支原体染色液(Dienes染色液)

上海金畔生物科技有限公司提供支原体染色液(Dienes染色液) ,欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 S0047
英文名称 Mycoplasma stain (Dienes stain)
中文名称 支原体染色液(Dienes染色液)
保存条件 4℃避光保存,有效期12个月。
产品介绍 支原体染色液(Dienes染色液)是一种经典的利用天青美蓝染色检测支原体污染的试剂,经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂检测细胞含量范围一般为0.1~1×106之间。

细胞培养的忠实伴侣-支原体抗生素Plasmocin™

是否在养细胞?是否遇到支原体污染?如果是细胞系,只好丢掉,重新再来。如果是您珍贵的细胞,怎么办?

不用担心!invivogen公司推出了专门针对支原体的抗生素:Plasmocin™。该抗生素包含了两个针对支原体的有效成分,能在2周之内杀死支原体。抗生素一方面作用于蛋白质合成;另一方面作用于DNA复制阶段。这两个作用机制只针对支原体,对许多细菌和真核细胞则没有影响。

和其他抗支原体的试剂相比,Plasmocin™不仅对游离的支原体有效,同样能杀死胞内的支原体。确保培养细胞不会被细胞中释放出来的支原体再次污染。

Plasmocin™浓度范围很广。实验证明,即使使用5倍的工作浓度,Plasmocin™也不影响细胞正常代谢。同时,低浓度的Plasmocin™也能抑制细胞培养中有青霉素链霉素抗性的革兰染色阳性和阴性细菌。

Plasmocin™对很多感染支原体的细胞都有作用,包括胚胎干细胞,杂交瘤细胞和慢病毒感染的细胞系。

Plasmocin™有两种浓度包装,一种是25mg/ml的治疗性Plasmocin™,可以用来杀灭支原体,每支报价1960元;2.5mg/ml的预防性Plasmocin™,可以预防正常培养细胞中支原体污染,每支报价1260元。每支包装1ml,这两种包装都有现货。如果您的细胞正在忍受支原体污染,请。

支原体活菌种:口腔支原体说明书

支原体活菌种:口腔支原体说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10013-0.1ml

0.1ml

7200.00

 

产品描述

本口腔支原体(Mycoplasma orale活菌种是从 ATCC 引进(ATCC 23714 珠)的菌种。口腔支原体(Mycoplasma orale)是体外细胞培养中最常见的污染细胞的支原体种类之一。

使用方法

使用方法

口腔支原体(Mycoplasma orale)活菌种 5 μL ,接种到 10 mL  20%小牛血清(已灭活的精氨酸支原体液体培养基必须含精氨酸,pH 值为 7.1)中,放入厌氧罐内,37 ℃ 厌氧培养。

培养 2-7 天后,可以看到接种有 Mycoplasma orale 的精氨酸支原体液体培养基与不接菌的对照管相比,其颜色会由初始的橙色变成鲜红色pH 值升高,如图 1 所示),说明Mycoplasma orale 培养成功。

注意:接种后,精氨酸支原体液体培养基的颜色一旦由初始的橙色变成鲜红色后,不能继续培养,否则支原体很容易因 pH 值太高而死亡。

 

 1. 将口腔支原体Mycoplasma orale)接种到精氨酸支原体液体培养基(必须含精氨酸, pH 值为 7.1,厌氧培养 3 天后的结果。(A)为未接种的对照管;(B)为接种口腔支原体的实验管。可见:接种有口腔支原体的实验管,厌氧培养 3 天后其颜色会由初始的橙色变成鲜红色,而对照管颜色不变。

 

 

 

 

运输及保存方法

该产品通过冰袋运输,收到产品后请放于-80 ℃保存。

 

 

支原体活菌种:猪鼻支原体说明书

支原体活菌种:猪鼻支原体说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10012-0.1ml

0.1ml

7200.00

 

产品描述

本猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)活菌种是从ATCC引进(ATCC 17981珠)的菌种。

        猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)是体外细胞培养中最常见的污染细胞的支原体种类之一,大约占细胞培养中支原体污染的20-50%

使用方法

使用方法

取猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)活菌种 5 μL ,接种到 10 mL 的含 20%小牛血清(已灭活)的 支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸,pH 值为 7.6)中,在 37 ℃普通的细菌培养箱,有氧培养。 培养 2-5 天后,可以看到接种有 Mycoplasma hyorhinis 的支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸) 与不接菌的对照管相比,其颜色会由初始的鲜红色变成黄色(pH 值降低,,如图 1 所示),说明 Mycoplasma hyorhinis 培养成功。 注意:接种后,支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸)的颜色一旦由初始的鲜红色变成黄色后, 不能继续培养,否则支原体很容易因 pH 值太低而死亡。 变色后的菌液即可用作《发光法支原体检测试剂盒》、《PCR 法支原体检测试剂盒》、《一步法恒温 支原体检测试剂盒》或《探针法支原体检测试剂盒》的阳性对照。 也可以将猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)活菌种直接接种到含 10%血清的哺乳动物细胞培养液中, 与细胞共同培养,培养 3 天后,即可使用该细胞培养上清作为《发光法支原体检测试剂盒》、《PCR 法支 原体检测试剂盒》、《一步法恒温支原体检测试剂盒》或《探针法支原体检测试剂盒》的阳性对照。注意: 如果将支原体接种到哺乳动物细胞培养液中进行扩增培养,必须与细胞共同培养,不能单独培养! 

实验案例分析

 

 

 

 1. 将猪鼻支原体Mycoplasma hyorhinis)接种到支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸,pH 值为 7.6,有氧培养 3 天后的结果。(A)为未接种的对照管;(B)为接种猪鼻支原体的实验管。可见: 接种有猪鼻支原体的实验管,培养 3 天后其颜色会由初始的鲜红色变成黄色,而对照管颜色不变。

 

 

 

 

 

 

运输及保存方法

   该产品通过冰袋运输,收到产品后请放于-80 ℃保存

支原体清除试剂2(1000x)说明书

支原体清除试剂2(1000x)说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10009-1ml

1ml

1160.00

产品描述

本公司开发的支原体清除试剂1含有抑制支原体蛋白质合成的药物,而支原体清除试剂2含有抑制支原体DNA合成的药物。由于两种试剂的作用机理不同,支原体清除试剂1需要处理不少于15天,而支原体清除试剂2只需处理7天。两者都可以达到杀灭和清除支原体的目的。

使用方法

使用方法

1. 使用之前,先将支原体清除试剂2(注意:支原体清除试剂220 ℃保存后,解冻时可能会有细小的结晶析出)PBS 或者无血清培养液稀释10倍后(此时,支原体清除试剂2应该溶解),放 4℃冰箱保存。

2.  50-100万个细胞铺到60mm的细胞培养皿内,加入4mL含支原体清除试剂2的正常细胞培养液(使用稀释 10倍后的支原体清除试剂 2,按 1:100 比例加入)。

3. 1-2天更换细胞培养液。换液时,用PBS冲洗2-3遍细胞,以将死亡的支原体清洗干净。而后加入新鲜的含支原体清除试剂2的正常细胞培养液。期间如果细胞密度过大,请保持细胞密度适当(贴壁细胞可能需要胰酶消化),并更换新的培养皿。

4. 处理7天后,可以用支原体检测试剂盒进行检测,检测支原体是否杀灭。如果仍有支原体残留,可以考虑再处理 3天。

5. 以后每隔1个月进行支原体的常规检测,以保证没有新的支原体污染。

实验案例分析

 

如上图所示,左侧为未经支原体清除试剂处理的人 Hela 细胞, DAPI 染色后,除了细胞核为蓝色外,细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色,这些处于细胞质的核酸物质就是支原体 DNA。而右侧为经过本公司的支原体清除试剂 2 处理 7 天的 Hela 细胞,经 DAPI 染色后,除了细胞核为蓝色外,细胞质没有任何絮状核酸物质被染成蓝色,说明支原体已经被清除。

注意事项

建议将细胞分成三份:第一份添加清除试剂1,第二份添加清除试剂2,第三份同时添加清除试剂1和清除试剂2进行杀灭(注:同时添加两种药物可能对细胞的毒性较大,但是杀灭的概率会非常高), 这样支原体对两种药物同时产生抗性和处理过程中细胞同时死亡的概率会非常低。如果同时添加清除试剂 1 和清除试剂 2,细胞可以每 2 天更换一次培养液。

处理过程中,注意每天观察细胞的状况,如果发现支原体清除试剂对细胞的毒性较大,可以加大培养液中的血清浓度或者提高细胞的密度。

清除试剂1和清除试剂2在降低浓度后使用稀释10倍后的支原体清除试剂1或者 2,再按 1:500 比例加入,即药物的最终稀释比例为 1:5000)也可以加入到培养液中作为短期(1-2个月)的支原体污染预防药物,但是不建议在细胞培养液中长期(超过2个月)加入,因为有可能导致对该两种药物有抗性的支原体出现。

运输及保存方法

该产品在常温下运输,收到产品后请放于-20 ℃保存,该条件下,至少可以保存 2 年。