人成纤维细胞活化蛋白(FAP)酶联免疫分析(ELISA)

人成纤维细胞活化蛋白(FAP)酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中成纤维细胞活化蛋白(FAP)的含量。

实验原理:

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人成纤维细胞活化蛋白(FAP)水平。用纯化的人成纤维细胞活化蛋白(FAP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入成纤维细胞活化蛋白(FAP),再与HRP标记的成纤维细胞活化蛋白(FAP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的成纤维细胞活化蛋白(FAP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人成纤维细胞活化蛋白(FAP)含量。

 

试剂盒组成:

试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份  
封板膜 2片(48) 2片(96)  
密封袋 1个 1个  
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:1350pg/mL 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

 

样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为900 pg/mL,600pg/mL ,300 pg/mL,150 pg/mL,75pg/mL)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

注意事项:

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,

在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD

值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释

倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值

代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释

倍数,即为样品的实际浓度。

 

 

 

(此图仅供参考)

 

 

 

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批间应分别小于9%和11%

 

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

 

人牙龈成纤维细胞


正常人类细胞和动物细胞

Lifeline®人类细胞包括:内皮细胞,上皮细胞,成纤维细胞,造血细胞,黑素细胞,平滑肌和间充质干细胞。所有Lifeline®正常人和动物(小鼠)细胞:

  • 当在生命线培养基中培养时,不需要暴露于抗微生物剂或酚红。不需要抗微生物剂和酚红,并且不推荐使用,以获得适的电池性能。这些补充剂可能导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能会对实验结果产生负面影响。
  • 支原体呈阴性,细菌和真菌生长呈阴性。
  • 通过PCR对HIV,HBV和HCB呈阴性。

原代细胞定义为已从组织中分离,铺在培养容器上,扩增,收获和冷冻保存的细胞。

二级细胞定义为在收获用于冷冻保存之前已在培养容器中分离,铺板和扩增两次的细胞。

 

人内皮细胞

人内皮细胞包括:主动脉,冠状动脉,肺动脉,髂动脉,HUVEC(人脐静脉),微血管,心脏微血管和肺微血管。

Lifeline®正常人内皮细胞为研究血管生成,癌症,伤口愈合,动脉粥样硬化,炎症或血管生物学提供了理想的细胞系统。另外,这些细胞系也可用于药物开发或筛选。

Lifeline®人体内皮细胞在Lifeline®VascuLife®培养基中培养时不会暴露于抗菌素或酚红,这是一个优点,因为这些补充剂可能导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能对实验结果产生负面影响。Lifeline®提供这些传统的补品; 但是,在大多数研究应用中,不需要或推荐它们来实现*的电池性能。

人内皮细胞系统

未暴露于人VEGF

Lifeline®正常人内皮细胞在称为VascuLife一个专门的内皮细胞培养基中分离® ENGS中,以确保它们保持不暴露于重组人VEGF。该特化培养基提供具有或不具有VEGF的低血清(2%)环境,其在至少15次群体倍增期间以等于或大于血清补充培养基的速率产生宜内皮细胞生长。

 

Lifeline®人脐静脉内皮细胞(HUVEC)冷冻保存为原代细胞*和我们的HUVEC 10供体库,人主动脉(HAoEC),人肺动脉(HPAEC),人髂动脉(HIAEC),人冠状动脉(HCAEC)和人类心脏微血管内皮细胞作为二级*或三级细胞冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和电镀效率。生命线还提供了人皮肤微血管内皮细胞(HDMVECn)和肺微血管细胞,可以是在VascuLife宜培养® ENGS-MV或VascuLife ® VEGF-MV介质,它们都含有5%人血清。

保证一致性和可重复结果的质量测试

Lifeline Cell Technology使用的原材料生产产品,并在每次生产过程中都包含广泛的质量保证。准确程序可确保一致的性能。

人成纤维细胞

人成纤维细胞包括:膀胱,心脏,皮肤,肺气道,牙龈,子宫和输精管。

Lifeline®正常人成纤维细胞提供理想的细胞系统,用于研究各种器官(包括皮肤,肺,膀胱和生殖系统)的伤口愈合,毒理学,癌症或基本细胞生物学。我们的正常人成纤维细胞也可用于药物筛选,药物开发和基因组编辑应用。此外,我们的成纤维细胞系是建立人胚胎干细胞(ESCs),诱导多能干细胞(iPSCs)和其他需要饲养层的细胞培养应用的无血清人饲养层的理想选择。

将人成纤维细胞(成人或新生儿)和无Xeno人成纤维细胞冷冻保存为原代细胞。
将人类心脏,肺,子宫,输精管和膀胱成纤维细胞冷冻保存为二次细胞,以确保zui高的纯度,活力和平板效率。

正常人心脏成纤维细胞 

 Normal Human Cardiac Fibroblasts

 

FC-0060

产品描述

Lifeline®正常人类心脏成纤维细胞提供理想的细胞系统,用于为人类胚胎干细胞培养物建立无血清人类饲养层,或作为研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学的模型。

Lifeline®心脏成纤维细胞已经在培养皿中分离,铺板和扩增两次,然后进行冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和电镀效率。

我们的成纤维细胞在FibroLife®S2或FibroLife®无Xeno培养基中进行了质量测试,以确保在至少15次群体倍增期间适当的生长和形态。

当在Lifeline®FibroLife®培养基中培养时,我们的心脏成纤维细胞不会接触抗生素或酚红。生命线提供抗微生物剂和酚红,但它们不是真核细胞增殖所必需的。为方便起见,购买了一瓶庆大霉素和两性霉素B(GA; LS-1104),购买了FibroLife®S2(LL-0011)中等完整试剂盒。建议使用GA来抑制真核细胞培养物中潜在的真菌或细菌污染。可以购买苯酚红(LS-1009),但不是必需的。

产品规格表

  •  

成纤维细胞系统

    • 正常人成纤维细胞系统和培养基

辅助产品

    • FibroLife®S2成纤维细胞培养基完整试剂盒 [LL-0011]

人牙龈成纤维细胞

FC-0095

Human Gingival Fibroblasts

 

产品描述

Lifeline®正常人牙龈成纤维细胞提供理想的细胞系统,用于为人类胚胎干细胞培养物建立无血清人类饲养层,或作为研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学的模型。

这些成纤维细胞从人牙龈组织中分离。

  • 成纤维细胞已经在培养容器中分离,铺板和扩增两次,然后收获用于冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和平板效率。

我们的成纤维细胞在FibroLife®S2或FibroLife®无Xeno培养基中进行了质量测试,以确保在至少15次群体倍增期间适当的生长和形态。

当在FibroLife®无Xeno培养基中培养时,牙龈成纤维细胞可以在无Xeno条件下生长。

当在相应的Lifeline®培养基中培养时,Lifeline®成纤维细胞不暴露于抗微生物剂或酚红,这是有利的,因为这些补充剂可引起细胞应激和可能对实验结果产生负面影响的“掩蔽效应”。

 

产品规格表

  •  

成纤维细胞系统

    • 正常人成纤维细胞系统和培养基

辅助产品

    • FibroLife®成纤维细胞无血清培养基 [LL-0001]
    • FibroLife®S2成纤维细胞培养基完整试剂盒 [LL-0011]

SDS和“安全数据表”

(MSDS或材料安全数据表)

  •  

细胞

    • SDS-0095的SDS

 

货号

品名

规格

品牌

FC-0057

Normal Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0020

Normal Human Mesenchymal Stem Cells — Wharton’s Jelly

ea

lifelinecelltech

FC-0034

Human Mesenchymal Stem Cells — Adult

ea

lifelinecelltech

FC-0062

Normal Human Pre-Adipocyte Cells

ea

lifelinecelltech

HC-0023

Mouse Dendritic Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0091

Human Skeletal Muscle Satellite Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0014

Normal Human Aortic Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0032

Human Coronary Artery Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0058

Human Lung Microvascular Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0039

Dermal Microvascular Endothelial Cells – Adult

ea

lifelinecelltech

FC-0053

Cardiac Microvascular Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0042

Dermal Microvascular Endothelial Cells — Neonatal

ea

lifelinecelltech

FC-0055  

Normal Human Pulmonary Artery Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0003

Normal Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC), Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0044

Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC) –10-Donor Pool

ea

lifelinecelltech

FC-0081

Fallopian Tube Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0083

Human Vaginal Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0078

Endometrial (Uterine) Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0080

Human Cervical Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0016

Normal Human Small Airway Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0035

Human Bronchial/Tracheal Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0054

Human Lobar Bronchial Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0079

Human Bladder Dome Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0040

Human Bladder Apex Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0029

Normal Human Corneal Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0094

Human Oral Keratinocytes (Gingiva)

ea

lifelinecelltech

FC-0007

Epidermal Keratinocytes — Neonatal, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0025

Epidermal Keratinocytes — Adult, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0064

Human Epidermal Keratinocytes, 10-Donor Pool

ea

lifelinecelltech

FC-0063

Normal Human Mammary Epithelial Cells — Male

ea

lifelinecelltech

FC-0065

Normal Human Mammary Epithelial Cells — Female

ea

lifelinecelltech

FC-0038

Normal Human Prostate Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0018

Human Renal Medullary Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0013

Renal Proximal Tubule Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0012

Human Renal Cortical Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0017

Normal Human Renal Mixed Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0048

Human Seminal Vesicle Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0060

Normal Human Cardiac Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0095

Human Gingival Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0050

Normal Human Bladder Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0037

Human Dermal Fibroblasts – Neonatal, Xeno-Free, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0001

Human Dermal Fibroblasts – Neonatal, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0024

Normal Human Dermal Fibroblasts — Adult, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0049

Normal Human Lung Fibroblasts, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0076

Normal Human Uterine Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0052

Normal Human Vas Deferens Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

 

我们公司优势是强大的采购,

1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,

2:货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,

3:提供加急服务,一般1-2周到货,超过时限加急费全免

4:价格公道,绝大部分价格有优势,当然不能保证100%产品都是价格低廉,因为价格低廉意味着没有服务.

5:良好的信誉,大部分客户我们提供货到付款服务,客户包括清华,北大 交大 复旦,中山等100多所大学,ROCHE,阿斯利康,国药 ,fisher等500多家公司

6:我们代理的品牌有:Antibody Research Corporation,arcticzymes,Biorelevant,AmberGen, Inc. ,clemente-associates,clodronateliposomes,Columbia Biosciences,enzyme research,Gene Bridges GmbH,Genovis,AmberGen, Inc.  Biotechnology GmbH,Haematologic Technologies HTI Haemtech,hookelabs,Immudex,Innovative Research of America,inspiralis ,List Biological Laboratories, Inc.,lumafluor,Microsurfaces,multiplicom,nanotools,Pel-Freez Biologicals,pentapharm,progen,Protein Ark,QA-Bio,Inc,QA-Bio,IncQuickZyme Biosciences,Teknova,TriLink BioTechnologies, Inc.,Zyagen Laboratories 等

7:我们还是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批发,欢迎合作。

 

中空纤维细胞培养系统

为了让细胞培养更简单、更经济、更,美国FiberCell Systems公司十余年来一直致力于中空纤维细胞培养系统的开发。如今,这种与众不同的培养系统已经上市了。

      FiberCell中空纤维细胞培养系统模拟了生物体循环系统中毛纤维的结构及功能,将天然亲水聚合物,拉成两端有开口的纤维。将此种中空纤维装入柱状的 塑胶容器中,其成品就像光纤排列在电缆中一样。它利用中空纤维膜隔离细胞与细胞培养基,在中空纤维的外壁培养细胞。

 

空纤维是一种很小的、圆柱形的透滤材料,形状类似于喝水用的吸管,并且直径只有200 μm。这些纤维被装入圆筒外壳中,这样,经圆筒末端泵入的细胞培养基就会流过纤维内部。同时,细胞生长在纤维外侧。于是,这些纤维就创造了一个半通透的屏 障,让葡萄糖和乳酸这样的小分子可以随意地穿过纤维,而蛋白质这样的较大分子则不能穿过。如果有细胞因子或自分泌因子存在,则可以通过选择纤维的孔径或者 截留分子量(MWCO)来控制不同因素对细胞生长的影响。

中空纤维生物反应器和其它细胞培养技术的一个主要区别在于:中空纤维能形成易于细胞附着的多孔渗滤支撑,zui类似于活体内的细胞生长方式。由于营养输送是由下至上的,因此细胞很容易彼此堆积,形成一个具有多层细胞的层面。在中空纤维生物反应器上,细胞传代是不必要的。

中空纤维生物反应器的另一个特点是培养的细胞浓度可以超过108/mL,而一般的旋转烧 瓶培养的哺乳动物细胞浓度大约是106/mL。高浓度细胞可以产生高浓度分泌蛋白,并能快速开展病毒和寄生虫感染,还可以减少细胞对血清的需求甚至使细胞 在无血清培养基中生长。因此,FiberCell中空纤维细胞培养系统是生产10 mg至1 g重组蛋白的。

这一新型培养系统适用于单克隆抗体生产、重组蛋白生产、内皮细胞培养、淋巴细胞培养、体外毒理学研究和病毒载体生产。

FiberCell目前提供三种类型的纤维:聚砜、纤维素和PS+纤维。同时他们还提供三种不同的截留分子量:5 kd、20 kd和0.1微米。

亲水性的聚砜纤维是特别为良好的细胞培养性能而设计的。5 kd MWCO和20 kd MWCO纤维的过滤率较纤维素纤维要高出10倍,便于快速的营养物和废物交换。任何可粘附在塑料表面或悬浮培养的细胞类型都能在聚砜纤维培养圆筒中很好地 生长。纤维素纤维一般不适用于细胞培养,因为它们的低过滤率对细胞生长并非*,它们主要应用在体外毒理学研究上。PS+纤维的性能*,它让蛋白基质、 抗体和细胞因子能与纤维表面结合。因此,这种纤维适合原代细胞类型,您可以控制与细胞相互作用的表面基质,而内皮细胞可在纤维内部生长。

这种操作简便,耗材用量少,产量高,是大规模培养细胞的新选择。

上海金畔生物科技有限公司

Eagle Biosciences人完整成纤维细胞生长因子

Eagle Biosciences人完整成纤维细胞生长因子(FGF-21)ELISA

 

目录号:

F2131-K01(1 × 96孔)

仅供研究使用。不得用于诊断程序。

v. 1.0

EagleBiosciences,Inc.

预期用途

Eagle Biosciences人完整成纤维细胞生长因子21(FGF-21)ELISA检测试剂盒(酶联免疫分析试剂盒)预期用于定量测定血清中人完整成纤维细胞生长因子21(FGF-21)的水平。Eagle Biosciences人完整成纤维细胞生长因子21(FGF-21)ELISA检测试剂盒仅供研究使用,不用于诊断程序。

 

引言

成纤维细胞生长因子21(FGF-21)属于FGF-19亚家族,包括FGF-19、FGF-21和FGF-23。FGF-19家族成员是调节多种生理稳态的强效内分泌激素。

 

完整的FGF-21是由181个氨基酸组成的小蛋白。在一系列胰岛素抵抗动物模型中,给予重组FGF21可降低血糖和胰岛素水平,降低肝脏和循环甘油三酯和胆固醇水平,并改善胰岛素敏感性、能量消耗、肝脏脂肪变性和肥胖。FGF-21的生理功能依赖于其N末端和C末端区域的完整分子结构和氨基酸序列。N端截短的FGF-21(7-181)是一种强效抑制剂,可竞争性抑制完整FGF-21(1-181)的生物活性。因此,测量循环完整FGF-21水平在生理和病理生理状况评估中具有重要意义。测定FGF-21片段的试验可能高估供试品中蛋白的生物活性。

 

循环FGF-21是一种生物标志物,在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、2型糖尿病、妊娠期糖尿病和肥胖患者中其水平升高。在库欣综合征患者、HIV-1诱导的脂肪代谢障碍患者和慢性肾病或终末期肾病(ESRD)患者中也发现循环FGF-21增加。

 

试验原理

Eagle Biosciences人完整成纤维细胞生长因子21(FGF-21)ELISA检测试剂盒的设计、开发和生产用于定量测定血清和EDTA血浆样本中的人完整FGF-21。该试验采用双位点“夹心”技术和与人完整FGF-21不同表位结合的两种选定抗体。其中一种抗体与N-末端人FGF-21(1-7)特异性结合,另一种与C-末端人FGF-21(175-181)特异性结合。

 

将试验标准品、对照品和患者样本直接加入包被抗人FGF-21(1-7)特异性抗体的微孔板孔中。同时,向各孔中加入辣根过氧化物酶结合的抗人FGF-21(175-181)特异性抗体。一个孵育期后,微量滴定孔壁上的抗体捕获样本中的人FGF-21,并洗去每个微量滴定孔中的未结合蛋白。形成“抗FGF-21抗体人完整FGF-21 HRP结合示踪抗体”的“夹心”。在随后的清洗步骤中除去未结合的示踪抗体。为检测该免疫复合物,将微孔与底物溶液在定时反应中孵育,然后在分光光度酶标仪中测定。与微量滴定孔壁上人完整FGF-21结合的免疫复合物的酶活性与样本中完整FGF-21的量成正比。通过绘制吸光度与相应人完整FGF-21浓度的曲线生成标准曲线

 

直接根据该标准曲线测定供试品中的FGF-21。

 

试剂:制备和储存

接收后,该完整成纤维细胞生长因子21(FGF-21)ELISA检测试剂盒必须储存在2-8 ℃下。关于试剂盒的失效日期,请参阅试剂盒包装盒上的标签。所有组分在失效日期前均保持稳定。

 

使用前使所有试剂恢复至室温。不同试剂盒批号的试剂不得合并或互换。

 

1. 抗人FGF-21抗体包被微孔板

一个微孔板,含有12 x 8孔可破碎条带(共96孔),包被有人FGF-21抗体。将板框定并密封在含有干燥剂的箔拉链袋中。该试剂应在2-8 ℃下储存,并在试剂盒包装盒上的失效日期前保持稳定。

 

2. 人FGF-21示踪抗体

一个小瓶含有0.4 mL浓HRP标记的抗人FGF-21抗体(稳定蛋白基质中)。使用前,必须用FGF-21示踪剂抗体稀释剂稀释该试剂。该试剂应在2-8 ℃下储存,并在试剂盒包装盒上的失效日期前保持稳定。

 

3. FGF-21示踪抗体稀释液

一个含有8 mL即用型缓冲液的小瓶。根据测定程序,应仅用于示踪抗体稀释。该试剂应在2-8 ℃下储存,并在试剂盒包装盒上的失效日期前保持稳定。

 

4. ELISA清洗浓缩液

每瓶含30 mL 30倍浓缩液。使用前,必须用870 mL去离子水稀释内容物,并混匀。稀释后,得到含有表面活性剂的工作清洗液,溶于含有非叠氮化物、非汞防腐剂的磷酸盐缓冲盐水中。稀释液应在室温下储存,并在试剂盒上显示的失效日期前保持稳定。

 

5. ELISA HRP底物

一瓶含有12 mL四甲基联苯胺(TMB)和稳定的过氧化氢。该试剂应在2-8 ℃下储存,并在试剂盒包装盒上的失效日期前保持稳定。

 

6. ELISA终止液

每瓶含12 mL 0.5 M硫酸。该试剂应储存在2-8 ℃或室温下,并在试剂盒包装盒上的失效日期前保持稳定。

 

7. 人FGF-21标准品

6个小瓶分别含有不同浓度的人FGF-21,溶于冻干牛血清基质中,基质中含非叠氮化物、非汞防腐剂。各标准品的准确浓度参见小瓶。标准品可直接使用。这些试剂应在2-8 ℃下储存,并在试剂盒包装盒上的失效日期前保持稳定。

 

8. 人FGF-21对照

两个小瓶分别含有不同浓度的人FGF-21,溶于冻干牛血清基质中,含非叠氮化物、非汞防腐剂。有关各质控品的准确浓度范围,请参见小瓶。质控品准备就绪。两种质控品均应储存在2-8 ℃下,并在试剂盒包装盒上标注的失效日期前保持稳定。

 

安全注意事项

人完整成纤维细胞生长因子21(FGF-21)检测试剂盒试剂必须在专业实验室环境中使用,且仅供研究使用,不得用于诊断程序。仅牛血清试剂来源的原材料来自美国连续48个国家。仅从兽医监督下饲养的供体健康动物中获得,发现无传染病。进行本试验时佩戴手套,并将这些试剂视为具有潜在传染性进行处理。避免接触含有TMB、过氧化氢或硫酸的试剂。TMB可能会刺激皮肤和粘膜,引起皮肤过敏反应。TMB是一种疑似致癌物。硫酸接触皮肤可能引起严重刺激。请勿接触眼睛、皮肤或衣服。请勿摄入或吸入烟雾。接触后,用大量水冲洗至少15 min。使用药物非临床研究质量管理规范。

 

需要但未提供的材料

· 能够递送25µL、50µL、100µL和1000µL的精密单通道移液器

· 重复适用于递送100µL的分配器。

· 适用于上述体积分配的一次性移液器吸头。

· 一次性12 x 75 mm或13 x 100玻璃管或塑料管。

· 带盖的一次性100 mL和1000 mL塑料瓶。

· 铝箔。

· 去离子水或蒸馏水。

· 塑料微量滴定孔盖或聚乙烯膜。

· ELISA多通道洗瓶或全自动(半自动)洗涤系统。

· 能够读取450 nm处吸光度的分光光度酶标仪。

 

样本采集

仅需要50µL人EDTA血浆用于单峰人FGF-21测定。标本采集前无需对个体进行特殊准备。应使用紫色盖的真空采血管采集全血,并通过离心(850-1500xg离心10 min)将血浆与细胞分离。应在采集后立即或至少在采血后1小时内将血浆与细胞分离。离心后应立即将血浆转移至洁净试管中。如果在48小时内不进行测定,血浆样本应储存在-20 ℃下。避免标本冻融循环超过3次。

 

血清样本也可用于FGF-21测定。血清样本采集应按照样本采集管制造商的建议进行。

 

样本运输

收集的EDTA-血浆或血清样本应在冷冻条件下用干冰运送至实验室。如果冷冻条件不可用,样本应在

 

冷藏运输,例如,使用蓝色冰袋运输。

 

 

试剂制备

1. 使用前,使所有试剂恢复至室温。不同试剂盒批号的试剂不得组合或互换。

2. 使用前,必须将ELISA清洗浓缩液稀释至工作溶液。详细信息请参见试剂章节。

  • 向各小瓶中加入0.5 mL蒸馏水,复溶试剂盒标准品和质控品。使用前轻轻混合并溶解整个颗粒。复溶的标准品和对照品应在使用后立即储存在-20 ℃下。
  • 用FGF-21示踪抗体稀释剂(目录号30600)以1:21倍稀释结合抗体,制备工作人FGF-21示踪抗体(目录号30620)。下表概述了使用的试剂条与制备的抗体混合物之间的关系。

 

试纸编号。

FGF-21示踪抗体稀释液

FGF-21示踪抗体

1

500 µL

25 µL

2

1000 µL

50 µL

3

1500 µL

75 µL

4

2000 µL

100 µL

5

2500 µL

125 µL

6

3000 µL

150 µL

7

3500 µL

175 µL

8

4000 µL

200 µL

9

4500 µL

225 µL

10

5000 µL

250 µL

11

5500 µL

275 µL

12

6000 µL

300 µL

注:该抗体混合物必须在临检测前新鲜制备。

 

 

试验程序

1. 将足够数量的鼠IgG包被微孔板条/孔置于支架中,以一式两份运行人FGF-21标准品、对照品和未知样品。

 

2. 测试配置

世界其他地区

试剂条1

试剂条2

试剂条3

A

标准品1

标准品5

样本1

B

标准品1

标准品5

样本1

C

标准品2

标准品6

样本2

D

标准品2

标准品6

样本2

E

标准品3

C 1

样品3

F

标准品3

C 1

样品3

 

G

标准品4

C 2

 

H

标准品4

C 2

 

 

3. 向微孔中加入50µL标准品、对照品和患者血浆/血清样本。

4. 向各孔中加入50µL 1:21稀释的示踪抗体

5. 用封板覆膜覆盖微孔板,并在室温下通过定轨振摇170 rpm孵育微孔板2小时。

6. 取下封板膜。吸取各孔内容物。向各孔中加入350µL工作清洗液,清洗各孔5次,然后*吸出内容物。或者,可以使用自动微孔板洗板机。

7. 向各孔中加入100µL ELISA HRP底物。

8. 用封板覆膜覆盖微孔板,同时用铝箔覆盖,避免暴露于光照下。平板在室温下孵育20 min。

9. 取下铝箔和封板膜。向各孔中加入100µL ELISA终止液。轻轻混合。

10. 在酶标仪中读取450/650 nm下10 min内的吸光度

 

程序注释

1. 建议所有标准品、对照品和未知样品重复测定两次。每份重复样本的平均吸光度读数应用于数据简化和结果计算。

2. 将光敏试剂保存在原始琥珀色瓶中。

3. 将任何未使用的抗体包被条储存在含有干燥剂的箔拉链袋中,以防止受潮。

4. 为确保试验的重现性,必须采用仔细的技术并使用适当校准的移液装置。

5. 除本说明书中规定的孵育时间或温度外,其他孵育时间或温度可能影响结果。

6. 避免微孔中出现气泡,因为这可能导致结合效率较低和重复读数的CV%较高

7. 所有试剂在使用前应轻轻充分混匀。避免起泡。

 

结果判读

1. 计算每对重复检测结果的平均吸光度。

2. 从所有其他读数的平均吸光度中减去STD 1(0 ng/mL)的平均吸光度,得到校正吸光度。

3. 通过所有标准品的吸光度生成标准曲线。还可使用适当的计算机辅助数据简化程序进行结果计算。

 

使用各自的校正吸光度,直接从标准曲线读取对照品和患者样本的人完整FGF-21浓度。

 

示例数据和标准曲线

显示了人完整成纤维细胞生长因子21(FGF-21)ELISA检测试剂盒的典型吸光度数据和所得标准曲线。不得使用该曲线代替每次试验的标准曲线运行。

 

孔I.D.

 

OD 450/650 nm吸光度

 

结果pg/mL

 

读数

平均值

已纠正

 

 

0

pg/mL

 

0.037

0.036

 

0.037

 

0.000

 

32.5

pg/mL

0.087

0.086

0.087

0.050

 

91

pg/mL

0.172

0.169

0.170

0.133

 

255

pg/mL

0.398

0.399

0.399

0.302

 

714

pg/mL

1.067

1.069

1.068

1.031

 

2000

pg/mL

2.835

2.903

2.869

2.946

 

对照1

0.126

0.129

0.127

0.371

 

 

 

 

60.83

对照2

0.736

0.721

0.729

1.200

 

 

 

 

481.29

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

预期值

用该人完整FGF-21 ELISA测定32份正常成人血浆样本。发现正常范围小于200 pg/mL。强烈建议各实验室根据正常供体EDTA血浆或血清样本建立自己的正常范围。

 

程序的局限性

1. 由于没有可用于人完整FGF-21测量的金标准浓度,因此通过与高纯度FGF-21标准品的相关性确定试验标准品的值。

2. 对于读数高于标准的样本值,建议使用稀释液重新测定样本。

3. 血浆标本或试剂的细菌或真菌污染,或试剂之间的交叉污染可能导致错误的结果。

4. 用聚酯树脂去离子的水可能使辣根过氧化物酶失活。

 

质量控制

为确保结果的有效性,每项试验应包括具有已知人完整FGF-21水平的适当对照。我们建议,除本试剂盒提供的检测试剂盒外,所有检测试剂盒还包括实验室自己的FGF-21对照。

 

性能特征

 

灵敏度(LoD)

通过比20次零标准品重复测定的平均值高2倍标准差的相应OD值测定的该人完整FGF-21 ELISA的灵敏度(低)为1.7 pg/mL。

 

高剂量“钩状”效应

该试验表明,高达20,000 pg/mL时无任何高剂量“钩状”效应。

 

精密度

通过在单次测定中测量3份供体EDTA血浆样本(重复测定16次),验证试验内精密度。

 

 

人完整FGF-

21值(pg/mL)

 

CV (%)

63.2

5.7

171

4.2

480

5.4

 

通过在12次单独试验中一式两份测定3份对照样品,验证试验间精密度。

 

人完整FGF-

21值(pg/mL)

 

CV (%)

69.8

6.9

181

3.0

486

1.9

 

线性

用0.01M PBS(pH 7.4)稀释2份人EDTA血浆样本并进行分析。以pg/mL为单位的结果如下:

 

#

 

稀释

 

观测值

 

预期值

 

回收率

%

 

1

 

纯品

 

286

 

 

 

1:2

138

143

96

 

1:4

75

72

104

 

1:8

37.9

36

105

 

1:16

19.5

18

108

2

纯品

61.8

 

1:2

32.1

30.9

104

 

1:4

15.9

15.5

103

 

1:8

7.2

7.7

94

 

加标回收率

向两份患者样本中加标不同量的人完整FGF-21(1 vol. + 1 vol.)。混合物)并测定。结果单位为ng/mL,如下所示:

 

 

#

 

初始值

 

加标量

 

观察值

 

预期值

 

恢复

%

1

45.9

91

64.9

68.5

95

 

(血清)

255

150

151

100

 

 

714

388

380

102

2

40.4

91

71.2

65.7

108

 

(血浆)

255

148

148

100

 

714

406

377

108

 

 

参考文献

  • Yie J等人FGF21 N端和C端在受体相互作用和活化中发挥不同的作用。FEBS Lett.2009 Jan 5;583:19-24.
  • Micanovic R等人N-和C-末端在FGF21功能活性中的不同作用。J Cell Physiol.2009 May;219(2):227-34.
  • Yusuke Murata等人FGF21作为脂质代谢的内分泌调节因子:从分子进化到生理学和病理生理学。营养与代谢杂志,2011年卷,文章ID 981315,8页

 

 

保修信息

 

Eagle Biosciences,Inc.保证其产品的操作或性能基本符合其随附包装说明书中规定的质量标准。本保证明确限于退还任何缺陷产品的价格或使用新产品替换任何缺陷产品。本保证仅适用于买方在产品有效期内向Eagle Biosciences发出书面通知的情况。此外,Eagle Biosciences没有义务因下列原因更换产品:a)买方疏忽、过失或误用,b)使用不当,c)储存和处理不当,d)故意损坏,或e)不可抗力、天灾或事故。

 

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人成纤维细胞集合


正常人类细胞和动物细胞

Lifeline®人类细胞包括:内皮细胞,上皮细胞,成纤维细胞,造血细胞,黑素细胞,平滑肌和间充质干细胞。所有Lifeline®正常人和动物(小鼠)细胞:

  • 当在生命线培养基中培养时,不需要暴露于抗微生物剂或酚红。不需要抗微生物剂和酚红,并且不推荐使用,以获得适的电池性能。这些补充剂可能导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能会对实验结果产生负面影响。
  • 支原体呈阴性,细菌和真菌生长呈阴性。
  • 通过PCR对HIV,HBV和HCB呈阴性。

原代细胞定义为已从组织中分离,铺在培养容器上,扩增,收获和冷冻保存的细胞。

二级细胞定义为在收获用于冷冻保存之前已在培养容器中分离,铺板和扩增两次的细胞。

 

人内皮细胞

人内皮细胞包括:主动脉,冠状动脉,肺动脉,髂动脉,HUVEC(人脐静脉),微血管,心脏微血管和肺微血管。

Lifeline®正常人内皮细胞为研究血管生成,癌症,伤口愈合,动脉粥样硬化,炎症或血管生物学提供了理想的细胞系统。另外,这些细胞系也可用于药物开发或筛选。

Lifeline®人体内皮细胞在Lifeline®VascuLife®培养基中培养时不会暴露于抗菌素或酚红,这是一个优点,因为这些补充剂可能导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能对实验结果产生负面影响。Lifeline®提供这些传统的补品; 但是,在大多数研究应用中,不需要或推荐它们来实现*的电池性能。

人内皮细胞系统

未暴露于人VEGF

Lifeline®正常人内皮细胞在称为VascuLife一个专门的内皮细胞培养基中分离® ENGS中,以确保它们保持不暴露于重组人VEGF。该特化培养基提供具有或不具有VEGF的低血清(2%)环境,其在至少15次群体倍增期间以等于或大于血清补充培养基的速率产生宜内皮细胞生长。

 

Lifeline®人脐静脉内皮细胞(HUVEC)冷冻保存为原代细胞*和我们的HUVEC 10供体库,人主动脉(HAoEC),人肺动脉(HPAEC),人髂动脉(HIAEC),人冠状动脉(HCAEC)和人类心脏微血管内皮细胞作为二级*或三级细胞冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和电镀效率。生命线还提供了人皮肤微血管内皮细胞(HDMVECn)和肺微血管细胞,可以是在VascuLife宜培养® ENGS-MV或VascuLife ® VEGF-MV介质,它们都含有5%人血清。

保证一致性和可重复结果的质量测试

Lifeline Cell Technology使用的原材料生产产品,并在每次生产过程中都包含广泛的质量保证。准确程序可确保一致的性能。

人成纤维细胞

人成纤维细胞包括:膀胱,心脏,皮肤,肺气道,牙龈,子宫和输精管。

Lifeline®正常人成纤维细胞提供理想的细胞系统,用于研究各种器官(包括皮肤,肺,膀胱和生殖系统)的伤口愈合,毒理学,癌症或基本细胞生物学。我们的正常人成纤维细胞也可用于药物筛选,药物开发和基因组编辑应用。此外,我们的成纤维细胞系是建立人胚胎干细胞(ESCs),诱导多能干细胞(iPSCs)和其他需要饲养层的细胞培养应用的无血清人饲养层的理想选择。

将人成纤维细胞(成人或新生儿)和无Xeno人成纤维细胞冷冻保存为原代细胞。
将人类心脏,肺,子宫,输精管和膀胱成纤维细胞冷冻保存为二次细胞,以确保zui高的纯度,活力和平板效率。

 

正常人类输精管成纤维细胞

Normal Human Vas Deferens Fibroblasts

 

FC-0052

产品描述

生命线®输精管成纤维细胞,在FibroLife生长时® S2培养基,对于男性生殖生物学研究提供在体外模型中的优异。Vas Defens成纤维细胞可用作癌细胞研究的正常对照,也是以下研究的理想选择:

  • 雄激素受体
  • 生殖细胞形态发生
  • 输精管纤维化
  • 其他男性泌尿生殖系统疾病状态包括男性不育症
  • 毒性和药物发现

将输精管成纤维细胞在培养容器中铺板并扩增两次,然后收获用于冷冻保存,以确保zui高的活力和平板效率。输精管成纤维细胞是在FibroLife培养® S2平台。

生命线®细胞不需要被暴露于的抗微生物剂或酚红培养时在生命线®培养基。这是一个优点,因为这些补充剂可能导致细胞压力和“掩蔽效应”,可能会对实验结果产生负面影响。

每瓶500,000个细胞

对人类输精管成纤维细胞进行测试:

  • 扩散:各种密度的人口增长
  • 细胞活力:从冷冻保存中解冻时为70%或更高
  • 形态学:15次群体倍增的正常细胞外观
  • 无菌检测:支原体阴性。对细菌和真菌生长有负面影响。
  • 病毒检测:PCR检测HIV-1,HIV-2,HBV和HCV阴性

 

 

 

Normal Human Lung Fibroblasts, Primary

 FC-0049

正常人肺成纤维细胞,原发性

产品描述

Lifeline®正常人原代肺成纤维细胞提供理想的细胞系统:

  • 研究伤口愈合,毒理学,癌症或基本细胞生物学。
  • 用于药物筛选,药物开发和基因组编辑应用。
  • 建立人胚胎干细胞(ESCs),诱导多能干细胞(iPSCs)和其他需要饲养层的细胞培养应用的无血清人饲养层。

生命线®人肺成纤维细胞已在培养容器中作为原代细胞进行分离,铺板和扩增,然后进行冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和平板效率。

我们的肺成纤维细胞的质量FibroLife测试® S2或FibroLife ®无异物中,并证明在价格等于或高于传统的含血清培养基更大的*生长。对成纤维细胞进行测试:

  • 增殖和形态:正常细胞外观至少15次群体倍增。
  • 细胞活力:从冷冻保存中解冻时,活力至少达70%
  • 无菌检测:支原体阴性。对细菌和真菌生长有负面影响。
  • 病毒检测:PCR检测HIV-1,HIV-2,HBV和HCV阴性

生命线®   人肺成纤维不需要被暴露于的抗微生物剂或酚红时在FibroLife培养®介质中,由于这些补充的优点可能会导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能产生负面影响的实验结果。

每瓶500,000个细胞

 

人类成纤维细胞 – 新生儿,无异种,原发性

 

Human Dermal Fibroblasts – Neonatal, Xeno-Free, Primary

 

 

FC-0037

产品描述

生命线®正常人皮肤成纤维细胞,新生儿,无异物(HDFN-XF),在FibroLife生长时®无异物*培养基,提供了理想的无异物培养体系,建立了人类多能干细胞在无异物人类饲养层培养或作为研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学的模型。

人类皮肤成纤维细胞 – 新生儿,第2代,接种后5天,2000细胞/ cm2(100X)

人成纤维细胞 – 新生儿,原发性

 

Human Dermal Fibroblasts – Neonatal, Primary

 

 

FC-0001

产品描述

生命线®正常人皮肤成纤维细胞 – 新生儿(HDFn)提供理想的细胞系统,为人类胚胎干细胞培养物建立无血清人类饲养层,或作为研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学的模型。

生命线®  成纤维细胞-新生儿从新生的人包皮和冷冻保存的原代细胞中分离,以确保zui高的生存能力和电镀效率。

  • 我们的皮肤成纤维细胞在FibroLife®S2或FibroLife无异种培养基中进行了质量测试,以确保在至少15次群体倍增期间适当的生长和形态。
  • 在两个测试FibroLifeLifeline®成纤维细胞®无血清培养基和FibroLife ® S2中显示的速率等于或大于传统的血清的培养基更大*生长。

每瓶500,000个细胞

Lifeline®成纤维细胞 – 新生儿在适当的生命线FibroLife®培养基中培养时不会接触抗生素或酚红,这是一个优点,因为这些补充剂可能导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能对实验结果产生负面影响。

皮肤成纤维细胞的质量测试:

  • 细胞活力:从冷冻保存中解冻时,活力至少达70%
  • 无菌检测:支原体阴性。对细菌和真菌生长有负面影响。
  • 病毒检测:PCR检测HIV-1,HIV-2,HBV和HCV阴性

正常人成纤维细胞 – 成人,原发性

 

Normal Human Dermal Fibroblasts — Adult, Primary

 

 

FC-0024

产品描述

生命线®正常人体皮肤成纤维细胞-成人(型hdfA)提供理想的电池系统建立的无血清人饲养层用于人胚胎干细胞培养物或作为模型来研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学。

生命线®  成纤维细胞冷冻保存作为初级细胞,以确保zui高的生存能力和电镀效率。

在这两个FibroLife我们的成纤维细胞的质量检验®无血清培养基和FibroLife ® S2中,以确保:

  • 以等于或大于经典血清补充培养基的速率的*生长
  • 在至少15次群体倍增期间适当的生长和形态。

每瓶500,000个细胞

当在适当的Lifeline®FibroLife®培养基中培养时,成人成纤维细胞不会暴露于抗微生物剂或酚红,这是一个优点,因为这些补充剂可能导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能对实验结果产生负面影响。

皮肤成纤维细胞的质量测试:

  • 细胞活力:从冷冻保存中解冻时,活力至少达70%
  • 无菌检测:支原体阴性。对细菌和真菌生长有负面影响。
  • 病毒检测:PCR检测HIV-1,HIV-2,HBV和HCV阴性

 

正常人子宫成纤维细胞

Normal Human Uterine Fibroblasts

 

FC-0076

生殖

Lifeline®提供男性和女性生殖细胞。

Lifeline®雄性生殖细胞,在Lifeline®品牌培养基中生长,为男性生殖生物学研究提供了出色的体外模型。Lifeline®雄性生殖细胞系统可用作癌细胞研究的正常对照,是研究雄激素受体和前列腺细胞增殖,生殖细胞形态发生研究以及毒性和药物发现研究的理想选择。

Lifeline®正常人类子宫细胞,在Lifeline®品牌培养基中生长,为子宫收缩和放松研究,子宫癌研究,一般子宫生物学研究以及对雌激素,黄ti酮,松弛素,催产素和其他雌性的特异性反应提供理想的体外模型。生殖激素。

 

产品描述

生命线®正常人子宫成纤维细胞,在FibroLife生长时® S2中,子宫的收缩和舒张的研究,子宫癌的研究,通用子宫生物学研究和雌激素,孕激素,松弛素,催产素等女性特定响应提供了理想的体外模型生殖激素。

生命线®人类子宫成纤维细胞在培养容器中进行了两次电镀和扩增,然后进行冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和电镀效率。我们的子宫成纤维细胞是在质量测试FibroLife ® S2或FibroLife ®异种免TM培养基,并证明在速率等于或大于传统的血清补充培养基更大*生长。

  • 这些培养基在至少15次群体倍增期间支持细胞的生长。

生命线®  子宫成纤维细胞不需要被暴露于的抗微生物剂或酚红时在FibroLife培养®平台。长期以来在文献中已经确定酚红在细胞培养基中充当弱雌激素并且可以刺激雌激素受体。这可能导致掩蔽效应,可能对人类女性生殖细胞的研究产生负面影响。

每瓶500,000个细胞

测试子宫成纤维细胞:

  • 增殖和形态学:15次群体倍增的正常细胞外观
  • 细胞活力:当从冷冻保存中解冻时,> = 70%的活力
  • 不育:支原体阴性细菌和真菌生长阴性
  • 病毒:通过PCR对HIV-1,HIV-2,HBV和HCV呈阴性

 

正常人膀胱成纤维细胞

FC-0050

产品描述

生命线®正常人膀胱成纤维细胞提供了理想的细胞系统建立的无血清人饲养层用于人胚胎干细胞培养物或作为模型来研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学。

生命线®人膀​​胱成纤维细胞从人膀胱中分离出来。将细胞分离,铺板并在培养容器中扩增两次,然后收获用于冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和平板效率。

我们的膀胱成纤维细胞质量FibroLife测试® S2或FibroLife ®无异物中,并证明在价格等于或高于传统的含血清培养基更大的*生长:

  • 在至少15次群体倍增期间测试Lifeline®膀胱成纤维细胞的适当生长和形态。

正常人膀胱成纤维细胞

FC-0050

产品描述

生命线®正常人膀胱成纤维细胞提供了理想的细胞系统建立的无血清人饲养层用于人胚胎干细胞培养物或作为模型来研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学。

生命线®人膀​​胱成纤维细胞从人膀胱中分离出来。将细胞分离,铺板并在培养容器中扩增两次,然后收获用于冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和平板效率。

我们的膀胱成纤维细胞质量FibroLife测试® S2或FibroLife ®无异物中,并证明在价格等于或高于传统的含血清培养基更大的*生长:

  • 在至少15次群体倍增期间测试Lifeline®膀胱成纤维细胞的适当生长和形态。

在FibroLife S2培养基中生长的人膀胱成纤维细胞,(100X)

膀胱成纤维细胞可以在无血清,无酚红,和不含抗微生物条件下生长培养时在FibroLife ®无血清培养基。

生命线®  膀胱成纤维细胞不需要被暴露于的抗微生物剂或酚红时在FibroLife培养®介质中,由于这些补充的优点可能会导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能产生负面影响的实验结果。

每瓶500,000个细胞  

 

 

在FibroLife S2培养基中生长的人膀胱成纤维细胞,(100X)

膀胱成纤维细胞可以在无血清,无酚红,和不含抗微生物条件下生长培养时在FibroLife ®无血清培养基。

生命线®  膀胱成纤维细胞不需要被暴露于的抗微生物剂或酚红时在FibroLife培养®介质中,由于这些补充的优点可能会导致细胞应激和“掩蔽效应”,可能产生负面影响的实验结果。

每瓶500,000个细胞  

产品规格表

 

 

 

正常人心脏成纤维细胞

 Normal Human Cardiac Fibroblasts

 

FC-0060

产品描述

Lifeline®正常人类心脏成纤维细胞提供理想的细胞系统,用于为人类胚胎干细胞培养物建立无血清人类饲养层,或作为研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学的模型。

Lifeline®心脏成纤维细胞已经在培养皿中分离,铺板和扩增两次,然后进行冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和电镀效率。

我们的成纤维细胞在FibroLife®S2或FibroLife®无Xeno培养基中进行了质量测试,以确保在至少15次群体倍增期间适当的生长和形态。

当在Lifeline®FibroLife®培养基中培养时,我们的心脏成纤维细胞不会接触抗生素或酚红。生命线提供抗微生物剂和酚红,但它们不是真核细胞增殖所必需的。为方便起见,购买了一瓶庆大霉素和两性霉素B(GA; LS-1104),购买了FibroLife®S2(LL-0011)中等完整试剂盒。建议使用GA来抑制真核细胞培养物中潜在的真菌或细菌污染。可以购买苯酚红(LS-1009),但不是必需的。

 

人牙龈成纤维细胞

FC-0095

Human Gingival Fibroblasts

 

产品描述

Lifeline®正常人牙龈成纤维细胞提供理想的细胞系统,用于为人类胚胎干细胞培养物建立无血清人类饲养层,或作为研究伤口愈合,毒理学或基本细胞生物学的模型。

这些成纤维细胞从人牙龈组织中分离。

  • 成纤维细胞已经在培养容器中分离,铺板和扩增两次,然后收获用于冷冻保存,以确保zui高的纯度,活力和平板效率。

我们的成纤维细胞在FibroLife®S2或FibroLife®无Xeno培养基中进行了质量测试,以确保在至少15次群体倍增期间适当的生长和形态。

当在FibroLife®无Xeno培养基中培养时,牙龈成纤维细胞可以在无Xeno条件下生长。

当在相应的Lifeline®培养基中培养时,Lifeline®成纤维细胞不暴露于抗微生物剂或酚红,这是有利的,因为这些补充剂可引起细胞应激和可能对实验结果产生负面影响的“掩蔽效应”。

 

 

 

货号

品名

规格

品牌

FC-0057

Normal Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0020

Normal Human Mesenchymal Stem Cells — Wharton’s Jelly

ea

lifelinecelltech

FC-0034

Human Mesenchymal Stem Cells — Adult

ea

lifelinecelltech

FC-0062

Normal Human Pre-Adipocyte Cells

ea

lifelinecelltech

HC-0023

Mouse Dendritic Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0091

Human Skeletal Muscle Satellite Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0014

Normal Human Aortic Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0032

Human Coronary Artery Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0058

Human Lung Microvascular Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0039

Dermal Microvascular Endothelial Cells – Adult

ea

lifelinecelltech

FC-0053

Cardiac Microvascular Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0042

Dermal Microvascular Endothelial Cells — Neonatal

ea

lifelinecelltech

FC-0055  

Normal Human Pulmonary Artery Endothelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0003

Normal Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC), Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0044

Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC) –10-Donor Pool

ea

lifelinecelltech

FC-0081

Fallopian Tube Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0083

Human Vaginal Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0078

Endometrial (Uterine) Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0080

Human Cervical Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0016

Normal Human Small Airway Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0035

Human Bronchial/Tracheal Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0054

Human Lobar Bronchial Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0079

Human Bladder Dome Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0040

Human Bladder Apex Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0029

Normal Human Corneal Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0094

Human Oral Keratinocytes (Gingiva)

ea

lifelinecelltech

FC-0007

Epidermal Keratinocytes — Neonatal, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0025

Epidermal Keratinocytes — Adult, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0064

Human Epidermal Keratinocytes, 10-Donor Pool

ea

lifelinecelltech

FC-0063

Normal Human Mammary Epithelial Cells — Male

ea

lifelinecelltech

FC-0065

Normal Human Mammary Epithelial Cells — Female

ea

lifelinecelltech

FC-0038

Normal Human Prostate Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0018

Human Renal Medullary Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0013

Renal Proximal Tubule Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0012

Human Renal Cortical Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0017

Normal Human Renal Mixed Epithelial Cells, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0048

Human Seminal Vesicle Epithelial Cells

ea

lifelinecelltech

FC-0060

Normal Human Cardiac Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0095

Human Gingival Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0050

Normal Human Bladder Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0037

Human Dermal Fibroblasts – Neonatal, Xeno-Free, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0001

Human Dermal Fibroblasts – Neonatal, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0024

Normal Human Dermal Fibroblasts — Adult, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0049

Normal Human Lung Fibroblasts, Primary

ea

lifelinecelltech

FC-0076

Normal Human Uterine Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

FC-0052

Normal Human Vas Deferens Fibroblasts

ea

lifelinecelltech

 

我们公司优势是强大的采购,

1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,

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7:我们还是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批发,欢迎合作。