beta-globin level and GAPDH levels were estimated by PCR analysis.

 

 

 

线粒体提取试剂盒

上海金畔生物科技有限公司提供线粒体提取试剂盒 ,欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 C5032
英文名称 Mitochondrial Extraction Kit
中文名称 线粒体提取试剂盒
别    名 Mitochondria Isolation Kit;   线粒体分离试剂盒;
线粒体提取试剂盒
Specific References  (1)     |     C5032 has been referenced in 1 publications.
[IF=6.819] Chen, Xin. et al. Activation of cDCs and iNKT cells contributes to triptolide-induced hepatotoxicity via STING signaling pathway and endoplasmic reticulum stress. CELL BIOL TOXICOL. 2022 Dec;:1-20  
PubMed:36520315

保存条件 Store at 2-8℃ for one year.
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 意义 线粒体是半自主性细胞器,不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所,为细胞的活动提供能量,而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此,准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。
原理 利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体;利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶。
线粒体提取试剂盒 (Mitochondria Isolation Kit) 用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的线粒体的分离提取。其制备物产量高,可用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。

本产品仅用于研究用途,不用于人类、治疗或诊断应用。

intronbio LPS提取试剂盒

intronbio LPS提取试剂盒

商业化的脂多糖(LPS)提取试剂盒 

LPS提取试剂盒

LipopolysaccharideLPSExtraction Kit

 

 

 产品信息:(现货供应)

货号

名称

产地

规格

报价/

17141

LPS Extraction Kit 脂多糖提取试剂盒

iNtRON

100T

2200.00

试剂盒组成

组分

名称

规格

保存方法

1

Lysis Buffer

1x 100 ml

2~8

2

Purification Buffer

1x 80ml

2~8

 LPS背景描述

 ◆ 脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性*(在250℃下干热灭菌2h才*灭活)。受LPS发现的历史原因,如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS由多糖链和脂质A组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。

◆ 正是LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤,

产品描述:

◆ 常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. (1965)使用的热酚水法(hot phenol-water method),主要优势在于高产量,但是提取步骤繁琐,费时,以及常受蛋白质和核酸的污染,纯度低等缺点也常困扰科研工作者。

◆ iNtRON提供的LPS提取试剂盒是市场上的个商品化的产品,排除传统热酚水法的缺陷,使得科研工作者能够快速方便的从细菌中提取LPS

产品优势:

 适用性广,能从所有G菌中提取LPS(见Fig. 2);

 操作时间短(包括裂解在内,60min内即可完成);操作简单方便;

 少量细菌即可获得足够的LPS;LPS产量与细菌培养物成正比,一般使用3~5ml培养物LPS产量高;细菌适合培养体积1~2ml(OD600=0.8-1.2)

 LPS产率高,且重复性好(见Fig.1);

 提取LPS下游应用广,包括直接用于免疫刺激;

操作步骤:

1)室温离心收获细菌细胞,13,000rpm,30sec。

2)加入1ml裂解缓冲液(Lysis Buffer),剧烈涡旋混匀。

3)加入200μl氯方,剧烈涡旋混匀10-20 sec,室温孵育5min。

4)4℃,13,000rpm离心10min,转移400μl上清到新1.5ml离心管中。

5)加入800μl纯化裂解液(Purification Buffer),并混匀。-20℃孵育10min。

6)4℃,13,000rpm离心15min。

7)用1ml 70%EtOH洗涤LPS颗粒,并*干燥。

8)在LPS中加入70μl Tris-HCL(10mM,pH8.0),并超声。

应用图片:

 

 

应用文献:

1) YanH.L, et al. DNA Sequencing and Identification of Serogroup-Specific Genes in the Escherichia coli O118 O Antigen Gene Cluster and Demonstration of Antigenic Diversity But Only Minor Variation in DNA Sequence of the O Antigen Clusters of E. coli O118 and O151. Foodborne Pathogens and Disease. 5(4): 449-457(2008).

2) HA Shui, et al. LPS-evoked IL-18 expression in mesangial cells plays a role in accelerating lupus nephritis. Rheumatology 46:1277–1284(2007).

3)  R Bucki, et al..Release of the antimicrobial peptide LL-37 from DNA/F-actin bundles in cystic fibrosis sputum. European Respiratory Journal 29:624-632 (2007).

4) BH.Kim, et al. Effect of retinoids on LPS-induced COX-2 expression and COX-2 associated PGE2 release from mouse peritoneal macrophages and TNF-α release from rat peripheral blood mononuclear cells. Toxicology Letters 150(2):191-201(2004).

5) Anat Lerner, et al. The Azospirillum brasilense Sp7 noeJ and noeL genes are involved in extracellular polysaccharide biosynthesis. Microbiology 155: 4058–4068(2009). 

6) Chitrita DebRoy, et al. Multiplex Polymerase Chain Reaction Assay for Detection of Nonserotypable Shiga Toxin–Producing Escherichia coli Strains of Serogroup O147. Foodborne Pathogens and Disease 7(11): 1407-1414(2010).

 

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ivychem NaI法提取DNA 操作说明

货号:B48202

品名:DNA Extraction EZ-Kit (Sodium Iodide Method)(DNA提取试剂盒(NaI法))

储存:4度下两年

 

 

货号

品名

规格

品牌

B48202

DNA Extraction EZ-Kit (NaI Method)

50 Extractions

Ivy Fine Chemicals

 

产品描述和特点:

DNA提取EZ-Kit是一种简化的NaI,可从组织提取物,血液样品,细胞裂解物,蛋白质或生物制药样品中纯化出几微克的DNA。整个过程包括在一个微量离心管中进行两个简单的孵育和离心步骤,而不使用任何有害物质,如苯酚和CHCl3。优化的洗涤剂可在高蛋白浓度下提取DNA,或在必要时增强蛋白酶K消化。纯化的DNA足够纯化许多DNA应用,例如PCR,实时PCR,限制性内切酶消化和克隆,DNA测序或Picogreen荧光染色。

 

试剂盒组成:

100uL糖原溶液

1ml洗涤剂组合液

25ml NaI溶液

30 mL洗涤缓冲液(无酒精)

 

试剂盒不包含:

乙醇(洗涤缓冲液)

异丙醇(用于DNA沉淀)

2ml微复合管(离心或等效的)

微型离心机(离心或等效的)

 

溶液的制备:

q 加70ml乙醇洗涤液和混合

q 加50uL糖原NaI溶液

q 加2uL糖原洗涤液

 

DNA提取程序:

1、每个样品添加500uL或稀释至2 mL微离心管

q 2、加20uL洗涤剂组合液到每管,并轻轻的涡旋

q 3、选项:如果高浓度的蛋白质干扰DNA提取和DNA分析,每个样品中吸取添加20uL消化蛋白酶K(10mg/ml),在60°C, 20min,然后在95°C灭酶 5min

4、加500uL NaI溶液到每个微管中,并轻轻的涡旋

q  5、50°C孵育10分钟

q 6、加900uL异丙醇涡旋

q 7、室温孵化30min

8、离心机12000转15min

9、轻轻倒出或吸出上清液

q 10、添加1.8ml洗涤缓冲液(含酒精),涡旋

11、离心机12000转10min

q  12、轻轻倒出或吸出上清液

q 13、风干DNA

q 14、添加20-60uL水轻轻涡旋溶解DNA

q 15、纯化的DNA可进行PCR、实时定量PCR、酶切、DNA测序、荧光染色法

 

 

流程图:

 

 

 

 

世界*实验材料供应商 Ivy Fine Chemicals上海金畔生物为其中国代理, Ivy Fine Chemicals在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, Ivy Fine Chemicals就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Ivy Fine Chemicals 是的精细,专业和定制化学品供应商和制造商,适用于广泛的应用。我们的主要产品包括手性化学品,氨基酸,芳香和吡啶卤素,天然提取物和药物原料。这些化学物质广泛应用于生命科学,制药和精细化工行业。我们在散装工业规模和研发实验室规模中提供化学品。

 在世界各地拥有众多成熟的合作伙伴。我们的工厂合作伙伴和工厂主要位于中国东海岸。他们中的大多数都通过了ISO认证。我们在科技成果产业化方面具有较强的竞争力,追求先进创新项目的研究开发。我们拥有先进的生产设备,在我们的研发中心,千实验室,试点和商业批量生产设备。我们在美国的销售和营销办事处确保为客户提供的客户服务。

 

总RNA提取试剂盒

上海金畔生物科技有限公司提供总RNA提取试剂盒 ,欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 C06-01029
英文名称 Total RNA Extraction Kit
中文名称 总RNA提取试剂盒
别    名 Trizol Reagent; Total RNA Extraction Kit; RNA isolater Total RNA Extraction Reagent;   Trizol(总RNA提取试剂); 细胞/组织中总RNA提取试剂(Trizol 法); TRIzol RNA 分离试剂;
总RNA提取试剂盒
Specific References  (2)     |     C06-01029 has been referenced in 2 publications.
[IF=7.419] Jiajing Yan. et al. Quantitative analysis and hepatoprotective mechanism of Cistanche deserticola Y. C. Ma against alcohol-induced liver injury in mice. BIOMED PHARMACOTHER. 2023 Jun;162:114719  
PubMed:37080088

[IF=4.85] Xiaohong Han. et al. LncRNA MEG3 regulates ASK1/JNK axis-mediated apoptosis and autophagy via sponging miR-23a in granulosa cells of yak tertiary follicles. CELL SIGNAL. 2023 Apr;:110680  
PubMed:37086956

保存条件 4℃避光密闭保存,保质期12个月。
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 总RNA提取试剂盒是基于TriZol原理制备的一种通用总RNA提取试剂,裂解能力强,优化的裂解液配方,具有广泛的样本适应性。该方法简便、快捷,适用于动植物细胞、组织、酵母细胞以及细菌的总RNA抽提。其原理是利用异硫氢酸胍/酚/氯仿法,快速裂解细胞,溶解细胞内含物,抑制核酸酶活性,从而有效防止RNA在提取过程中的降解。加入氯仿后,溶液分为水相和有机相。RNA保留在上层水相中,分离后可用异丙醇沉淀回收。本产品提取的总RNA产量大、纯度高,无基因组DNA和蛋白质污染,可直接用于RT-PCR、Northern blot、dot blot、polyA筛选、体外翻译、RNase保护实验和分子克隆等一系列操作。
本产品仅用于科研。