ALSTEM逆转录病毒浓缩沉淀手册

 

ALSTEM是一家位于湾区的早期生物技术公司,拥有快速扩展的产品和服务组合,为生物制药和学术机构提供服务。受到加利福尼亚干细胞研究承诺的启发,ALSTEM于2012年由具有iPS细胞重编程和基因组编辑技术专业知识的科学家创立。

Retrovirus Precipitation Solution: #VC200

逆转录病毒沉淀解决方案:#VC200

描述

逆转录病毒沉淀溶液是为逆转录病毒颗粒沉淀而优化的聚合物混合物。它为浓缩逆转录病毒颗粒提供了一种简单,快速和的方法。在这个简单的方案中,您只需将逆转录病毒上清液与逆转录病毒沉淀溶液混合,孵育一小段时间,然后在标准离心机中旋转混合物。您可以将您的逆转录病毒滴度提高至4倍,并且无需超速离心即可获得的回收率。逆转录病毒沉淀解决方案是一种5x解决方案。

 

特征

  • 易于使用:简单混合
  • 不需要超速离心
  • 轻松扩展大容量
  • 浓度增加高达100倍
  • 经济有效的旋转方案,有效的病毒浓度
  • 无毒:对包括ES细胞在内的所有细胞系都是安全的

产品规格

产品名称

逆转录病毒沉淀解决方案

目录 #

VC200

尺寸

100毫升/ 250毫升/ 500毫升

运输

环境温度

储存和稳定性

储存在4°C。根据指示储存,本产品可稳定保存6个月

质量控制

每批逆转录病毒沉淀溶液都经过无菌试验和逆转录病毒颗粒的成功沉淀测试。

安全须知

对于含有BSL-2生物的所有材料,请遵循推荐的NIH指南。始终戴上手套,使用过滤的吸头并在生物安全罩下工作。

限制使用

仅供研究使用。不得用于诊断或治疗程序。

 

  • 概观

逆转录病毒沉淀溶液是优化用于逆转录病毒颗粒沉淀的聚合物混合物。它为浓缩逆转录病毒颗粒提供了一种简单,快速和的方法。在简单的方案中,您只需将逆转录病毒上清液与逆转录病毒沉淀溶液混合,孵育一小段时间,然后在标准离心机中旋转混合物。您可以将您的逆转录病毒滴度提高至4倍,并且无需超速离心即可获得的回收率。逆转录病毒沉淀解决方案是一种5x解决方案。

 

逆转录病毒浓缩沉淀手册

  • 程序

1.将含有逆转录病毒颗粒的培养基从平板转移到无菌容器中,并以300×g离心培养基10分钟以除去细胞碎片。

2.通过0.45μm过滤器过滤上清液。

3.将过滤的上清液转移到无菌容器中,并向每4体积含逆转录病毒的上清液中加入1体积的冷逆转录病毒沉淀溶液(4℃)。(实施例:5ml逆转录病毒沉淀溶液,含20ml病毒上清液)。

4.充分混合并冷藏3小时至过夜。与逆转录病毒沉淀溶液混合的含逆转录病毒的上清液在4°C下可稳定长达4天。

5.在4℃下以1500×g离心混合物30分钟。离心后,逆转录病毒颗粒可在容器底部显示为米色或白色颗粒。

6.丢弃上清液。通过以1500×g离心5分钟来旋转残留溶液。通过抽吸去除所有液体痕迹,小心不要打扰颗粒中沉淀的逆转录病毒颗粒。

7.使用冷的无菌PBS或DMEM在4℃下以1/10至1/100的原始体积重悬逆转录病毒颗粒。

8.在低温小瓶中分装并储存在-80°C直至准备使用。

 

货号

品名

规格

品牌

VB100

ViralBoost

1毫升

alstembio

VC100

慢病毒沉淀解决方案

100毫升/ 250毫升/ 500毫升

alstembio

V020

TransPlus™病毒转导增强剂

100μl/500μl

alstembio

CILV02

hTERT细胞永生化试剂盒

5 x20μl

alstembio

VC200

逆转录病毒沉淀解决方案

100毫升/ 250毫升/ 500毫升

alstembio

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

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逆转录试剂盒(含dsDNase)

逆转录试剂盒(含dsDNase)

¥650.00

货号:BL699A

规格:100T

品牌:Jinpan

产品简介:

本产品是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组 DNA 污染的反转录系统,5× RTMasterMix 为一管式反转录预混 Mix,含有反转录所需的多种试剂(HˉRTase、RNaseInhibitor、dNTP Mixture、Buffer),只需加入模板 RNA 引物和水即可进行反应。试剂盒采用的反转录酶去除了 RNase H活性,且热稳定性更强,可耐受 55℃反应,提高复杂RNA模板的反转录。MasterMix 中添加了热敏双链特异性核酸酶,可在反转录过程中直接降解去除 RNA样品中残留的基因组 DNA(gDNA)污染。Oligo dT & Random Primer 单管提供,如需使用特异性引物,可直接将其替换使用。


产品组成:

组分  100T

5× RT MasterMix  400 μl

20× Oligo dT & Random Primer  100 μl

RNase free H 2 O  2×1 ml

使用方法:

1、将模板 RNA 和试剂在冰上解冻,使用前将每种溶液轻弹或者轻微涡旋振荡混匀,

简短离心以收集残留在管壁的液体到管底。

2、在 RNase free 管中冰上配制以下反应体系:

组分  体积

Total RNA/mRNA  0.1-2 μg

5× RT MasterMix  4 μl

20× Oligo dT & Random Primer 或特异性引物  1 μl

RNase free H2O  补足 20 μl

3、移液器轻轻吹打混匀,放入 PCR仪运行如下程序

快速程序  标准程序

37℃,15~30min  25℃,10min

85℃,5min  55℃,30~60min

85℃,5min

通常可选择快速程序进行反转录反应;如果模板具有复杂二级结构或高 GC 区域,使用标

准程序。

4、得到的 cDNA 产物可立即用于 qPCR 反应,或在-20℃保存,并在半年内使用;长

期存放建议分装后在-80℃保存。cDNA应避免反复冻融。


注意事项:

1、避免 RNase污染。

2、为保证反转录成功建议使用高质量的 RNA 样品。

3、5×RT MasterMix 非常粘稠,易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请点甩离心,

并避免吸头外壁沾附损失。

4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存方法:

避免反复冻融,-20 ℃保存 1年。

货号 BL699A
规格 100T
品牌 Jinpan
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  • 逆转录试剂盒(含dsDNase)