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rPeptide α-突触核蛋白说明书

发表于由

rPeptide是一家生物技术公司，在美国佐治亚州雅典市及其周边设有办事处，是为阿尔茨海默病和帕金森病研究提供研究产品（重组肽和蛋白质，抗体，试剂）的市场先进者。rPeptide还提供一系列定制服务，从分子生物学，蛋白质表达和纯化，到13C和15N均匀标记肽和蛋白质。

rPeptide拥有专有的平台载体技术，能够在大肠杆菌中表达历*难以处理的肽/蛋白质作为可溶性肽/蛋白质（如β-淀粉样蛋白，瘦蛋白，前胰岛素）。

rPeptide的产品系列提供了许多超纯肽，大部分产品都是“净肽含量”，而不是“总含量”。

rPeptide α-突触核蛋白说明书

Alpha-Synuclein

产品名称

α-突触核蛋白

尺寸

0.5毫克1.0毫克

目录 ＃

S-1001-1

存储

-20℃下

序列

MDVFMKGLSK AKEGVVAAAE KTKQGVAEAA GKTKEGVLYV GSKTKEGVVH GVATVAEKTK EQVTNVGGAV VTGVTAVAQK TVEGAGSIAA ATGFVKKDQL GKNEEGAPQE GILEDMPVDP DNEAYEMPSE EGYQDYEPEA

资源

重组。编码人α-突触核蛋白（1-140）序列的DNA序列在大肠杆菌中表达。

描述

α-突触核蛋白（α-突触核蛋白）是14kD（140个氨基酸）的酸性突触前蛋白。它是帕金森病聚集体的主要成分，并且涉及帕金森病和相关神经退行性疾病的发病机理。α-突触核蛋白在散发性帕金森病患者的大脑中积聚，作为路易体的主要成分，其是帕金森病*的神经元内细胞质内含物。α-突触核蛋白似乎与聚集的其他蛋白质相关，并且在阿尔茨海默氏病中的B-淀粉样斑块和神经炎缠结中发现3。

分子质量

14,460 Da

纯度

通过SDS-PAGE和质谱测定> 95％。

费用（美元）

$ 300

参考：

1）Conway，KA等。al。，（2000）Biochemistry，39：2552 
2）Jakes，R。等。（1994），FEBS Letters，345：27 
3）Masliah，E。等。al。，（2001）Proc。国家科。科学院。Sci。，USA，98：12245 
4）Ueda，K。，et。人。（1993）Proc。国家科。科学院。Sci。，USA，90：11282

 

核蛋白提取试剂盒

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供核蛋白提取试剂盒 ，欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 C5024
英文名称 Nucleoprotein Extraction Kit
中文名称 核蛋白提取试剂盒
保存条件 成分C5024-C（PMSF）于-20℃保存，其余试剂4℃保存。有效期一年。
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍

产品组成及保存条件：

试剂

试剂内容

50T

100T

保存条件

C5024-A

 浆蛋白抽提试剂

25ml

50ml

4℃保存

C5024-B

 核蛋白抽提试剂

5ml

10ml

4℃保存

C5024-C

   PMSF（100mM）

300μL

1ml

-20℃保存


产品介绍：

本试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白的方法，整个过程只需约60 分钟就可以将核蛋白和浆蛋白从细胞中分离出来，得到的蛋白可以用于 Western blot等实验。本试剂盒通过浆蛋白抽提试剂使细胞膨胀破裂，释放出胞浆蛋白，再通过离心得到细胞核，然后通过核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白，可以抽提50/100个样品（每个样品约2×106个Hela细胞或40mg组织）。

本品仅用于科研。

提取步骤：

一、对于体外培养细胞：

1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM；PMSF 需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入 DTT 至终浓度 0.5mM。

2．对于贴壁细胞，去除培养液，用 PBS 洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用 EDTA 消化后吹打下细胞（最好不用胰酶消化，以免胰酶消化目的蛋白）。500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。

3．对于悬浮细胞：用 PBS 洗一遍，500 g离心2～3分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。

4．每 20μL 细胞沉淀加入 200μL 浆蛋白抽提试剂（2×106个细胞沉淀的体积约20μL或40mg）。

5．用移液器吹打或高速涡旋 15 秒（可适当延长），必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。

6．冰浴 10 分钟。

7．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃ 12000～16000g 离心10分钟。

8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的 PAGE、Western 等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。

9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清（避免细胞浆蛋白的污染），加入50-100μL核蛋白抽提试剂。

10．用移液器吹打或高速涡旋15秒（可适当延长）至沉淀完全分散，冰浴10分钟。

11．最高转速剧烈涡旋10秒，4℃ 12000～16000g 离心10分钟。

12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。

二、对于组织样品：

把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每 50mg 组织加入 200μL-500μL PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500 g 离心 2～3 分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀；再加入 200μL 浆蛋白抽提试剂后接上述步骤 5。

注意事项：

1.     1. 裂解得到的蛋白样品，由于含有较高浓度的去垢剂干扰，不能用 Bradford 法测定蛋白浓度，可以选用本公司生产的 BCA 蛋白定量试剂盒(货号C05-02002)测定蛋白浓度。

2.    2.  对于组织样品，本试剂盒适用于新鲜组织，对冻存组织抽提效果较差。

3.    3.  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。