klentaq 5′-核酸外切酶缺陷型 Taq 聚合酶简介

klentaq的 5'-核酸外切酶缺陷型 Taq 聚合酶具有更高的保真度和热稳定性,尤其是作为 LA(长精确)酶混合物的一部分。

  • Klentaq1 是 Taq DNA 聚合酶的 Klenow 片段类似物。它是已知的最耐热的 Taq 形式,它没有外切核酸酶或内切核酸酶,并且其晶体结构是已知的。
  • LA (Long Accurate) 版本的酶是 Klentaq1 和校对酶的混合物。
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Table of Matching Products
PRODUCT NAME CAT # AMOUNT PRICE
Klentaq1 100 100 ul (2,000 X 25 ul rxns up to 1kb) $225.00
Klentaq LA 110 100 ul (2,000 X 25 ul rxns up to 1kb) $225.00
Omni Klentaq 340 125 ul (500 X 25 ul rxns) $240.00
Omni Klentaq LA 350 125 ul (500 X 25 ul rxns) $240.00
Omni Klentaq 2 342 125 ul (500 X 25 ul rxns) $300.00
Omni Klentaq 2 LA 352 125 ul (500 X 25 ul rxns) $300.00
Cesium Klentaq C 280 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $190.00
Cesium Klentaq C LA 290 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $190.00
Cesium Klentaq AC 240 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $190.00
Cesium Klentaq AC LA 250 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $190.00
Enzyme Combo 500 variable $280.00
Enzyme Combo LA 510 variable $280.00

 

GelRed 核酸染料

产品信息

产品名称

货号

规格

保存

价格(元)

GelRed 核酸染料(500μL in water, 10,000 X)

C1101L1122

500μL

室温

550

 

GelRed是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有*设计的荧光染料。在游离状态下,GelRed发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。因此,GelRed的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。GelRed与 EB 有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置。标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察 EB 相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300 nm 紫外光附近可得到*激发。GelRed的zui大吸收波长约为518 nm,发射波长zui大约为605 nm。GelRed 与双链DNA的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。另外,GelRed 与EB相比,诱变能力大大降低。

GelRedzui初由美国Biotium公司研发,艾姆斯试验表明,这种新型染料细胞透过性、诱变性方面表现优异,得到市场广泛认可。

运输与保存方法

常温运输、保存,保质期24个月。

使用方法

1.胶染法(用法同EB)

(1)制胶时加入GelRed核酸染料(例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×储液,以此比例类推)。

(2)按照常规方法进行电泳。

注意事项:

此方法染色染料用量相对较少,500 μL染料大约可以做100块50 mL的胶。

由于GelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将GelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。GelRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使用。

此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

2.泡染法

(1)按照常规方法进行电泳。

(2)用H2O将GelRed 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15μL GelRed 10,000×储液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O中)。

(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温振荡染色30 min左右,*染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。

注意事项:

1)用泡染法染色时,染料用量较多,单次使用的染色液可重复使用3次左右。3×GelRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。

2)如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。

3)如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度、延长凝胶时间以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法染色。

3.预染法(zui省染料的染色方法,按25μL体积上样,500μL原液理论做20万个样品)

1)该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳

2)工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的GelRed原液稀释1000倍,即为10 X GelRed工作液。GelRed工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。

3)制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。

4)样品染色:向分析样品中加入GelRed工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使GelRed与样品中DNA充分结合。GelRed工作液加入量为总上样量的1/10,使GelRed在上样时的终浓度为1X.

5)DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μLGelRed工作液混匀,室温放置5分钟,使GelRed与DNA充分结合。

6)上样、电泳:按常规操作。

注意事项:

根据染料分子量小,带电荷少的特性开发本染色方法,按照一块胶10个样品计算,500μL原液理论上可以完成2万块胶的染色。

疑难解答

1. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,GelRed 可以全部从双链核酸上去掉。

2. 如果想对用 GelRed 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3. 在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 GelRed 呈现红色荧光。

4. GelRed对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

5. GelRed原液在室温保存,如放置冰箱保存会产生部分沉淀,使用前适当加热并摇匀即可正常使用。

 

几种核酸染料比较

名称

灵敏度

稳定性

适用性

安全性

价格

GelRed

通用大小片段电泳染色

美国安全认定无毒

GelGreen

通用大小片段电泳染色

美国安全认定无毒

SYBR Green I

*

100bp以上片段电泳染色

花菁染料,低毒

SYBR Green II

*

单链核酸分子电泳染色

花菁染料,低毒

Gold View I

500bp以上片段电泳染色

高毒性,强致癌

EB

100bp以上片段电泳染色

强致癌,强诱变

 

adsbiotec用于核酸分离的HPLC色谱柱产品

ADS Biotec及其母公司ADSTEC(日本)是开发,制造和销售用于细胞遗传学,病理学和研究实验室的自动化仪器和消耗品的。我们的技术和服务使我们的客户能够在保持高度质量和一致性的同时提高生产率和吞吐量。

通过从Transgenomic手中收购了基因测定和平台(GAP)部门,ADS Biotec Inc在三大洲开展了开发,销售和支持业务,并在30多个国家/地区拥有了真正的业务。我们的团队在该行业拥有20多年的经验,以其先进的仪器,的客户服务,科学的应用支持以及非常熟练的销售团队而受到客户的认可。在全公司对质量和价值的承诺下,我们为在细胞遗传学,病理学和分子遗传分析领域进行诊断分析的专业人士和实验室提供服务。

adsbiotec用于核酸分离的HPLC色谱柱产品

用于核酸分离的HPLC色谱柱和缓冲液

ADS Biotec提供靠谱的色谱柱和缓冲液,用于RNA和DNA分子的分离和纯化。RNASep™  和DNASep™系列色谱柱由均匀的烷基化无孔或大孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物)微球组成,可提供的核酸分离。这些多功能色谱柱可用于大多数HPLC系统,以进行许多RNA DNA分离和纯化。

 

核酸HPLC色谱柱

  • DNASep™柱– DNA分离柱

 

DNASep™柱– DNA分离柱

 

4.6 mm x 50 mm –用于高分辨率HPLC ds / ss DNA分析,定径和突变检测。负载量2µg

SKU:DNA-99-3510 类别:反相HPLC色谱柱,WAVE® 色谱柱

  • 描述
  • DNASep TM色谱柱
  • 产品文件
  • 缓冲液

产品描述

DNASep TM  – DNA分离柱使用烷基化的无孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物微球进行核酸分离。这些多功能色谱柱可与WAVE TM和其他各种HPLC系统一起使用。

 

  • DNA 寡核苷酸纯度评估
  • 出色的灵敏度和分辨率
  • 出色的DNA大小
  • 坚固耐用,使用寿命长
  • 使用WAVE™dHPLC系统的数百篇文献参考

产品编号:DNA-99-3510

4.6 x 50 mm,无孔PS DVB树脂基质,柱容量2.0μg总DNA。

DNA大小

液相色谱法(LC)具有高分辨率,分析时间短和易于回收DNA的片段的优点,是一种用于核酸分离和定量的强大技术,可用于后续研究。使用DNASep™色谱柱在反相HPLC中进行上浆应用具有许多优势。可以收集片段并进行进一步的分子分析,例如靶标验证,亚克隆,扩增和测序。测序模板的质量控制(QC)需要DNA的片段大小确定;DNA的片段的定量和大小测定;基因分型中是否存在DNA的片段的“是/否”测定。通过离子对反相HPLC测定dsDNA的片段的大小在很大程度上与分子的片段序列和与序列相关的二级结构无关。

  • 应用说明:使用WAVE ??®核酸片段分析系统确定DNA的片段的大小
  • 应用说明: WAVE上寡核苷酸的质量控制和纯化
  • 应用说明: DNASep和DNASep HT纯化柱用户指南和保修

DNASep™HT小柱–高通量DNA分离柱

 

6.5 mm x 37 mm,适用于各种DNA应用,尤其是用于快速突变检测,负载能力为4µg

SKU:DNA-99-3710 

分类:反相HPLC色谱柱,WAVE® 色谱柱

  • 描述
  • WAVE®墨盒产品文档

产品描述

DNASep TM HT –高通量DNA分离柱使用烷基化的无孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物微球进行高性能核酸分离。这些多功能色谱柱可与各种HPLC系统一起使用,以进行DNA分析,大小确定和突变检测,寡核苷酸分析和纯化以及RNA分析和纯化。

 

OligoSep™滤芯–寡核苷酸分析柱

 

4.6毫米x 50毫米–高分辨率ds / ssDNA分析,大小调整和突变检测。高分辨率RNA分析

SKU:NUC-99-3550 

类别:反相HPLC色谱柱,WAVE® 色谱柱

  • 描述
  • 产品文件
  • 缓冲液

产品描述

OligoSep TM  寡核苷酸分析柱使用烷基化的无孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物微球进行核酸分离。这些通用的色谱柱可与WAVE®和其他各种HPLC系统一起使用。

OligoSep™墨盒

  • 低聚纯度评估
  • 出色的灵敏度和分辨率
  • 在放大之前用于方法验证很有用

商品编号:NUC-99-3550

4.6 x 50 mm,无孔PS DVB树脂基质,柱容量200μg。

 

 

OligoSep™制备型HC柱–大容量寡核苷酸纯化柱

 

7.8毫米x 50毫米–用于寡糖纯化,负载能力为5000µg

SKU:NUC-99-3860 

类别:反相HPLC色谱柱,WAVE® 色谱柱

  • 描述
  • 产品文件
  • 缓冲液

产品描述

OligoSep TM Prep HC高容量寡核苷酸纯化柱使用烷基化的大孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物微球进行核酸分离。这些多功能色谱柱可用于各种HPLC系统。

OligoSep ™ Prep HC墨盒

  • 针对DNA和RNA纯化
  • RNA纯度评估
  • 出色的灵敏度和分辨率
  • 对于放大之前的方法开发和验证很有用
  • 大容量

商品编号:NUC-99-3860

7.8 x 50 mm,大孔PS DVB树脂基质,柱容量5000μg

 

  • 应用说明:从退火寡核苷酸纯化双链siRNA

 

 

RNASep™Prep – RNA纯化柱

 

7.8 mm x 50 mm –适用于各种RNA应用,总RNA的负载能力为50µg -OR- 1000ng特定RNA

SKU:RNA-99-3810 

分类:反相HPLC色谱柱,WAVE® 色谱柱

  • 描述
  • 产品文件
  • 缓冲液

产品描述

RNASep TM  Prep是一种RNA纯化柱,使用烷基化的无孔聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物微球进行核酸分离。这些多功能色谱柱可与WAVE®和其他HPLC系统一起用于RNA分析和纯化。

RNASep ™ 制备盒

针对RNA纯化1用于下游生物学用途

  • RNA纯度评估
  • 出色的灵敏度和分辨率
  • 在放大之前用于方法验证很有用

产品编号:RNA-99-3810

7.8 x 50 mm,无孔PS DVB树脂基质,柱容量为50 µg总RNA或1000 ng特定RNA。

  • 指南:色谱柱保养信息– RNA-99-3810
  • 应用说明:热变性条件下的RNA色谱,RNA分析和质量测定
  • 应用说明:变性条件下的RNA色谱– RNA定量

 

 

美国Biomatrica核酸稳定剂系列产品 中国代理

 美国Biomatrica为您提供一个全新的选择,从此不再受限于低温处理。我们研发了SampleMatrix®,一项*的核心技术,能在常温下保护生物学材料不被降解。这项技术源于一种化合嗜极生物,它们能在干燥的环境下通过再水合作用,保护其机体长时间存活。

低碳是当今社会生活的一大主流,“低碳生活 从我做起”这是每一个地球人都极力推崇和奉行的标语。作为生物学领域的科研工作者,您是否也想到过实验室其实也可以做到低碳绿色呢?

看了上面的对比,是不是觉得不可思议?事实上,核酸常温稳定剂已经悄然进入科研工作者的日常工作中。例如Stanford University, NIH, GSK等单位。上海金畔生物和美国Biomatrica公司联合推出的核酸稳定剂系列产品就可以帮您实现。

核酸稳定剂可用于常温保存RNA、DNA、克隆等,操作简单,可100%回收样本,直接用于下游实验。从此与核酸的低温存储及运输说Bye-Bye,不再埋怨冰箱太拥挤,不再担心样本的降解,不再负担低温运输的高成本。

目前,一些生物学材料如核酸、蛋白、细胞、病毒及疫苗等,为了保证其完整性,均是在低温条件下(4ºC, -20ºC, -80ºC 及液氮)存储和运输的。反复的冻融或长时间暴露在逐渐升高的温度环境下,对于极珍贵或不稳定的材料,容易导致降解。为了维持低温环境,通常需要不断地添加能源,但往往并不十分凑效。因此,一些生物样本的保存及运输通常需要作好周密计划,同时也需花费很大的成本。尽管为了保持样本的完整性作了精心的预防工作,但也很难控制环境的变化。

美国Biomatrica为您提供一个全新的选择,从此不再受限于低温处理。我们研发了SampleMatrix®,一项*的核心技术,能在常温下保护生物学材料不被降解。这项技术源于一种化合嗜极生物,它们能在干燥的环境下通过再水合作用,保护其机体长时间存活。基于对这种*的生物机制的剖析,SampleMatrix®技术被应用于Biomatrica核酸稳定剂产品,用于防止复杂样本及试剂等在运输、存储、处理过程中发生降解,且无需冷藏,不但适用于长期稳定保存样本,并且能快速完整地回收样本。它有助于保持样本的一致性,因此利于科研工作者得到可重复性及可信的实验结果,提率,节约时间,大大减少了成本,是以往低温保存样本的理想替代品。这项技术可用于生物技术、诊断、制药工业等成千上万的即用型产物,也可直接用于来自基因组图谱的数十亿样本,以及法律和军事中用于个人药检和刑侦分析的存档样本。

一、核心技术:STABILIZED-从自然生态到科学研究
源于大自然的“无水生命”,如节肢动物及海虾等,耐热的、玻璃一样的外壳,形成保护屏障,保证核酸蛋白等的稳定,防止其降解。

二、稳定剂系列产品:RNA稳定剂 ,DNA稳定剂, 未纯化细菌DNA克隆稳定剂, 活细菌DNA克隆稳定剂, 血液DNA稳定剂, 细胞和组织DNA稳定剂。另外,QIAsafe DNA Blood为美国Biomatrica公司OEM产品。

样本不但处理起来简单,而且使用时候也方便快捷。
三、RNA稳定剂产品:RNAstable

RNAstable®可以助您将总RNA、poly(A)RNA存储于室温长达数月。当您需要使用的时候,可以在10分钟甚至更短的时间内100%回收RNA样本,并直接用于下游实验。
相对于传统低温存储的方法,RNAstable节约时间,降低能耗及成本。
– 保护RNA样本的完整性
– 快速——准备时间所需不到2分钟

– 迅速且完整地回收样本——只需加水即可

从RNAstable回收到的样本直接用于下游实验,无需纯化:
– 定量RT-PCR
– 生物芯片分析
– 终点PCR及凝胶分析
– cDNA合成
– 反转录
使用RNAstable,在常温及45度下保存的总RNA,比在-80度的效果还要好。
使用RNAstable来保存microRNA(50度), 18个月后的效果
使用RNAstable后的样本可以*和下游的其他分析兼容。美国The Scripps Research研究所的Dr Steven R. Head (Biotechniques, 47 : 667-670,2009)使用GLYCOv3 的芯片试验(microarrays by Affymetrix)来研究糖基因组,发现使用RNAStable的样本(14天保存)和冷冻样本没有任何区别。

 

如果样本是组织或者是细胞的话,Biomatrica公司的另外一款产品DNAguard可以在室温下保存长达2年,而没有任何的核酸降解(DG: DNAguard)。

 

四、拥有运输、操作、存储三大主要优势
1. 运输(Shipping)
– 减少干冰或冰袋运输装备及成本
– 避免干冰运输业务需办理的各种烦琐手续
– 避免长途运输延误收发件时间
– 珍贵样本保证其安全

2. 操作(Handling)
– 避免样本混淆
– 成批处理样本,提高工作效率,节约时间和管理成本

3. 存储(Storage)
– 无需超低温冰箱
– 减少存储空间

– 样本轻松查找存取
– 节约能源,减少碳排量

五、成功案例:

美国Stanford University使用该公司常温保存试剂所获得的预期效益:
• 10年内可以为整个学校节省1600万美金
• 无需低温冰箱,节省200,000百万制冷量(BTU)
• 节省18,000立方吨的干冰
• 2年内收回投资

 

RNAstable
Biomatrica’s RNAstable® technology preserves RNA samples (tRNA, mRNA, miRNA,
siRNA) at ambient conditions and is available in a range of storage formats (single
tubes and multi-well plates).

Promo Code: RS50
Product Cat # Description List Price Promo Price

RNAstable Tube Kit 93221-001 (25) Tubes of RNAstable 1785

RNAstable 96-Well Plate 90220-001 (1) 96-well plates  1785
RNAstable 96-Well Plate Pack 90222-001 (10) 96-well plates 15470

RNAstable LD 2ml 53201-013 (1) 2ml bottle of liquid RNAstable for dry storage5950

RNAstable LD 10ml 52201-013 (1) 10ml bottle of liquid RNAstable for dry storage

 

25500

 

DNAstable Blood
Biomatrica’s DNAstable® Blood product is available in a range of blood volume
formats (tubes and plates: 25µl to 200µl), and offer much higher DNA quantity (2.5x
to 20x) and quality (intact, high molecular weight, non-degraded DNA) per well than
traditional cellulose-based (FTA) cards.

Promo Code: DSB50

Product Cat # Description List Price Promo Price
DNAstable Blood Tube Kit 93027-027 (50) Tubes of DNAstable Blood3519

DNAstable Blood 48-well Plate 57021-047 (1) 48-well plate of DNAstable Blood 1700

DNAstable Blood 48-well Plates 57022-357 (10) 48-well plates of DNAstable Blood 12359

DNAstable Blood 96-well Plate 90621-026 (1) 96-well plate of DNAstable Blood 1000

DNAstable Blood 96-well Plates 90622-026 (10) 96-well plates of DNAstable Blood 7650

Biomatrica’s DNAstable® is the industry’s state-of-the-art technology for ambient
biostabilization of purified genomic DNA samples. Stabilization is offered as a dry-
matrix or a liquid-to-dry format.

Promo Code: DS50

Product Cat # Description List Price Promo

Tube Kit 93021-001 (25) Tubes of DNAstable 1700
DNAstable 96-Well Plate 90021-001 (1) 96-well plate 1000

DNAstable 96-Well Plate Pack 90022-001 (10) 96-well plates 9000

DNAstable 384-Well Plate 91021-001 (1) 384-well plate 1800

DNAstable 384-Well Plate Pack 95021-001 (10) 384-well plates 14535

DNAstable 2D Barcode Tube Plate (Matrix) 90041-006 (1) 96 tubes (0.5ml) in 96-well footprint. 2700
DNAstable LD 2ml 53001-066 (1) 2ml bottle of liquid DNAstable for dry storage 4250
DNAstable LD 10ml 52001-026 (1) 10ml bottle of liquid DNAstable for dry storage 19125

地高辛(DIG):高灵敏度的非放射性核酸标记/检测体系

罗氏应用科学部(Roche Applied Science)是zui早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一,让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。自1995年罗氏的地高辛产品上市以来,尽管陆续有许多出色的竞争者涉足这一领域,尽管有定量PCR技术的应用,DIG系统仍然是非放射性标记—检测技术的,被广泛地应用各种膜杂交及原位杂交技术中。 

      
   技术原理:

 

      地高辛标记技术源于一种从洋地黄类植物(毛地黄和毛花毛地黄)中提取的类固醇(Steroid)物质—— Digoxigenin  (DIG),在医学上可用于治疗各种急性和慢性心功能不全以及室上性心动过速、心房颤动和扑动等疾病。由于洋地黄植物的花和叶片Digoxigenin在自然界中的*来源,因此抗DIG的抗体不会与其他的生物物质结合,从而可以满足特异性标记的需要。这一点,正是DIG胜于生物素(Biotin)的地方——同样是小分子标记物,生物素广泛存在于各种组织中,对于灵敏度很高的标记检测实验来说,样品自身含有的内源生物素,就会对结果产生干扰。地高辛就能够很好地避免这个问题。

             
   技术特点:
        

      与放射性标记和检测技术相比较,DIG 系统具有一下多个优势:
            è    高灵敏度,*可满足实验需要,某些方面甚至可与放射性标记的灵敏度向媲美
            è    曝光时间短,结果显示时间以分钟计算,无需几小时甚至几天的自显影过程
            è    安全环保,不接触放射性物质,不会对环境造成污染
            è    探针可重复使用,zui少可以稳定储存一年
            è    可轻松进行探针拨离和重探
            è    凭借多年的经验和众多使用者的反馈意见,提供全面的应用指南

             
   应用领域:
      地高辛系统能够安全地标记DNA, RNA或是寡聚核苷酸探针,这些探针可以被广泛地应用在
            è     Southern blotting, dot blotting
            è     Northern blotting
            è     Array
            è     Colony hybridization
            è     In situ hybridization
            è     ELISA
             
   技术细节:
      DIG 通过一个含有11个碳原子的空间臂与尿嘧啶核苷酸上的C5位置相连,一定浓度的DIG标记的核苷酸可以通过DNA 
       polymerase (如E.coli DNA Polymerase, T4 DNA Polymerase, T7 DNA 
       Polymerase, Reverse Transcriptase, Taq DNA Polymerase )、RNA 
       polymerase (如SP6, T3或T7 RNA Polymerase)或是末端转移酶(Terminal 
       Transferase)的作用掺入到核苷酸探针中;也可通过随即引物标记(random primed labeling), 
       缺口平移(nick   translation),PCR,3’端标记/加尾或是体外转录制备带有DIG标记的探针。当然也可以通过化学合成的方法进行核苷酸的标记。
               
            Fig. Structure of Alkali-liable Digoxigenin(DIG)-dUTP
             
      对于DIG 标记探针的杂交检测,可选用连接有碱性磷酸酶(alkaline            phosphatase),过氧化物酶(peroxidase),荧光素(fluorescein),若丹明(rhodamine)或是胶体金(colloidal  gold)高亲和性的抗DIG抗体共轭物;也可选用不带任何共轭连接的抗DIG抗体和二级抗体。
             
      检测的灵敏度主要依赖于对不同抗DIG抗体共轭物显示方法的选择。以连接有碱性磷酸酶的抗DIG 抗体为例:即可以使用NBT或BCIP做底物的显色法,也可以使用HNPP荧光碱性磷酸酶底物,检测的灵敏度常规可达到0.1pg   (Souther blot)。