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Cell Technology Fluoro ACHE 说明书

发表于由

世界*实验材料供应商 Cell Technology上海金畔生物为其中国代理， Cell Technology在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， Cell Technology就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Cell Technology公司是一家私有公司，公司致力为广大客户提供的生物检测产品和服务。Cell Technology的员工是公司zui重要的竞争优势。Cell Technology有助于我们产品的公司的不妥协的质量承诺以确保每个产品的搞品质。Cell Technology员工和技术的的多样性使得我们能以*的工艺解决当今复杂的商业挑战。

Cell Technology主要产品包括抗体和试剂，同时提供代谢试验，双传感器的检测，荧光酶检测，氧化应激检测的产品及服务。

 

Fluoro AChE

Fluorescent Acteylcholinesterase (AChE) Detection Kit – Detection of AChE in RBC, Saliva, and Tissue Lysates

荧光乙酰胆碱酯酶（AChE）检测试剂盒 – 检测红细胞，唾液和组织裂解液中的乙酰胆碱酯酶

产品代码：ACHE100

 

产品描述

介绍

接触化学神经制剂，农药和某些药物（麻醉剂，KKY和治疗药物）会降低红细胞（RBC）乙酰胆碱酯酶（AChE）的活性。RBC-AChE可以作为一种生物标记物来监测外周和中枢神经系统中AChE功能的抑制和增加（9）。乙酰胆碱酯酶（AChE）是参与神经传递的zui重要的酶之一。该酶结合可兴奋组织（突触连接，内质网等）的细胞膜1-3。由于神经毒气和一类重要的农药对AChE的抑制，对人类和动物的急性毒性一直是一个深入的科学研究领域4,5。AChE抑制剂在临床上也被用作阿尔茨海默病的治疗药物（如他克林（四氢氨基吖啶））6，并且是各种疾病过程和治疗策略越来越受关注的对象7,8。然而，AChE抑制剂的环境检测和作为药物的AChE酶活性调节剂的开发已经由于当前测定方法的困难和复杂性而受到阻碍。

主要优点

  • 非放射性测定可以监测多个时间点以遵循动力学。
  • 一步，没有洗涤检测。
  • 多功能：可检测红细胞，唾液和组织裂解液中的AChE活性。
  • 读数 – 96孔荧光读板器。

测定原理

我们开发了一种高度敏感，非常快速，非常简单的测定方法，以测定红细胞中的乙酰胆碱酯酶活性，使用天然底物乙酰胆碱。另外，通过使用特异性抑制剂，该试剂盒可用于检测各种样品中的AChE活性。一系列偶联的酶反应迅速将活性AChE的存在转化为淬灭检测试剂的荧光变化。

AChE + ATP + H20 +偶联酶反应+淬灭染料→荧光

染料（例如：530-570nm

EM：590-600nm

时间= 10分钟 稀释 使用的卷 ug蛋白/孔 RFU *
RBC 1：1000 10uL 五 3450
RBC没有Ach 1：1000 10uL 五 152
大鼠脑 1：500 10uL 20 5864
大脑没有Ach 1：500 10uL 20 296
唾液 整齐 10uL ND 925
唾液没有 整齐 10uL ND 772
RBC-AChE mU / mL RFU SD RFU
167.000 9999 0.00
41.750 6375 121.70
10.438 1659 9.00
2.609 590 9.81
0.652 256 7.23
0.163 222 8.72
0 186 8.08

 

 

Fluoro AChE检测试剂盒

发表于由

货号 品名 规格 2017年价格
AChE 100-2 Fluoro AChE – 100 tests 100 Tests 7225

产品描述：

保存温度：2-8度

主要优点：

  • 无需放射性物质。
  • 应用 – 流式细胞仪或荧光显微镜。
  • 检测细胞水平的细胞溶解活性。
  • 适用于多种类型的哺乳动物细胞系。

技术

测量CMC / ADCCzui常用的方法是放射性铬-51（51Cr）释放试验（2）。该测定有几个缺点：昂贵的，难以加载某些细胞类型，由于严格的环境规定而处置昂贵，并且具有51Cr自发释放的高背景。使用流式细胞仪，现在可以消除对放射性物质的需要，并增加在单个细胞基底上定量细胞溶解活性的能力。各组已经证明通过流式细胞术测量CMC / ADCC活性与传统的51Cr释放测定（3,4,5,6）具有强烈（95％）的相关性。

测定原理

细胞跟踪染料CFSE（7,8,9）用于标记靶细胞群体。在测定完成实验方案后，加入7AAD（活/死）（10,11）以测量细胞死亡。7AAD仅进入膜受损细胞并与DNA结合。

流式细胞术用于门靶细胞并测量7AAD阴性对7AAD后细胞。％细胞毒性通过以下等式计算（参见下面的实验例）：

7AAD正（右上象限）= R1 / 7AAD Postitve（右上象限）= R1 + 7AAD负（右下象限）= R2 ×100 
ACT1

为了测试猪gd淋巴细胞的自然杀伤能力，将K562细胞染色并调整至含有10％FBS的1×10 4个细胞/100μlPRMI的终浓度。以25:1,50:1和100:1的E / T比加入gd淋巴细胞，调节至400μlRPMI的总体积，然后在37℃，无菌封盖的面管中孵育4小时。孵育后，将活/死染色剂直接加入每个管中，在冰上孵育15分钟并通过流式细胞术分析。

引用文献

  • a. Perussia, B., (1998). Current Topics in Microbiology and Immunology 230, p63.
    b. Whiteside, T.L., Rinaldo, C.R. and Herberman, R.B. (1992) Cytolytic Cellfunctions. In: N.R. Rose, E.C. de Macario (Eds.), Manual of Clinical Laboratory Immunology. American Society for Microbiology. Washington, DC, p. 220.
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  • Goldberg, J.E., Sherwood, S.W., Clayberger, C., (1999). A Novel Method for Measuring CTL and NK Cell-mediated Cytotoxicity Using Annexin V and Two-color Flow Cytometry. Journal of Immunology. Methods 224, 1.
  • Hatam, L,. Schuval, S., Bonagura, V.R., (1994). Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Function as a Clinical Assay. Cytometry 16,59.
  • L.S De Clerck et al.,J. Immunol. Meth. 172, 115 (1994).
  • M. Bronner-Fraser,J. Cell Biol. 101, 610 (1985).
  • Rabinovitch, P.S., et al., J. Immunol. 136, 2769 (1986).
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  • Olin, MR. Lee, J. Choi, K, and Molitor, Tw. gd T-lymphocyte Cytotoxic Activity against Mycobaterium bovis Analysed by Flow Cytometry: Journal of Immunological Methods; Publication in process.
  • Olin, MR. Thesis, K. Cho, J. and Molitor, T.W. Morphine Suppresses Microglial Directed Cytolytic Activity by gd Lymphocytes. Journal of Neuroimmunology; Publication in process.
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