biosearchtech N-5055C 说明书

世界*实验材料供应商 Biosearch Technologies 正式上海金畔生物为其中国代理, Biosearch Technologies 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务,签约 Biosearch Technologies 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Biosearch Technologies是一家致力于创新性研发新型核酸产品以促进新基因的发现与应用的高科技公司。从上世纪八十年代开始,一代一代的Biosearch创新者就专注于寡核苷酸化学合成技术, 在设计和生产荧光探针及引物中经过多次改良形成了公司*的寡核苷酸修饰技术。目前 Biosearch开发的荧光粹灭技术Black Hole Quencher® (BHQ® dyes) 已成为荧光探针设计/合成的工业生产标准。以创新研发为原发动力的Biosearch Technologies公司已经通过英国ISO 9001:2008ISO 13485:2003标准认证,获得加利福尼亚设备制造许可证以及GMP生产许可证。Biosearch拥有丰富的高品质产品线,不仅包括探针和引物产品,广泛应用于药物研发,DNA测序/SNP检测/基因表达分析等领域,也为其他寡核苷酸生产厂商提供原材料。公司在仪器生产领域的努力也使得我们能对公司产品的合成和纯化进一步深入和发展。 

  

Black Hole Quencher (BHQ®) 染料:

Black Hole Quencher (BHQ®) 染料结合 FRET静粹灭技术避免了常规荧光粹灭技术如TAMRA带来的残留背景信号及dabcyl的低信噪比,可实现宽的光谱范围(从480 nm 到近红外光区)的荧光粹灭。

 

NP-CGG (Chicken Gamma Globulin), Ratio 20-29

产品信息:

CATALOG # SIZE/SCALE
N-5055C-1 1 mg
N-5055C-5 5 mg

 

技术规格

属性:

  • Chemical Name: 4-Hydroxy-3-nitrophenylacetyl-Chicken Gamma Globulin
  • Appearance: yellow powder
  • Absorption Maximum (Lambda Max): 430
  • Extinction Coefficient at Lambda max: 4230

产品用途:

  • Conjugation is determined at pH 8.5 by measuring NP absorbance at 430nm, using the extinction coefficient of NP= 4.23 x 10E+03. The conjugation ratio is given as a molar ratio of NP to CGG assuming the molecular weight of CGG is 150,000. Store solution in aliquots at -20°C. Protect from light. This product can be dissolved in PBS buffer, water or other neutral buffers at a concentration of 1mg/mL. Product may precipitate when stored in solution, therefore it is recommended to centrifuge the solutions briefly before use and use only the supernatant. When using PBS please refer to the formulation below. PBS Formulation: 8 g NaCl 0.2 g KCl 0.2 g potassium di-hydrogen phosphate (KH2PO4) 1.15 g di-sodium hydrogen phosphate (Na2HPO4) Add to 1 L of water

储存和处理:

  • Shipping Conditions: Ambient
  • Storage Conditions: +2 to +8 °C

 

我们公司zui大优势是强大的采购,

1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,

2:货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,

3:提供加急服务,一般1-2周到货,超过时限加急费全免

4:价格公道,绝大部分价格有优势,当然不能保证100%产品都是,因为意味着没有服务.

5:良好的信誉,大部分客户我们提供货到付款服务,客户包括清华,北大 交大 复旦,中山等100多所大学,ROCHE,阿斯利康,国药 ,fisher等500多家公司

6:我们*代理的品牌有:Antibody Research Corporation,arcticzymes,Biorelevant,AmberGen, Inc. ,clemente-associates,clodronaiposomes,Columbia Biosciences,enzyme research,Gene Bridges GmbH,Genovis,AmberGen, Inc.  Biotechnology GmbH,Haematologic Technologies HTI Haemtech,hookelabs,Immudex,Innovative Research of America,inspiralis ,List Biological Laboratories, Inc.,lumafluor,Microsurfaces,multiplicom,nanotools,Pel-Freez Biologicals,pentapharm,progen,Protein Ark,QA-Bio,Inc,QA-Bio,IncQuickZyme Biosciences,Teknova,TriLink BioTechnologies, Inc.,Zyagen Laboratories 等

7:我们还是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批发,欢迎合作。

biosearchtech KASP 基因分型试验试剂盒

 

 

biosearchtech KASP 基因分型试验试剂盒

我们获得专有技术的基于PCR的KASP基因分型化学方法包括三个成分:样品DNA,KASP分析混合物和包含两个通用FRET卡盒的KASP Master混合物。

KASP试用套件包含

  • 33个预稀释的DNA样品
  • 2X KASP预混液
  • 对照KASP测定混合物

从完成的KASP反应中读取荧光信号所需的全部是具有FRET功能的酶标仪或qPCR仪器。

KASP 基因分型试验试剂盒用户指南

本指南内容

简介

试剂盒内容物

进行 KASP 基因分型反应的实验程序

3.1 KASP 基因分型反应

3.2 试剂盒组装

3.3 KASP 基因分型混合物组装

3.4 实验程序

3.5 热循环条件

3.6 其他循环条件

 

订购信息

 

1. 简介

KASP™ 基因分型试验试剂盒作为使用 KASP 化学品的介绍提供。它使用户能够使用现有设备在自己的实验室中测试化学物质。

一般而言,任何能够在表 1 中波长处读取 FRET 的 qPCR 仪器或酶标仪均应与 KASP 兼容。

KASP 已在广泛的 qPCR 仪器上得到验证,包括:

• ABI 7500

• ABI 7300

• ABI 7900

• ABI ViiA7

• 罗氏 LC480

• Agilent Mx3000P/3005P

• illumina EcoRT

• BIO-RAD CFX

 

2. 试剂盒内容物

 

该试剂盒包含 KASP 基因分型检测试剂盒,包括检测混合物、主混合物和 DNA:

1. 1 x 96 孔微量滴定板,含 33 份 DNA 样品(和 3 份无模板对照),预稀释至适用于 KASP 基因分型反应的浓度范围。

2. 1 x 500µL 管的 2x 浓度的 KASP 主混合物(足以进行 100 次反应)

10µL)。

3. 1 x 管 KASP 测定混合物(72x 浓度)。

 

客户要求

1. 快速酶标仪(激发和发射详见表 1)

荧光团的值)

2. 一个预期用于客户基因分型过程类型的空 PCR 板

3. PCR 级水

4. 光学透明密封件。

 

荧光团

激发波长 (nm)

发射 (nm)

FAM

485

520

六角

535

556

575

610

表 1:KASP 化学中使用的荧光团及其各自的激发和发射波长。

 

3. 进行 KASP 基因分型反应的实验程序

 

3.1 KASP 基因分型反应

使用以下试剂制备 KASP 反应:

• 2x KASP 预混液

• 72x KASP 分析混合物

• DNA 样品(提供正确浓度的样品 DNA,用于 2x 稀释)

• 必要时加水定容至终反应体积。

 

3.2 试剂盒组装

384 孔板的总反应体积需要 5µL,96 孔板的总反应体积需要 10µL。

表 2 是如何为 384 和 96 孔板形式的 KASP 构建 60 个反应的示例。这将使您能够为 33 个样本和 3 个无模板对照 (NTC) 制备足够的基因分型混合物,并提供额外的备用体积。

 

3.3 KASP 基因分型混合物组装

 

组分

60 次反应的湿 DNA 法 (µL)

板格式

384 孔板

96 孔板

2x KASP 预混液

150

300

分析混合液

4.2

8.4

N / A

N / A

总反应体积

5

10

总计

300

600

表 2:KASP 反应组件示例

 

3.4 实验程序

1. 解冻 KASP Master mix 和 KASP Assay mix 试管。涡旋每个试管,并在冰上储存。

2. 解冻 DNA 板。短暂涡旋并向下旋转微孔板。

3. 使用单通道或多通道移液器将 DNA 转移至空反应板(客户提供)。

– 对于 96 孔板:将提供的 5µL DNA 转移至各孔中。

– 对于 384 孔板:将提供的 2.5µL DNA 转移至各孔中。

4. 按照表 2 所述制备基因分型混合物 (2x KASP Master mix plus Assay mix)。向反应板中的每个 DNA 样品中加入所需量的基因分型混合物。该程序可使用单通道或多通道移液器。

– 对于 96 孔板:向各 DNA 样本中加入 5µL 制备的基因分型混合物。

– 对于 384 孔板:向各 DNA 样本中加入 2.5µL 制备的基因分型混合物。

5. 用光学透明密封件密封平板。

6. 将微孔板离心至少 550 次x g. 不要以比转子推荐的速度更快的速度旋转微孔板。

 

3.5 热循环条件

KASP 化学品可以与任何标准热循环仪一起使用。热循环条件详见表 3,请注意,使用了两步降落 PCR 方法,延伸和退火步骤合并为一个步骤。建议在分配 DNA 和基因分型混合物后尽快循环反应板。如果不可行,制备好的平板可在 4 ℃ 下储存长达 1 小时OC. 平板分装后应立即用光学透明密封件密封,以防止任何蒸发。

 

步骤

性状

温度

时间

每个步骤的循环次数

1

活化

94OC

15 min

1

 

2

变性

94OC

20 s

 

10 个周期

退火/伸长率

61-55OC

60 s

(下降 0.6OC/循环)

 

3

变性

94OC

20 s

 

26 个周期

退火/伸长率

55OC

60 s

表 3:KASP 化学品的热循环条件

热循环后,读取微孔板。

请注意:所有平板的读数均应低于 40OC. 如果微孔板读数未低于 40OC,不可能分析基因分型数据。

3.6 其他循环条件

如果您尚未获得明确的基因分型簇,则应将平板热循环额外 3 个循环,并再次读取。回收条件请参见表 4。

步骤

温度

时间

每个步骤的循环次数

变性

94OC

20 s

 

3 个周期

退火/伸长率

57OC

60 s

表 4:KASP 化学品进一步热循环的条件

在获得紧密的基因分型簇之前,可以进行进一步的循环和读取。

图 1 图 2

X 轴上报告的 FAM 等位基因

 

图 1:说明三个清晰簇的基因分型图示例。FAM 等位基因在 X 轴上报告(蓝色数据点),HEX 等位基因在 Y 轴上报告(红色数据点)。绿色数据

点代表杂合子样本,黑色数据点为无模板对照 (NTC)。

图 2:指示 KASP 基因分型试验试剂盒 DNA 样本预期基因分型结果的 96 孔板布局图。

 

 

注:本方案适用于所有三个试验套件部件编号。三种试剂盒之间的仅有差异是 KASP 主混合物中被动参比染料 ROX 的浓度,其根据使用的酶标仪类型而变化

4. 订购信息

 

产品代码

性状

KBS-1014-104

标准 Rox 试验套件

KBS-1014-105

High Rox 试模套件

KBS-1014-106

低 Rox 试验套件