proteinslides Maleimide surfaces说明书
Maleimide surfaces
马来酰亚胺表面
应用说明:
马来酰亚胺基团与巯基基团之间的共价连接是生物缀合化学中选择性,容易,方便的反应之一。现在,我们已经在ZeroBkg®表面上提供了这种喜爱的反应。
研究科学家,临床实验室和诊断试剂盒制造商的共同目标是,开发一种提供宜生物活性而不产生生物分子损失,移位或表面迁移的固相环境。一种可能的方法是在不使用任何特殊标签或化学修饰的情况下,轻松且共价固定蛋白质分子。这可以通过化学反应性基团马来酰亚胺朝蛋白质分子表面上可用的巯基(–SH)基团方便地实现。我们开发了基于零背景PEG涂层的马来酰亚胺表面,如图1所示。马来酰亚胺衍生化的表面与二硫键基团共价结合,该硫基基团在二硫键还原后或通过用特殊试剂引入SH基团对伯胺进行化学修饰后可用于生物分子中。PEG的功能性确保了特定分子与表面的结合仅通过在测定过程中与固定的蛋白质分子的特异性相互作用来解决,并且解决了常见的背景问题。
图1.零背景马来酰亚胺表面由反应性双键组成,束缚在高密度PEG涂层上。蛋白质分子通过表面–SH基团连接,但被PEG涂层排斥。多余的-SH基团可通过简单的洗涤步骤轻松停用。相同的固定化反应适用于肽,抗体和寡核苷酸。 | 图2.在马来酰亚胺-PEG /载玻片上制备的染料偶联的寡核苷酸(-SH)和抗体微阵列(手动点样)的荧光图像。每个斑点的直径约为500 um。 |
为了证明性能,我们在图2中显示了在Mal / PEG /载玻片上制备的巯基缀合的寡核苷酸微阵列(上图)和抗体微阵列(下图)。简而言之,将纳升的染料结合的寡核苷酸(30聚体)或含有10%甘油的抗体溶液的液滴沉积在载玻片上,并孵育30分钟。在室温下,用钝化缓冲液去除残留区域中的SH-基团30分钟。通过与cy3偶联的二抗孵育来检测表面上的固定抗体。载玻片在激光扫描仪上成像。重要的结果是由于PEG涂层而导致的本底极低。Mal / PEG涂层的载玻片是含有游离–SH基团的生物分子的理想选择。二硫键结合蛋白质中的两个半胱氨酸残基非常稳定,
这些涂层可在标准显微镜载玻片,盖玻片,硅片上使用。我们还为特定的客户样品提供客户涂层服务。我们的客户已成功地将Mal / PEG表面应用于各种应用,包括蛋白质传感器,蛋白质微阵列,单分子光谱,生物原子力显微镜和其他生物物理研究。