产品组份
Buffer LP1: 25 ml (50T)
Buffer LP2: 10 ml (50T)
Buffer LP3 (concentrate): 21 ml (50T)
Buffer GW2 (concentrate): 15 ml (50T)
Buffer GE: 7.5 ml (50T)
RNase A（10mg/ml）: 300 μl (50T)
Spin Columns DM with Colletion Tubes 50: (50T)

自备试剂
无水乙醇。

实验准备
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。 2．第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3 加27ml无水乙醇和Buffer GW2 加45ml无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer LP1和Buffer LP2于56˚C水浴重新溶解。

操作步骤
1．取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg，加入液氮充分研磨。
2．将研磨后的粉末收集到离心管（自备）中，加入400 μl Buffer LP1和6 μl RNase A（10 mg/ml），涡旋振荡1分钟，室温放置10分钟，使其充分裂解。 注意：1）使用涡旋振荡或移液器吹打，充分裂解组织，组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。2）请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。 3．加入130 μl Buffer LP2，混匀，涡旋震荡1分钟。
4．12,000 rpm（~13,400×g）离心5分钟，将上清移至新的离心管（自备）中。
5．加入1.5倍体积的Buffer LP3（使用前检查是否已加入无水乙醇），充分混匀（如500 μl滤液加入750 μl Buffer LP3）。注意：加入Buffer LP3后应立即混匀，可能会产生沉淀但不影响后续实验。
6．将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱（Spin Columns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12,000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。 注意：如吸附膜呈现绿色，向吸附柱中加入500 μl无水乙醇，12,000 rpm 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8．重复步骤7。
9．12,000 rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR 等）。
10.将吸附柱放到一个新离心管（自备）中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100 μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集DNA溶液。-20˚C保存DNA。

注意：1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2）离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。 3）如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤10；若洗脱体积小于100 μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1 μg，推荐用50 μl Buffer GE进行洗脱。
4）因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20˚C保存。

产品组份
Buffer GTL: 12 ml Buffer GL: 12 ml Buffer GW1: 13 ml Buffer GW2: 15 ml Buffer GE: 10 ml Proteinase K: 1 ml Spin Column With Collection Tubes: 50 套

自备试剂
溶菌酶（革兰氏阳性菌用）、溶菌酶缓冲液（20 mM Tris，pH 8.0；2 mM Na2-EDTA；1.2% Triton X-100）、无水乙醇、RNase A（可选）。

操作步骤
注意：使用前请先在缓冲液 Buffer GW1 和 Buffer GW2 中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1. 取 0.5-3 ml 过夜培养的菌液，室温 10,000 rpm 离心 1 min，弃上清。注意：根据菌液的浓度决定取液量，当 OD600=1 时，1ml 菌液浓度为 109个细胞，菌液的量不要超过 109个细胞，太多会使离心柱的膜堵塞，提取的基因组 DNA 的量减少，纯度降低。
2. 加入 200 ul Buffer GTL，用枪头充分吹打或用涡旋振荡器充分悬浮。注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可略过第 2 步骤，加入溶菌酶进行破壁处理，具体方法为：加入 180 µl 终浓度为 20 mg/ml 的溶菌酶缓冲液(20 mM Tris, pH 8.0；2 mM Na2-EDTA；1.2% Triton X-100；溶菌酶必须用溶菌酶干粉溶解在缓冲液中进行配制，否则会导致溶菌酶无活性)，37 ℃处理 30 min 以上。如要去除 RNA，可加入浓度为 100 mg/ml 的 RNase A 4 ul，室温处理 5 min。
3. 加入 20 ul Proteinase K 溶液，充分混匀。
4. 加入 200 ul Buffer GL，充分混匀，56℃水浴 10 min，孵育过程中每隔一段时间颠倒或震荡离心管使样本分散均匀。溶液变得清亮后短暂离心，以去除管盖内壁的水珠。注意：Buffer GL 加入时可能会产生白色沉淀，一般 56℃时会消失，不影响后续实验，如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取的 DNA 量少或者提取的 DNA 不纯。
5. 加入 200 ul 无水乙醇，充分震荡，此时可能会出现絮状沉淀，短暂离心以去除管盖内壁水珠。
6. 将一个离心吸附柱放入收集管中，将上一步所得溶液和絮状沉淀转移到吸附柱中，12,000 rpm 离心 1 min，弃收集管中的滤液。
7. 向吸附柱内加入 500 ul 的 Buffer GW1，室温 12,000 rpm 离心 30 sec，弃收集管中滤液。注意：按要求在 Buffer GW1 中加入无水乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
8. 向吸附柱内加入 600 ul Buffer GW2，室温 12,000 rpm 离心 30 sec，弃收集管中废液。注意：Buffer GW2 为浓缩液，按要求加入无水乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
9. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer GW2，室温 12,000 rpm 离心 2 min，弃收集管中废液。注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用。
10. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管（自备）中，加入 50 ~ 100 ul Buffer GE，室温放置 2 min，12,000 rpm 离心 1 min，离心管底溶液即基因组 DNA。注意：为增加洗脱效率，可将洗脱液 Buffer GE 在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱，可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0 – 8.5 之间，为了增加回收率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置 2 min，再次离心收集。

产品组份
Buffer GTL: 12 ml (50T)
Buffer GL: 12 ml (50T)
Buffer GW1（concentrate）: 13 ml (50T)
Buffer GW2（concentrate）: 15 ml (50T)
Buffer GE: 7 ml (50T)
Proteinase K** : 1 ml (50T)
Spin Columns DM with Collection Tubes: 50个 (50T)
** Proteinase K（蛋白酶K）：-20℃保存，开盖后防止空气及枪头污染，如果出现絮状 物，是因为溶解缓冲液中的钙离子在磷酸盐中可能会产生不溶解性沉淀，离心取上清，不影响使用效果。

自备试剂
无水乙醇；Enzymatic Lysis Buffer（提取革兰氏阳性菌基因组DNA时须准备）。
Enzymatic Lysis Buffer 配方：20 mM Tris，pH 8.0；2 mM Na2-EDTA；1.2％Triton X-100；终浓度为20mg/ml的Lysozyme（溶菌酶）。

实验前准备及重要注意事项
1. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取DNA片段较小且提取量下降。
2. 如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组，建议在对数生长期早期收集样品。
3. 第一次使用前应按试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4. 使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀，请将Buffer GL和Buffer GTL于56˚C水浴重新溶解。
5. 如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A（100mg/ml），RNase A 本试剂盒并未提供，可单独订购。

操作步骤
血液及细胞样本基因组提取
1. 材料处理
a) 如果提取材料为哺乳动物抗凝血液（无核红细胞），可直接向50-200μl新鲜或冷冻的抗凝血液样品中加入Buffer GTL补足至200μl。
b) 如果提取材料为禽类，鸟类，两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，取5-10μl新鲜或冷冻的抗凝血液样品，加入Buffer GTL补足至200μl。
c) 贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液（最大提取量为5×106个细胞），2000 rpm（400xg）离心5分钟，弃尽上清，加200μl GTL，振荡至样品彻底悬浮。
注意：如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4μl浓度为100mg/ml的RNase A 溶液，涡旋15秒，室温放置2分钟。
2. 加入20μl Proteinase K 溶液,混匀。
3. 加入200μl Buffer GL，涡旋振荡充分混匀，56˚C水浴10分钟。
4. 短暂离心以去除管盖内壁的水珠。加入200μl无水乙醇，涡旋振荡充分混匀，短暂离心。
注意：
1）加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。
2）加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。一些组织在加入BufferGL和无水乙醇后可能形成溶胶状产物，此时推荐进行剧烈震荡或涡旋处理。
5. 上一个步骤中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱（Spin Columns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12,000 rpm（约13,400 xg） 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6. 向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7. 向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。 注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7。
8. 12,000 rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。
9. 将吸附柱置于一个新的离心管（自备）中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000 rpm 离心1分钟，收集DNA溶液，-20˚C保存DNA。
注意：
1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2）Buffer GE在65-70˚C水浴预热，离心之前室温孵育5分钟可以增加产量；用另外的50-200 μl BufferGE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
3）如果要提高DNA的终浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12,000 rpm离心1分钟；若洗脱体积小于200 μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1 μg，推荐用50 μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
4）因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20˚C保存。

动物组织基因组提取
1. 材料处理：如果提取材料为动物组织，取25 mg（脾组织用量应少于10 mg）；如果材料为鼠尾，取一段长度为0.4-0.6 cm的大鼠鼠尾或两段长度为0.4-0.6 cm的小鼠鼠尾。
a. 样本进行液氮研磨或切成小块后置于1.5 ml离心管中，加入180 μl Buffer GTL，将不同样品做好标记。
b. 若使用匀浆器处理样本，匀浆前向样本中加入不超过80 μl Buffer GTL，匀浆后加入100 μl Buffer GTL。
注意：1）确保各组织的量不要超出推荐范围。2）组织样本在加入Buffer GTL之前用液氮研磨或加入Buffer GTL用匀浆器匀浆处理，可以增加裂解效率。
2. 加入20 μl Proteinase K，涡旋震荡使样品彻底混匀。56˚C水浴，直至组织完全裂解，孵育过程中可每隔一段时间颠倒或震荡离心管使样品分散。
注意：1）不同组织消化时间不同，通常1-3小时即可完成，鼠尾需要消化6-8小时，必要时过夜消化，不会影响后续操作。2）如果孵育和涡旋震荡后仍然有胶状物质，延长56˚C孵育时间或再加入20 μl Proteinase K消化。3）如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4μl的浓度为100mg/ml的RNase A溶液，涡旋15秒，室温放置5-10分钟。
3. 加入200 μl Buffer GL，涡旋震荡充分混匀，70˚C水浴10分钟。短暂离心后加入200 μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀。
注意：1）加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。2）加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。一些组织（如脾，肺）在加入Buffer GL和无水乙醇后可能形成溶胶状产物，此时推荐进行剧烈震荡或涡旋处理。
4. 短暂离心，将步骤3所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱（Spin Columns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12,000 rpm（约13,400xg ）离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
5. 向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6. 向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm。离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤6。
7. 12,000 rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切，PCR等）。
8. 将吸附柱置于一个新的离心管（自备）中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200 μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。2）Buffer GE在65-70°C水浴预热，离心之前室温孵育5分钟可以增加产量；用另外的50-200 μl BufferGE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。3）如果要提高DNA的终浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12,000 rpm离心1分钟；若洗脱体积小于200 μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1 μg，推荐用50 μl Buffer GE或灭菌水洗脱。4）因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20°C保存。

细菌基因组提取
1. 细菌样本预处理
1a. 革兰氏阴性菌
（1）取细菌培养物1-5 ml（106-108个细胞，最多不超过2×109个细胞）置于离心管（自备）中，12,000 rpm（~13,400xg）离心1分钟，尽量吸净上清。
（2）向沉淀中加入180 μl Buffer GTL，振荡使菌体重悬。
（3）加入20 μl Proteinase K，涡旋混匀，56°C孵育，直至菌体完全裂解，孵育过程中每隔一段时间颠倒或震荡离心管使样本分散。
注意：如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4 μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液，震荡混匀，室温放置5-10分钟。
（4）加入200 μl Buffer GL，涡旋震荡混匀。
1b. 革兰氏阳性菌
（1）取细菌培养物1-5 ml（106-108个细胞，最多不超过2×109个细胞）置于离心管（自备）中，12,000 rpm离心1分钟，尽量吸净上清。
（2）加入180 μl Enzymatic Lysis Buffer（自备）使菌体重悬。
（3）37°C孵育30分钟。
（4）加入20 μl Proteinase K涡旋震荡，充分混匀。加入200 μl Buffer GL，涡旋震荡混匀。56℃孵育30分钟。
注意：1）如果需要，95°C孵育15分钟可以使病原体失活，但是95°C孵育会造成一些DNA的降解。2）如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4 μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液，震荡混匀，室温放置5-10分钟。
2. 加入200 μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀。
注意：加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。
3. 将步骤2所得溶液（包括形成的沉淀）全部加入到已装入收集管的吸附柱（SpinColumns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
4. 向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
5. 向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤5。
6. 12,000 rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应（酶切、PCR等）。
7. 将吸附柱置于一个新的离心管（自备）中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200 μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12,000 rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20°C保存DNA。
注意：
1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2）Buffer GE在65-70°C水浴预热，离心之前室温孵育5分钟可以增加产量；用另外的50-200 μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
3）如果要提高DNA的终浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12,000 rpm离心1分钟；若洗脱体积小于200 μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1 μg，推荐用50 μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
4）因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

产品组份
Buffer GTL: 15 ml
Buffer GL: 15 ml
Buffer GW1 (concentrate): 13 ml
Buffer GW2 (concentrate): 15 ml
Buffer GE: 15 ml
Proteinase K: 25mg
Proteinase K Storage Buffer: 1.25ml
Lyticase Working Buffer: 30ml
Lyticase: 300μl
Glass Beads: 2g
Spin Columns DM With Collection Tubes: 50

自备试剂
无水乙醇，β-巯基乙醇。

实验准备
1. 向 Proteinase K 中加入 1.25 ml Proteinase K Storage Buffer 使其溶解，-20˚C 保存。配制好的 Proteinase K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量下降。对于有些细胞壁较厚以及在培养阶段会产生大量代谢物的酵母，建议在生长早期收集样品。
3. Lyticase Working Buffer 在使用前请加入β-巯基乙醇，使其终浓度为 0.1%。
4. 第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在 Buffer GW1 和 Buffer GW2 中加入无水乙醇。
5. 使用前请检查 Buffer GTL 和 Buffer GL 是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将 Buffer GTL 和 Buffer GL 于 65˚C 水浴重新溶解。
6. 如果下游实验对 RNA 污染比较敏感，可以在加入 Buffer GL 前加入 4 μl DNase-Free 的 RNase A（100 mg/ml）。

操作步骤
1. 取 1-5 ml 酵母培养物（最多不超过 5×10⁷ 个细胞，一般对于酿酒酵母 OD600=1.0 时，相当于 1-2×10⁷ 细胞/ml），12,000 rpm （~13,400×g）离心 1 分钟，收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。
注意：菌液较多时，可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中。
2．酵母细胞壁的去除：向菌体中加入 600 μl Lyticase Working Buffer（使用前检查是否加入β-巯基乙醇，使其终浓度为 0.1%），并加入 5 μl Lyticase，充分混匀。30˚C 处理 30 分钟。4,000 rpm（~1,500×g）离心 10 分钟，弃上清，收集沉淀。
注意：以上为 5×10⁷ 酵母细胞 Lyticase 用量，根据酵母的菌株和酵母细胞数量的不同，所用的 Lyticase 的浓度和孵育时间应该进行适当调整。
3．向沉淀中加入 200 μl Buffer GTL，加入 40 mg 玻璃珠（Glass Beads），涡旋 5 分钟。
4．加入 20 μl Proteinase K 混匀。55˚C 振荡水浴至细胞完全裂解。若无振荡水浴箱，温育期间每 20-30 分钟颠倒混匀一次。（一般不超过 1 小时细胞即可完全裂解）。
注意：如需去除 RNA，在上述步骤完成后加入 4 μl 100 mg/ml 的 RNase A 溶液。
5．12,000 rpm 离心 5 分钟，小心吸取上清至新离心管中。
6．加入 200 μl Buffer GL，充分混匀。70˚C 孵育 10 分钟，其间颠倒混匀数次，12,000 rpm 离心 5 分钟，将上清移到一个新的离心管中。
注意：若孵育后溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取 DNA 量少和提取的 DNA 不纯。
7．加入 200 μl 无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀。短暂离心，使管壁和管盖上的液体集中到管底。
8．将步骤 7 所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱（Spin Columns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12,000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9．向吸附柱中加入 500 μl Buffer GW1（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10. 向吸附柱中加入 500 μl Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高 DNA 纯度，可重复步骤 10。
11. 12,000 rpm 离心 2 分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
12．将吸附柱置于一个新的离心管（自备）中，向吸附柱的中间部位悬空加入 50-200 μl Buffer GE 或灭菌水，室温放置 2-5 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟，收集 DNA 溶液，-20˚C 保存 DNA。
注意：
1）如果下游实验对 pH 值或 EDTA 敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的 pH 值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5（可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围），pH 值低于 7.0 时洗脱效率不高。
2）离心之前室温孵育 5 分钟可以增加产量。
3）用另外的 50-200 μl Buffer GE 或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4）如果要提高 DNA 的终浓度，可以将步骤 10 所得的 DNA 洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤 10；若洗脱体积小于 200 μl，可以增加 DNA 的终浓度，但可能会减少总产量。如果 DNA 量小于 1 μg，推荐用 50 μl Buffer GE 或灭菌水洗脱。
5）因为保存在水中的 DNA 会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用 Buffer GE 洗脱并于-20˚C 保存。