上海金畔生物biodatacorp 101162说明书

 

 

 

 

上海金畔生物biodatacorp 101241说明书

 

 

 

biodatacorp 105997说明书

UPTT™ 试剂

 

部分凝血活酶时间测定试剂（非活化）

内源性血浆凝固的接触激活

货号：105997

产品描述

UPTT 试剂是缓冲兔脑磷脂的冻干制剂，标准化磷脂浓度≤0.1%。UPTT 试剂不含活化化合物。

预期用途

UPTT 试剂预期用于进行（非活化）体外部分凝血活酶时间 (PTT) 试验。本试验检测了器械或浸提液对贫血小板或无血小板血浆 1,2 或某些血浆凝血因子缺乏的内源性凝血途径的激活作用。1,2,3,4

 

原理

全血暴露于异物后，在不存在 Ca + + 的情况下发生接触活化。4,5,6 UPTT 通过检测血凝块形成时间，测量通过内源性途径参与血浆凝血活酶生成的血浆因子。7.8

 

应一式三份运行试验。将暴露于试验器械后的结果与未处理血浆和阴性对照进行比较。

 

注意事项

UPTT 试剂不用于人类或动物诊断试验或程序。

 

在整个试剂制备、样本采集、样本制备和分析过程中遵守标准预防措施。9

 

根据实验室政策处置锐器和生物废物。

 

提供的材料

UPTT 试剂 20 x 3.0 mL

 

试剂储存

冻干 UPTT 试剂-在 2-8 ℃ 下储存，直至失效日期。复溶 UPTT 试剂在 2-8 ℃ 下储存于密封的原始容器中时，可稳定 7 天。

 

需要但未提供的材料

1. 纯化水，pH 5.3-7.2（蒸馏、去离子或试剂级）

2. 移液器（10.0、3.0 和 0.1 mL 容量）。

3. 氯化钙，0.025 M (C/N 100989)

4. 柠檬酸钠，0.11M (C/N 100994)

5. 凝血质控血浆

 

复溶

复溶前将小瓶加热至室温。

1. 轻敲小瓶，去除粘附在胶塞上的材料

2. 取下铝密封件

3. 取下瓶塞，用 3.0 mL 纯化水复溶小瓶内容物。

4. 更换塞子，倒置小瓶，充分混合内容物。使用前静置至少 15 min，以确保内容物*再水化。

复溶后，UPTT 在 2-8 ℃ 下于密封的原始容器中储存时可稳定 7 天。

试验血浆的采集和制备

用于 UPTT 的供试样本必须是采用抗凝全血制备的无血小板或贫血小板血浆。2、11、12

标本采集

应小心采血。一旦采血装置中可见血液，松开止血带。避免停滞、溶血、组织液污染或接触玻璃。

真空标本采集管技术（推荐）12

1. 使用获批用于实验室标本的带翼针采集装置

2. 将血液采集至含有 0.11M 枸橼酸钠抗凝剂的塑料真空标本采集管中

部分凝血活酶时间测定试剂（非活化）

内源性血浆凝固的接触激活

105997

3. 轻轻颠倒试管 4-5 次，混匀标本

 

注：验证使用的抗凝剂类型和浓度。颜色顶部不随柠檬酸盐浓度的不同而变化。

 

注射器技术（替代程序）13

1. 使用获批用于实验室标本的带翼针采集装置

2. 用塑料注射器抽取 9.0 mL 血液。避免过度抽吸。

3. 从收集装置中取出针头

4. 立即轻轻将血液分配至聚丙烯管中，该管含有 1.0 mL 0.11M 柠檬酸钠（血液与抗凝剂比例为 9:1）

5. 盖上管盖，轻轻颠倒 4-5 次，混匀。

6. 试验前，将样品在室温下多保存两小时。

 

样品制备

 

血小板功能离心机

1. 将样本放入 PDQ

2. 选择 PFP 设置

3. 按下开始

 

台式离心机：贫血小板血浆制备 12,14,15,16

1. 将标本放入离心机

2. 以 2500 xg 离心标本 15 min。

 

收获样品

1. 使用塑料移液管

2. 小心移除贫血小板血浆；不得干扰血沉棕黄层。

3. 将样本转移至塑料管和盖上

4. 检测前，样品可在 (15-28 °C) 下储存多 2 小时

 

• 应根据实验室政策使用丢弃管。

• 根据标本的红细胞压积，调整标本体积，使血液抗凝剂比例为 9:1。红细胞压积需要调整

<30% or >55%.7,12,17

• 在操作过程中的任何时间点，请勿将全血标本或供试品暴露于玻璃容器中。14,16

• 请勿对可见溶血、黄疸或脂血样本进行 UPTT。12

测试程序仪器

部分凝血活酶时间终点可通过手动凝血方法和大多数凝血分析仪检测。分析仪试验方法与用于进行活化部分凝血活酶时间试验 (aPTT) 的方法相同。按照生产商说明进行试验。必须使用实验室建立的 UPTT 参考范围。10

 

• 所有试验均应重复进行三次。

• 间接接触血液的器械需要 1.0 g 样品。

• 直接接触血液的器械需要 2.5g 的样品。

• 必须精确控制待评价器械与试验血浆接触的时间。

 

手册

1. 移取 0.1 mL 供试或对照血浆至试验比色皿中，并在 37 ℃ 下孵育血浆 2 min。

2. 在 37 ℃ 下预孵育 0.025 M 氯化钙。

3. 移取 0.1 mL UPTT 试剂，置于含有血浆的试验比色皿中。

4. 将血浆/试剂混合物在 37 ℃ 下孵育 2 至 5 min，或按照方案规定进行孵育。

5. 加入 0.1 mL 预孵育的氯化钙，同时启动计时器。

6. 记录凝血时间

 

• 所有试验均应重复进行三次

• 间接接触血液的器械需要 1.0 g 样品

• 直接接触血液的器械需要 2.5g 的样品

• 必须精确控制待评价器械与试验血浆接触的时间

 

质量控制

实验室应遵循普遍接受的质量控制规范。应在检测的每一天运行质控品。

 

1. 每个供试器械样品必须使用两个水平的阴性对照。

2. 每个供试器械样品必须运行一个阳性对照

 

如果使用凝血分析仪进行 UPTT，则必须遵循制造商关于正确操作、质量控制和维护的说明。

 

各实验室应根据确立的实验室程序，通过进行重复研究来确定每批 UPTT 试剂和质控血浆的验收限值。与活化部分凝血活酶时间 (APTT) 结果以与本人所用相同的方式运行比较。

 

每个实验室必须确定每批 UPTT 试剂和质控血浆的参考范围和验收限值。当 UPTT 试剂批号改变时，需要进行 10 次交叉研究。

 

准确度、精密度和重现性

 

正常血浆和质控品水平 1、2 和 3 的 CV 应小于 5%。

 

UPTT 检测结果的精密度和准确度可能受到许多因素的影响。显著的方案和实验室间差异来自用于测量凝血终点的凝血系统的数量。5,15 可能影响检测结果的实验室内变量包括用于试剂复溶的纯化水的 pH 值、移液技术、孵育时间和温度、试剂污染或试剂批号变化。定期进行的 18,19 次定期质量控制检测将有助于识别可能发生的任何变化并导致错误的检测结果。

 

结果

UPTT 试验结果应报告为凝血终点（秒）。应一式三份运行供试品和对照品，并在将其与实验室确立的参考范围进行比较之前对结果取平均值。14,16,17,22

 

结果中应包括 p 值，作为检验有效性的指标。

 

在统计学上比较未暴露血浆的平均结果与暴露于器械的血浆的结果。为了通过，器械统计必须具有≥0.05 的 p 值。

 

预期值

正常血浆：> 60 秒水平 1：> 60 秒

水平 2：> 90 秒

水平 3：> 120 秒

 

注：当在光电分析仪上使用正常质控品血浆进行测试时，UPTT 结果将大于 60 秒。接触激活将缩短该时间。由于分析仪和方案之间的操作差异，每个实验室必须建立 UPTT 的参考范围。实验方案、样品制备和终点检测方法可能会影响试验结果。

 

局限性

1. 溶血、黄疸或脂血血浆可能产生错误的检测结果。

a. 会影响检测结果的溶血、黄疸或脂血浓度取决于分析仪。17,21

2. 冷冻血浆样本可能导致错误的检测结果。

• 血液与抗凝剂的比例不正确可能导致虚假的检测结果。对于红细胞压积值高于 53% 的样本，添加到血液中的抗凝剂量必须成比例降低，对于红细胞压积值低于 25% 的样本，添加到血液中的抗凝剂量必须成比例增加。2,7

参考文献

1. ANSI/AAMI/ISO10993-4 医疗器械生物学评价-第 4 部分：与血液相互作用试验选择，可从美国国家标准协会 (ANSI) 获得，25 W. 43rd St.,4th Floor,New York,NY 10036，http://www.ansi。。ｏｒｇ.

2. ASTM 标准 ASTM F2382-04 (2010)“评估血管内医疗器械材料的部分凝血活酶时间 (PTT) 的标准试验方法”ASTM International,West Conshohock-en,PA,2003,DOI:10.1520/F2382-04R10，www.astm。。ｏｒｇ.

3. Braybrook JH，编辑，医疗器械和材料的生物相容性评估。J > Wiley&Sons.英国西苏塞克斯。1997 年

4. Vogler,EA 和 Siedlecki,CA.接触激活血浆凝固。生物材料。30 (10) :1857–1869.2009 年 4 月。

5. Poller L. aPTT 检测的标准化。当前状态，Scand JHaematol.25 [增刊 37] :49,1980.

6. Gad,MC.药品和医疗器械的安全性评价：监管指南。DOI:10,3007/978-1-4419-7449-5. Springer Science and Business Media.纽约州纽约市。2010 年

7. 危害，DM。版本。临床血液学和止血基础。第 3 版。第 542 页。F. A. Davis and Company,Philadelphia.1997 年。

• Mannucci PM：部分凝血活酶时间试剂检测轻度血友病患者的多中心评价。在 Triplett DA 中，凝血试验标准化：概述。美国病理学家学会，Skokie,IL 1982。

9. 临床和实验室标准协会 (CLSI)。临床实验室安全性；批准指南

-第三版。CLSI 文件 GP17-A3 (ISBN 1-56238-797-9)。临床实验室标准化研究所，950 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2012

10. Moffat,KA 等人1. 对血小板计数正常或减少的样本进行光传输血小板聚集试验的参考区间确定方法的评价。血栓栓塞。2008 年 7 月；100 (1) :134-45。

11. ANSI/AAMI/ISO10993-12:2009 医疗器械生物学评价。第 12 部分：样品制备与参照样品。ASTM International,West Conshohocken,PA,

12. 临床实验室标准化协会 (CLSI)。用于检测基于血浆的凝血试验和分子止血试验的血液标本的采集、运输和处理；批准指南-第 5 版。CLSI 文件 H21-A5 (ISBN1-5238-657-3)。临床和实验室标准协会。940 West Valley Road,Suite 1400.韦恩。宾夕法尼亚州 19087-1898 美国，2008 年。

13. Hougie C：凝血的生物化学。In Triplett DA:Laboratory Evaluation of Coagula-tion,Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

14. Langdell,RD,Wagner,RH 和 Brinkhous,KW。部分凝血活酶时间的测定。第 103 页。在托坎廷斯 LM 和 Kazal LA。编辑。血液凝固。Grune and Stratton,NY.1964 年

15. Sabo MG：凝血仪器和试剂系统。In Triplett DA:Laboratory Evaluation Of Coagulation,pg 3. Society Of Clinical Pathologists Press,Chicago,1982.

16. Triplett DA,Harms CS:Procedures For The Coagulation Laboratory,pg 7,Chicago,1981.

17. Harker LA：止血手册。F.A. Davis Company,pg 62,Philadelphia,1974.

18. Westgard JO,Barry PL,Hunt MR,Groth T:A Multi-Rule Shewhart Chart For Quality Control 493-501,1981.

19. 临床实验室标准化协会 (CLSI)。当熟练度测试不可用时的实验室测试评估；批准指南-第二版。CLSI 文件 GP29-A2（ISBN 1-

56238-673-5）。临床实验室标准化研究所，940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2008。

20. Ratnoff OD,Forbes CD eds:Disorders of Hemostasis.W.B. Saunders Co.第 2 版，费城，1991 年。

21. 临床实验室标准化协会 (CLSI)。溶血、黄疸和脂血/浊度指数作为临床实验室分析干扰指标；批准指南。CLSI 文件 C56-A. 临床和实验室标准化研究所，940 West Valley Road,Suite 1400,Wayne,Pennsylvania 19087-1898 USA,2012。

22. Westgard,JO 和 Hunt,MR。方法比较研究中常用统计检验的使用和解释。临床化学 19:49-57/1973。

 

 

产品可用性

注：提供定制批次。有关价格和交货，请咨询客户服务部。

 

本产品保证按照标签和 BIO/DATA CORPORATION 文献所述执行，BIO/DATA CORPORATION 不承担任何其他目的适销性或适用性的暗示保证，在任何情况下，BIO/DATA CORPORATION 均不对上述明示保证引起的任何间接损害负责。

 

 

 

UPTT™ 未激活的部分凝血活酶时间检测使用说明书

 

货号：105997

品名：UPTT™ 检测试剂

 

检测试剂基本信息

 

产品描述：

UPTT是标准化冻干兔脑脑磷脂（部分凝血活酶），磷脂浓度≤0.1％，可代替血小板提供凝血催化表面，是进行活化部分凝血酶时间测试的理想试剂。该试剂符合包括ASTM F2382-01,04,12，FDA蓝皮书备忘录E95-1和ISO 10993-4中规定的血液相容性评估要求。

 

 

用途：

生物相容性或对生命的影响是医疗或血管设施是否适合于体内使用的关键衡量指标，UPTT检测试剂用于体外测定未激活的部分凝血活酶时间，通过测量关键凝血酶活性来特异性评估医用设备和材料对血液或血液相容性的影响。

 

 

检测原理：

在缺乏钙离子的情况下，全血暴露在外源物质时发生接触激活^[1,2,3]。UPTT通过检测凝血时间来测量参与内源性血浆促凝血酶原生成的血浆因子^[4,5]。该检测应重复三次，将检测结果与非处理血浆和阴性对照进行比较。

 

 

产品优点：

UPTT试剂已经过手动和光学检测系统的测试，具有可靠的精度和灵敏度，可为基于接触活化的血液相容性和血栓形成试验提供可靠的结果^[1.3,6,7]。

 

 

试剂盒包含：

20 x 3.0mL的UPTT试剂，

含约~0.1%兔脑脑磷脂，缓冲液和稳定剂。

 

 

试剂储存：

冻干的UPTT试剂可在2-8°C储存直至有效期；在原装容器中重悬的UPTT试剂可于2-8°C密闭储存7天。

 

 

 

注意事项：

（1）本试剂不得用于人体或动物诊断测试。

（2）在整个试剂准备，样本收集，样本制备和分析过程中须严格遵守标准的预防措施。

（3）根据实验室管理制度处理锐器（如针头等）和生物废弃物。

 

 

额外所需材料（本试剂盒未提供）：

1.纯化水，pH 5.3 – 7.2（蒸馏水，去离子水或试剂级）

2.移液器（10ml, 3ml和0.1mL）。

3.氯化钙，0.025M（C / N 100989）

4.柠檬酸钠，0.11M（C / N 100994）

5.凝血参照血浆

 

检测准备

 

 

试剂配制：

在试剂配制前将UPTT小瓶置于室温。

1.轻轻敲击小瓶使附着在塞子上的试剂掉于瓶底；

2.取下铝质密封圈；

3.取出塞子，用3.0 mL纯净水溶解小瓶内容物。

4.盖上塞子并翻转小瓶以*混合内容物。在使用前至少要保持15分钟以确保内容物*溶解。

注意：试剂一旦配置完成，在2 – 8°C储存在密封的原始容器中可稳定7天。

 

 

测试血浆的采集：

UPTT检测的样本必须是由抗凝血全血制备的无血小板或贫血小板血浆。^[8-10]

样本采集

采血时应小心谨慎，当血液在收集管中可见时立即释放止血带，避免停滞，溶血，组织液污染或暴露于玻璃表面。

（建议使用）^[10]

1.采用实验室的蝶翼式采血管套，
2.将血液抽入含有0.11M柠檬酸钠抗凝血剂的真空塑料标本收集管，

3. 轻轻颠倒试管4-5次以混匀样本。

注意：确认使用的抗凝剂类型和浓度，彩色标本管头不能*显示柠檬酸盐的浓度。

 

注射器采血（可选）^[11]

1.采用实验室的蝶翼式采血管套，

2.抽取9.0mL血液进入塑料注射器中，避免吸力过大。

3.取下针头，立即轻轻地将血液加入到含有1.0mL 0.11M柠檬酸钠（血液：抗凝血剂为9：1）的聚丙烯管中，

4..盖上试管并轻轻颠倒4-5次混合，

5.在测试前在室温下样品zui多保持2小时。

 

贫血小板血浆制备（以下两种方法均可）

（一）PDQ®血小板功能离心机

1.将样品放入PDQ，

2.选择PFP设置，

3.按下开始键。

 

 

（二）台式离心机制备贫血小板血浆^[10,12-14]

1.将样品放入离心机中

2.在2500×g离心15分钟。

收获样品

1.使用塑料移液器

2.小心地吸取贫血小板血浆，小心勿接触白细胞层（白膜层）。

3.将样品转移到塑料管并盖上盖子。

4.样品在测试前可以在15 – 28°C下保存zui多两个小时。

 

 

注意事项：

（1）废弃管的收集应符合实验室管理制度。

（2）当红细胞压积<30％或> 55％时需根据样本的血细胞比容调整标本体积使血液比抗凝剂为9比1。^[4,10,15]

（3）在手术过程中，不要将全血样本或测试样本暴露在玻璃表面。^[12,14]

（4）不要对明显溶血，黄疸或脂血症的样品进行UPTT测试。^[10]

注意：为获得*检测结果，溶解的UPTT试剂的应在使用前一刻通过磁力搅拌或轻轻颠倒混匀，或使用塑料涂层的一次性搅拌棒搅拌。

 

检测步骤

 

 

部分凝血活酶时间终点可通过凝血分析仪和手动凝血方法检测。

凝血分析仪检测法

凝血分析仪测试方法与用于激活的部分凝血活酶时间测试（aPTT）的方法相同，按照仪器说明进行检测即可。注意必须采用实验室测试的UPTT参考范围^[16]，所有测试应重复进行三次。 间接血液接触的检测设备需要1克样品，直接血液接触的检测设备需要2.5克样品。 必须控制检测中设备与测试样品接触的时间。

 

 

手动检测

注意：此测试程序仅适用于手动方法，如使用自动或半自动分析仪，请按照分析仪操作手册中的说明进行操作。

1.将0.1mL测试或对照血浆移入测试比色杯中，并在37℃下孵育血浆2分钟

2.在37℃下预孵育0.025M氯化钙

3.将0.1mL UPTT试剂移入含有血浆的测试容器中。

4.在37°C孵育血浆/试剂混合物2到5分钟或根据具体实验方案确定。

5.加入0.1mL预孵育的氯化钙，同时启动计时器。

6.记录凝血时间。

所有测试应重复进行三次。 间接血液接触的检测设备需要1.0克样品，直接血液接触的检测设备需要2.5克样品。 必须控制检测中设备与测试样品接触的时间。

 

检测结果

 

 

UPTT测试凝血终点的结果应以秒为单位。测试和参照均应重复测试三次，结果取平均值，然后与实验室已建立的参考范围进行比较。^{[12,14,15,17]}

测试结果中应包括表示测试有效性的p值，比较未暴露血浆的平均结果与暴露于检测装置的血浆的结果，要通过测试，设备统计的p值必须≥0.05。

预期结果，正常血浆和对照1,2和3的CV应小于5％。

正常血浆: >60秒

Level 1: >60 秒

Level 2: > 90 秒

Level 3: >120秒

注意：使用UPTT在光电光分析仪上用正常对照血浆进行测试时，结果将大于60秒，接触激活会缩短这一时间。由于检测方法和分析仪/人员之间的操作的差异，每个实验室必须为UPTT检测建立参考范围。实验方案，样品制备和终点确定方法均可能会影响测试结果。

 

 

影响因素：

UPTT测试结果的度和准确性可能受到许多因素的影响。实验方案和实验室间的差异来自用于测量凝固终点的凝血系统的数量.5,15在同一实验室中影响测试结果的因素包括用于溶解试剂的纯净水的pH值，移液技术，孵育时间和温度的把握，试剂污染或试剂批号的变化等^[18,19]。定期进行质量控制测试有助于确定和排除影响测试结果的因素。

 

 

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Bio / Data公司成立于1969年，在凝聚分析仪中使用光学和动力学凝块检测技术，并于1974年推出了*台自动血小板聚集仪。Bio / Data专注于创建仪器，技术和试剂，为医疗专业人员提供可靠的检测结果，用于评估止血和血小板功能障碍的各个阶段，包括冯维勒布兰德氏病和格兰仕曼氏病，并监测抗血小板药物如Plavix ®和阿司匹林。