AbFluor® 555 标记鬼笔环肽(微丝橙红荧光探针)

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产品编号 C8004
英文名称 Phalloidin/AbFluor 555
中文名称 AbFluor® 555 标记鬼笔环肽(微丝橙红荧光探针)
别    名 AbFluor® 555-Phalloidin (Orange red);   鬼笔环肽AbFluor 555偶联物; 微丝荧光探针(橙红);
浓    度 1mg/ml
保存条件 -20℃避光干燥保存,有效期1年。
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 产品描述:
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品为AbFluor 555标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。

工作液配制:
本品为 20µM 储存液,总量为 300µL。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60 mL 的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量分装保存,-20℃避光冻存,一年稳定。
实验前,用 1×PBS稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM(1:100-250 倍稀释),工作液现配现用。最佳稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。

染色步骤:
1. 细胞爬片生长 24h,使其密度达到 50%汇合度。
2. 吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3. 使用4%甲醛PBS溶液进行细胞固定,室温固定 10min。
注:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
5. 室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
7. 取 200µl 配制好的 AbFluor 555 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30min(通常情况下,4℃~37℃ 孵育皆可)。
注:为了降低背景,可于 AbFluor 555 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8. 用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5min。
9. 用 200µl DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30s。
10. 用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。
注:也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9. 10。
11. 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,AbFluor 555(Ex/Em=555/565nm),DAPI(Ex/Em=364/454nm)。

注意事项:
1. 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量 LD50 约 2mg/kg)。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

AbFluor® 405 标记鬼笔环肽(微丝蓝色荧光探针)

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产品编号 C8005
英文名称 Phalloidin/AbFluor® 405
中文名称 AbFluor® 405 标记鬼笔环肽(微丝蓝色荧光探针)
别    名 AbFluor 405-Phalloidin (blue);   鬼笔环肽AbFluor 405偶联物; 微丝荧光探针(蓝色);
浓    度 1mg/ml
保存条件 -20℃避光干燥保存,有效期1年。
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 产品描述:
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品为AbFluor 405标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。

工作液配制:
本品为 20µM 储存液,总量为 300µL。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60 mL 的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量分装保存,-20℃避光冻存,一年稳定。
实验前,用 1×PBS稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM(1:100-250 倍稀释),工作液现配现用。最佳稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。

染色步骤:
1. 细胞爬片生长 24h,使其密度达到 50%汇合度。
2. 吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3. 使用4%甲醛PBS溶液进行细胞固定,室温固定 10min。
注:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
5. 室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
7. 取 200µl 配制好的 AbFluor 405 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30min(通常情况下,4℃~37℃ 孵育皆可)。
注:为了降低背景,可于 AbFluor 405 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8. 用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5min。
9. 用 200µl DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30s。
10. 用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。
注:也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9. 10。
11. 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,AbFluor 405(Ex/Em=402/421nm),DAPI(Ex/Em=364/454nm)。

注意事项:
1. 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量 LD50 约 2mg/kg)。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

AbFluor® 350 标记鬼笔环肽(微丝蓝色荧光探针)

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产品编号 C8006
英文名称 Phalloidin/AbFluor® 350
中文名称 AbFluor® 350 标记鬼笔环肽(微丝蓝色荧光探针)
别    名 AbFluor 350-Phalloidin (blue);   鬼笔环肽AbFluor 350偶联物; 微丝荧光探针(蓝色);
浓    度 1mg/ml
保存条件 -20℃避光干燥保存,有效期1年。
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 产品描述:
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品为AbFluor 350标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。

工作液配制:
本品为 20µM 储存液,总量为 300µL。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60 mL 的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量分装保存,-20℃避光冻存,一年稳定。
实验前,用 1×PBS稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM(1:100-250 倍稀释),工作液现配现用。最佳稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。

染色步骤:
1. 细胞爬片生长 24h,使其密度达到 50%汇合度。
2. 吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3. 使用4%甲醛PBS溶液进行细胞固定,室温固定 10min。
注:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
5. 室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
7. 取 200µl 配制好的 AbFluor 350 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30min(通常情况下,4℃~37℃ 孵育皆可)。
注:为了降低背景,可于 AbFluor 350 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8. 用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5min。
9. 用 200µl DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30s。
10. 用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。
注:也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9. 10。
11. 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,AbFluor 350(Ex/Em=346/422nm),DAPI(Ex/Em=364/454nm)。

注意事项:
1. 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量 LD50 约 2mg/kg)。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

AbFluor® 750 标记鬼笔环肽(微丝蓝色荧光探针)

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产品编号 C8007
英文名称 Phalloidin/AbFluor® 750
中文名称 AbFluor® 750 标记鬼笔环肽(微丝蓝色荧光探针)
别    名 AbFluor 750-Phalloidin (blue);   鬼笔环肽AbFluor 750偶联物; 微丝荧光探针(蓝色);
浓    度 1mg/ml
保存条件 -20℃避光干燥保存,有效期1年。
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 产品描述:
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
本品为AbFluor 750标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。

工作液配制:
本品为 20µM 储存液,总量为 300µL。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60 mL 的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量分装保存,-20℃避光冻存,一年稳定。
实验前,用 1×PBS稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM(1:100-250 倍稀释),工作液现配现用。最佳稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。

染色步骤:
1. 细胞爬片生长 24h,使其密度达到 50%汇合度。
2. 吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3. 使用4%甲醛PBS溶液进行细胞固定,室温固定 10min。
注:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
5. 室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6. 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
7. 取 200µl 配制好的 AbFluor 750 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30min(通常情况下,4℃~37℃ 孵育皆可)。
注:为了降低背景,可于 AbFluor 750 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8. 用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5min。
9. 用 200µl DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30s。
10. 用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。
注:也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9. 10。
11. 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,AbFluor 750(Ex/Em=749/775nm),DAPI(Ex/Em=364/454nm)。

注意事项:
1. 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量 LD50 约 2mg/kg)。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

鬼笔环肽

上海金畔生物科技有限公司提供鬼笔环肽 ,欢迎访问官网了解更多产品信息。

  • 产品信息
  • 常见问题
产品编号 C71019
英文名称 Phalloidin from Amanita phalloides
中文名称 鬼笔环肽
别    名 EINECS 241-484-5; PHALLOIDIN; Phalloidine; 28-(2,3-dihydroxy-2-methylpropyl)-18-hydroxy-34-(1-hydroxyethyl)-23,31-dimethyl-12-thia-10,16,22,25,27,30,33,36-octaazapentacyclo[12.11.11.03,11;   毒伞素; 鬼笔鹅膏素; 鬼笔环肽 来源于鬼笔鹅膏;
鬼笔环肽
Specific References  (1)     |     C71019 has been referenced in 1 publications.
[IF=8.025] Guangxu Li. et al. The proteins derived from platelet-rich plasma improve the endothelialization and vascularization of small diameter vascular grafts. INT J BIOL MACROMOL. 2022 Nov;:  
PubMed:36395946

保存条件 Store at -20 °C.
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 Phalloidin is a mushroom-derived toxin which can be used to label F-actin of the cytoskeleton with fluorochrome.
Phalloidin belongs to a class of toxins called phallotoxins, which are found in the death cap mushroom (Amanita phalloides). It is a rigid bicyclic heptapeptide that is lethal after a few days when injected into the bloodstream. The major symptom of phalloidin poisoning is acute hunger due to the destruction of liver cells.

基本信息:
CAS:17466-45-4
分子式:C35H48N8O11S
分子量:788.868
MDL:MFCD03427567
纯度:≥90%
外观/性状:白色粉末
溶解性:溶于无水甲醇,DMSO或无水乙醇。
用途:鬼笔环肽是从毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中得到的有毒环状七肽,它的作用与细胞松弛素B恰好相反,只与聚合的微丝结合,而不与肌动蛋白单体分子结合。鬼笔环肽通过与聚合的微丝结合,抑制了微丝的解体,破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡。用FITC和Rhodamin等荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-actin结合,从而显示微丝骨架在细胞中的分布。

产品特点:
(1)亲和力高:Kd= 20 nM;
(2)特异性强:选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合;
(2)优于抗体染色:鬼笔环肽无物种限制,且几乎不存在非特异性染色,染色区和非染色区域对比性极其明显;

(4)灵敏度高:纳摩尔浓度(nM)染色即可满足实验要求;
(5)兼容性好,肌动蛋白活力不受影响:鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Da,标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持;
(6)适用范围广:无物种差异性;同样适用于甲醛固定和打孔处理后的组织样本。

配制方法:
0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇(也可用DMSO或无水乙醇溶解)配成贮存液,可在-20度避光的条件下长期保存,工作液的浓度为5ug/ml,由贮存液加PBS稀释20倍即可。

染色程序:
PBS清洗细胞2次,每次10分钟;3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分钟,PBS清洗细胞2次;加入5ug/ml的FITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间可以短一些,PBS清洗细胞2次;DAPI或hoechst33258染细胞核10分钟,PBS清洗细胞2次;吸去多余水分,加荧光封片液(中性或偏碱性缓冲液加等量甘油),盖上盖玻片,荧光或共聚焦显微镜下观察。

1、抗体溶解方法
2、抗体修复方式
3、常用试剂的配制
4、免疫组化操作步骤
5、免疫组化问题解答
6、Western Blotting 操作步骤
7、Western Blotting 问题解答
8、关于肽链的设计
9、多肽的溶解与保存
10、酶标抗体效价测定程序