热不稳定性耐高盐核酸酶(HL-SAN) 说明书

热不稳定性耐高盐核酸酶(HL-SAN) 说明书


产品货号

货号

规格

价格

78BEA10011-25000U

25000U

3,000.00

78BEA10011-5000U

5000U

1,000.00

产品详情

无论是实验室规模样品制备、还是生产规模工艺过程,去除核酸都可以改善工艺流程,如蛋白纯化、病毒载体制备、mNGS中样品处理等过程。而核酸酶的选择,就显得特别重要。Heat Labile-Salt Active Nuclease (热不稳定性耐高盐核酸酶,HL-SAN) 是一种非特异性内切酶,在高盐浓度下具有最佳活性;且该酶在多种缓冲液中都有活性,很容易通过还原剂处理而失活。这些特性使HL-SAN在需要去除DNA和RNA的应用中,更为适合。

核酸污染,特别是宿主基因组DNA污染,在几乎所有工艺流程及生物制品的生产中,都是需要重点解决的问题。一方面,宿主DNA的存在,影响目标产物的纯化及下游质量分析等。另一方面,宿主DNA残留能引起机体严重的免疫反应,是生物制品的关键质量参数之一,FDA及NMPA等对Host Cell DNA (HCD)有严格的质控要求。宿主基因组DNA中,组蛋白与DNA形成核小体,核小体紧密折叠形成结构复杂的染色质。组蛋白与DNA间存在强烈的离子作用及疏水作用,再加上特殊的结构,导致宿主DNA很难被准确检测并清除。已有文献表明,高盐浓度下组蛋白与DNA解离相对che底,这有利于宿主DNA的检测及去除。但市售的绝大多数核酸酶在高盐浓度下活性很弱,甚至wan全失活。而耐高盐的HL-SAN成了这类应用的理想选择。

特点

高盐条件下,DNA清除效率更高,宿主DNA残留更少;

pI为9.6,容易跟绝大多数蛋白分离;

还原剂存在时,酶易失活,减少对后续流程的影响。

活性测定条件

1:高盐度溶液中的最佳活性。HL-SAN 在约 0.5 M NaCl 下具有最佳活性,但在 [NaCl] 和 [KCl] 的广泛范围内运行。HL-SAN 的活性在 25 mM Tris-HCl 缓冲液、pH 8.5、5 mM MgCl 2 和不同的 [NaCl] 或 [KCl] 中测试。最大活性设置为 100%。

图 2:温度和活动。HL-SAN 在 ~35°C 时具有最佳活性,但在很宽的温度范围内起作用(10°C 和 50°C 下的活性为 20%)。在含有 5 mM MgCl 2 和 0.5 M NaCl 的pH 8.5 的 25 mM Tris-HCl 缓冲液中测试 HL-SAN 的活性。

3: MgCl 2 和 MnCl 2 浓度对 HL-SAN 活性的影响。

25 mM Tris-HCl 缓冲液、pH 8.5、0.5 M NaCl 和不同浓度的 MgCl 2 或 MnCl 2 中测试 HL-SAN 的活性。将含有 5 mM MgCl 2的样品的活性 设为 100%。

4: HL-SAN 将 ssDNA 消化为 ~5-13 nt,将 dsDNA 消化为 ~5-7 nt。ssDNA 最终产物的大小从 ~5-13 nt 不等,而 dsDNA 被消化到大约 ~5-7 nt。最终产物的大小似乎取决于 DNA 序列。底物 1 和 2 是具有不同序列的 ssDNA,底物 3 和 4 是具有相似序列但在不同末端具有 FAM 标记的 dsDNA。底物 5 是 dsDNA,其序列与底物 3 和 4 相同,但两端带有 FAM 标记。

适用范围

病原微生物检测应用,如宏基因组测序(mNGS)样品去除宿主DNA;

蛋白纯化,特别是DNA结合蛋白;

病毒载体制备,如腺相关病毒(AAV)、腺病毒(AdV)等;

其他需要去除宿主DNA的应用等。

应用举例

1、Nanopore metagenomics enables rapid clinical diagnosis of bacterial lower respiratory infection.

Charalampous T, Kay GL, Richardson H, Aydin A, Baldan R., Jeanes C, Rae D, Grundy S, Turner DJ, Wain J, Leggett RM, Livermore DM, O’Grady J.

Nature Biotechnology. 2019; 37: 783–792.

2、A Structured Workflow for Mapping Human Sin3 Histone Deacetylase Complex Interactions Using Halo-MudPIT Affinity-Purification Mass Spectrometry.

Banks CAS, Thornton JL, Eubanks CG, Adams MK, Miah S, Boanca G, Liu X, Katt M, Parmely T, Florens LA, Washburn MP.

Molecular & Cellular Proteomics. 2018; 17 (7): 1432-1447.

3、Biochemical characterization of ParI, an orphan C5-DNA methyltransferase from Psychrobacter arcticus 273-4.

Grgic M, Williamson A, Kjaereng Bjerga GE, Altermark B, Leiros I.

Protein Expr Purif. 2018; 150: 100-108.

4、Biochemical Characterization of a Family 15 Carbohydrate Esterase from a Bacterial Marine Arctic Metagenome.

De Santi C, Willassen NP, Williamson A.

PLoS ONE. 2016; 11(7): e0159345.

5、Recombinant expression and purification of an ATP-dependent DNA ligase from Aliivibrio salmonicida.

Williamson A, Pedersen H.

Protein Expr Purif. 2014; 97: 29-36.

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作!

本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

质量控制

来源:在毕赤酵母中重组生产。

活性:HL-SAN在10-50°C的温度范围内具有高活性。 活动的最佳 NaCl 浓度为 0.5 M,工作范围为 0.25–1 M。活动需要 Mg2+ (>1 mM)。 工作 pH 范围为 7.5-9.5,最佳 pH 值为 9.0。

比活度:≥ 175 000 Units/mg。

单位定义:一个单位定义为在 37°C 下 30 分钟内 1 A 在 260 nm 处的吸光度增加,使用 50 μg/ml 小牛胸腺 DNA(D-1501,Sigma)在由 25 mM Tris-组成的缓冲液中 HCl,pH 8.5 (25°C),5 mM MgCl2,500 mM NaCl。

核酸酶与核酸清除剂

核酸酶与核酸清除剂

¥167.00

货号:BL770A

规格:250ml/盒

品牌:biosharp

品详情:

 

产品简介:

本产品主要用于各类PCR实验室中的样本处理区域、操作区等实验环境,多种高效清除成分能够有效地清除核酸及核酸酶,来防止因核酸污染造成的假阳性结果及核酸酶造成的假阴性结果,保证实验结果的真实性、准确性。

 

 

使用方法:

直接将本产品喷洒在桌面或实验仪器上,等约10分钟后用干净的纸巾或者湿巾进行擦拭即可。还可以用于各种实验耗材,例如离心管、吸头盒、试管架、试管等,直接喷到耗材表面,待表面晾干后(约10分钟)即可直接使用。对于其他的乳胶制品、不锈钢制品等均有效果。

 

 

注意事项

1、 本产品安全,无毒,无刺激性,但是在使用过程中建议佩戴口罩,避免和皮肤黏膜接触,如果接触请立即用大量清水冲洗。

2、 如果离心管等耗材在进行清除时,试剂没有完全干就加入核酸样本,会因为产品本身的清除效果对核酸样本造成影响,请确认耗材表面的清除试剂完全干后再进行后续实验

3、 若长时间不适用本产品,请将喷头调至关闭状态,防止误喷。

4、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

保存条件:

常温保存,有效期半年。

货号 BL770A
规格 250ml/盒
品牌 biosharp
  • 核酸酶与核酸清除剂
  • 核酸酶与核酸清除剂

5′-外切核酸酶缺陷型 Taq 聚合酶简介

klentaq 5'-外切核酸酶缺陷型 Taq 聚合酶简介

5'-外切核酸酶缺陷型 Taq 聚合酶提供更高的保真度和热稳定性,尤其是作为 LA(长准确度)酶混合物的一部分。


  • Klentaq1 是 Taq DNA 聚合酶的 Klenow 片段类似物。它是已知的最热稳定的 Taq 形式,它没有任何外切核酸酶或内切核酸酶,并且其晶体结构是已知的。

  • LA(Long Accurate)版本的酶是 Klentaq1 和校对酶的混合物。

PRODUCT NAME CAT # AMOUNT PRICE
Klentaq1 100 100 ul (2,000 X 25 ul rxns up to 1kb) $265.00
Klentaq LA 110 100 ul (2,000 X 25 ul rxns up to 1kb) $265.00
Hot Start Klentaq1 HS100 100 ul (2,000 X 25 ul rxns up to 1kb) $265.00
Omni Klentaq 340 125 ul (500 X 25 ul rxns) $280.00
Omni Klentaq LA 350 125 ul (500 X 25 ul rxns) $280.00
Glycerol Free Omni Klentaq GF340 1000 rxns (equivalent to 250 ul standard Omni Klentaq. Volume may be up to 2.5x higher) $560.00
Hot Start Omni Klentaq HS340 125 ul (500 X 25 ul rxns) $280.00
Omni Klentaq 2 342 125 ul (500 X 25 ul rxns) $350.00
Omni Klentaq 2 LA 344 125 ul (500 X 25 ul rxns) $350.00
Hot Start Omni Klentaq 2 HS342 125 ul (500 X 25 ul rxns) $350.00
Cesium Klentaq C 280 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $220.00
Cesium Klentaq C LA 290 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $220.00
Hot Start Cesium Klentaq C HS280 100ul (2000 x 25ul rxns) $220.00
Cesium Klentaq AC 240 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $220.00
Cesium Klentaq AC LA 250 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $220.00
Hot Start Cesium Klentaq AC HS240 100ul (2000 x 25ul rxns) $220.00
Enzyme Combo 500 variable $325.00
Enzyme Combo LA 510 variable $325.00
Hot Start Enzyme Combo HS500 variable $325.00

 

ArcticZymes与ReiThera提供SAN HQ核酸酶达成协议

ArcticZymes与ReiThera在COVID19候选疫苗项目提供SAN HQ核酸酶达成协议

2020-11-27

ArcticZymes与ReiThera提供SAN HQ核酸酶达成协议 

2020.07.02,特罗姆瑟】ArcticZymes AS (OSE:AZT)ArcticZymes Technologies ASA的子公司。该公司宣布已与疫苗生产专家ReiThera Srl(意大利罗马)达成供应盐活性核酸酶(SAN-HQ)的协议,支持ReiThera用于开发和生产病毒候选疫苗。这种候选疫苗基于ReiThera的病毒载体技术,计划很快进入临床试验。

SAN-HQ已经在依赖病毒载体的生物制药市场树立了自己的地位,客户通过病毒将遗传物质导入细胞以治疗或预防疾病。出于安全考虑,监管机构要求制造商在终制剂中尽量减少和控制外源核酸杂质(未被载体封装的DNARNA)的数量。因此,一般会在下游病毒处理过程中用一种或多种核酸酶处理,来消化外源DNA。外源DNA也会导致病毒颗粒聚集,从而降低载体的产量和效力。减少病毒聚集的关键策略之一是将病毒保持在高盐浓度。与其他商业核酸酶不同,SAN-HQ可以在高盐浓度下高效地消化核酸。此外,SAN-HQ的使用浓度较低,这意味着使用后需要从病毒中去除的酶量更少,这是另一个关键优势。

具体来说,病毒疫苗的制造过程是一个复杂而漫长的多阶段过程,有许多步骤。SAN-HQ用于这一过程的一部分,但终不会作为终治疗性疫苗的一部分。因此,供应协议涉及提供这一必要组分,以简化部分过程。

ReiThera公司与德国的白血细胞公司(Leukocare AG)和比利时的Univercells公司(Univercells S.A.)组成了一个泛欧洲联盟,以快速开发其针对冠状病毒SARS-CoV-2的疫苗。SARS-CoV-2会导致COVID19

 

ArcticZymes AS, CEO, Jethro Holter:

很高兴扩大我们的合作关系,支持ReiThera和它的联盟合作伙伴,快速跟踪它开发冠状病毒SARS-CoV-2疫苗的项目进展。ReiThera是欧洲的基因疫苗研发公司,专注于利用ArcticZymesSAN-HQ等z佳技术,将创新疗法推向市场。我们期待支持ReiThera的疫苗开发和未来的商业化。

该协议与我们扩大SAN-HQ生产规模的努力完美契合。20205月,挪威创新基金授予ArcticZymes,用于扩大SAN-HQ生产规模。生产规模的扩大,将满足我们的合作伙伴如ReiThera未来的商业需求。

 

ReiThera’s Project Manager, Marco Soriani:

“ReiThera研发冠状病毒(COVID19)疫苗的努力依赖于其与主要制药利益攸关方的牢固伙伴关系,如ArcticZymes,后者提供了关键技术,以确保始终如一的高质量产品。我们期待与ArcticZymes在这个重要的产品开发项目上合作,该项目旨在应对COVID19大流行。

 

关于ArcticZymes AS

ArcticZymes开发、生产和销售用于分子研究、体外诊断(IVD)和治疗的新型重组酶。公司专注于新型和高质量的酶技术,在快速的技术发展创造了对新型和改良酶的强劲需求的增长市场。其酶的一些*特性包括热不稳定性和在具有挑战性的环境中的活性,以及可整合为商业合作伙伴的可定制、工程化的新特性。

所有ArcticZymes产品均通过ISO13485认证。

 

关于ReiThera Srl

ReiThera Srl是一家致力于基因疫苗和先进治疗药物的技术开发、GMP生产和临床转化的生物技术公司。该公司的管理和科学团队已经开发了一个高度创新的技术平台,该平台基于针对RSV和埃博拉等多种传染病的猿猴腺载体疫苗。ReiThera由一个经验丰富的管理团队领导;他们在以前的成功企业,如Okairos (GSK收购)中合作多年,并在含有灌装设备和质量控制实验室的cGMP设施中,拥有可扩展的病毒载体制造流程方面的长期生产经验。ReiThera也是一个泛欧联盟的成员,该联盟致力于开发和大规模生产一种针对COVID19的腺病毒载体疫苗。

ReiThera在意大利罗马设有总部、研发实验室和GMP设施。

aldevron CRISPR相关库存核酸酶

aldevron CRISPR相关库存核酸酶

 

 

 In-stock CRISPR-Associated Nucleases

 

Description Cat # Price

SpyFi Cas9 Nuclease
COA – 0.25MG
COA – 5MG

9214-0.25MG
9214-5MG
$625.00 – 0.25 mg
$8,980.00 – 5 mg

sNLS-SpCas9-sNLS Nuclease
COA – 0.25MG
COA – 5MG

9212-0.25MG
9212-5MG
$380.00 – 0.25 mg
$6,560.00 – 5 mg

sNLS-AsCpf1-sNLS Nuclease
COA – 0.25MG
COA – 5MG

9213-0.25MG
9213-5MG
$380.00 – 0.25 mg
$6,850.00 – 5 mg

sNLS-SaCas9-sNLS Nuclease
COA – 0.25MG
COA – 5MG

9218-0.25MG
9218-5MG
$380.00 – 0.25 mg
$6,560.00 – 5 mg