D3100L4053-CCK-8说明书

订购信息: 

产品名称

货号

规格

保存

价格(元)

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4053

1ml

4

245

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4054

5ml

4

595

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4055

10ml

4

1050

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4056

30ml 

4

2080

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4057

100ml

4

5850

产品描述

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 细胞增殖与活性检测试剂盒是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1)。WST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

 

 

图1:WST-8分子结构及检测原理

运输与保存方法

冰袋运输。CCK-8在4℃可保存一年,在-20℃可以存放数年,反复冻融会造成测定背景O.D值升高,如经常使用,建议存放于4℃即可。

操作方法

1. 在96孔板中配制100 μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时 (在37℃,5% CO2的条件下)。

2. 向培养板加入10 μL不同浓度的待测物质。如果测定细胞活性,则不需要2-3步骤,直接从第四步操作。

3. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,  12, 24或48小时)。

4. 向每孔加入10 μL CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D值的读数)。

5. 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

注意事项

1)CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化反应,如果待检测体系中有较多还原剂(或抗氧化剂)会造成背景O.D值升高,干扰检测结果。如果实验中有还原剂,请检查背景的O.D值,即测定、比较空白培养基加入药物与不加药物的培养基(含细胞)在加入CCK- 8试剂后的O.D值,如果空白O.D值明显偏高,则说明有反应,应设法去除或折算干扰因素。

2)如果细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化,应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。细胞培养基酚红不影响测定结果。

3)为使CCK-8试剂盒培养基充分混匀,减少CCK-8在移液器上的残留,建议加样前用培养基稀释CCK-8试剂,混匀后加样。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

CCK-8与同类试剂比较

检测方法

MTT

XTT

WST-1

CCK

产品性状

粉末

2瓶溶液

溶液

1瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

现配现用

即开即用

即开即用

检测灵敏度

很高

很高

检测时间

较长

较短

较短

zui短

检测波长

560-600nm

420-480nm

420-480nm

430-490nm

细胞毒性

高,细胞形态*消失

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

试剂稳定性

一般

较差

一般

很好

批量样品检测

可以

非常适合

非常适合

非常适合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便捷

 

CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

¥600.00

货号:BS350E

规格:1000T

品牌:Jinpan

细胞增殖毒性检测试剂盒

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)    

产品简介:

CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。


使用方法:

1、在96孔板中接种细胞悬液(100 ul /),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)

2、按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间(例如: 6,12, 2448小时)

3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰检测,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。

4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5124小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。

6、如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/vSDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。


注意事项:

1、使用96 孔板进行检测时,如果细胞培养时间较长,请注意蒸发问题。可将96 孔板外围一圈加培养基、水或PBS 保湿。同时,可以把96 孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。

2、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入CCK-8 试剂后的培养时间。

3、铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀,建议铺板过程中注意时常混匀,防止因细胞沉淀造成不均匀。加入CCK-8 后请前后左右轻轻晃动培养板数次,使培养基和CCK-8 溶液充分混匀。

4、本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8 之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

5、加入CCK-8 时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH 值已变化,建议换用新鲜的培养基。

6、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。

7、本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中,请在生物安全柜内无菌操作,避免污染。

8、为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。


保存方法:

    0-5避光保存,长期保存建议-20保存,但不能反复冻融。

    0-5条件下可保存一年。

货号 BS350E
规格 1000T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载
  • CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

¥120.00

货号:BS350A

规格:100T

品牌:Jinpan

细胞增殖毒性检测试剂盒

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)    

产品简介:

CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

使用方法:

1、在96孔板中接种细胞悬液(100 ul /),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)

2、按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间(例如: 6,12, 2448小时)

3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰检测,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。

4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5124小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。

6、如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/vSDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。

注意事项:

1、使用96 孔板进行检测时,如果细胞培养时间较长,请注意蒸发问题。可将96 孔板外围一圈加培养基、水或PBS 保湿。同时,可以把96 孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。

2、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入CCK-8 试剂后的培养时间。

3、铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀,建议铺板过程中注意时常混匀,防止因细胞沉淀造成不均匀。加入CCK-8 后请前后左右轻轻晃动培养板数次,使培养基和CCK-8 溶液充分混匀。

4、本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8 之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

5、加入CCK-8 时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH 值已变化,建议换用新鲜的培养基。

6、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。

7、本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中,请在生物安全柜内无菌操作,避免污染。

8、为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。

保存方法:

    0-5避光保存,长期保存建议-20保存,但不能反复冻融。

    0-5条件下可保存一年。

货号 BS350A
规格 100T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载
  • CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

¥500.00

货号:BS350B

规格:5X100T

品牌:Jinpan

细胞增殖毒性检测试剂盒

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)    

产品简介:

CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

使用方法:

1、在96孔板中接种细胞悬液(100 ul /),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)

2、按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间(例如: 6,12, 2448小时)

3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰检测,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。

4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5124小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。

6、如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/vSDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。

注意事项:

1、使用96 孔板进行检测时,如果细胞培养时间较长,请注意蒸发问题。可将96 孔板外围一圈加培养基、水或PBS 保湿。同时,可以把96 孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。

2、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入CCK-8 试剂后的培养时间。

3、铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀,建议铺板过程中注意时常混匀,防止因细胞沉淀造成不均匀。加入CCK-8 后请前后左右轻轻晃动培养板数次,使培养基和CCK-8 溶液充分混匀。

4、本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8 之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

5、加入CCK-8 时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH 值已变化,建议换用新鲜的培养基。

6、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。

7、本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中,请在生物安全柜内无菌操作,避免污染。

8、为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。

保存方法:

    0-5避光保存,长期保存建议-20保存,但不能反复冻融。

    0-5条件下可保存一年。

货号 BS350B
规格 5X100T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载
  • CCK-8 试剂盒

细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8),货号-规格:CX001M-500次

细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8),货号-规格:CX001M-500次

市场价: 398.0
价格:
398.00
品牌: 雅酶
规格: 500次
产品详情

说明书下载

参考文献


CX001M 细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)

产品货号:CX001M

产品规格:500T


细胞增殖毒性检测试剂盒

Cell Counting Kit-8(CCK-8)

本产品常温运输;2~8℃避光保存,保质期12个月;在-20℃条件可以贮存更久。

货号规格

CX001S   1ml        (100次)

CX001M   5ml        (500次)

CX001     5ml×5    (2500次)

CX001L   5ml×20   (10000次)

产品简介

   本试剂盒可以对细胞增殖和细胞毒性进行快速、高灵敏度的检测,它的核心成分为一种水溶性四唑盐, 在电子耦合试剂存在的情况下,这种四唑盐能够被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性甲臜染料。 颜色越深,说明细胞增殖得越多越快,反之,则说明细胞毒性越大。对于相同的细胞,甲臜染料颜色的深浅与活细胞数目呈线性相关。

操作步骤

细胞活性检测

1. 在96 孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱预培养24h(在37℃,5% CO2的条件下);

★ 注意:具体每孔所需的细胞数目,需根据细胞大小及增殖速度等因素来决定。

2. 每孔加入10μL 的CCK-8 溶液(避免在孔中生成气泡,以免影响OD 值的读数);

3. 将培养板置于培养箱内孵育1~4h;

4. 用酶标仪测定在450nm 处的吸光度;

5. 如果暂时不测定OD 值,可向每孔中加入10μL 0.1M HCl 溶液或者1%(W/V)SDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24h 内吸光度不会发生变化。

细胞增殖毒性检测

1. 在96 孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱预培养24h(在 37℃,5% CO2 的条件下);

★ 注意:具体每孔所需的细胞数目,需根据细胞大小及增殖速度等因素来决定。

2. 向培养板加入10μL 不同浓度的待测物质;

3. 将培养板置于培养箱内孵育适当的时长(例如:6,12,24 或48h);

4. 每孔加入10μL 的CCK-8 溶液(避免加入时在孔中产生气泡,以免影响OD 值的读数);

5. 将培养板置于培养箱内孵育1~4h;

6. 用酶标仪测定在450nm 处的吸光度;

7. 如果暂时不测定OD 值,可向每孔中加入10 μL 0.1M HCl 溶液或者1%(W/V)SDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温      条件下。在24h 内吸光度不会发生变化。

    ★ 注意: 如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8 之前更换新鲜培养基,去除药物的影响。当然如果药物影响比较小,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

标准曲线制作

1. 使用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞;

2. 按比例(例如:1/2 比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3~5 个细胞浓度梯度,每组3~6 个复孔;

3. 接种后培养2~4h 使细胞贴壁,然后加入CCK-8 试剂培养一定时间后测定OD 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴),OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以   及加入CCK-8 后的培养时间)。

注意事项

1. 初次实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8 试剂后的培养时间;

2. 若细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化或pH发生变化,建议更换新鲜的培养基后再加入CCK-8 试剂。含有酚红的培养基不影响本试剂盒做细胞活性的测定;

3. 如果样品为高浑浊度的细胞悬液,建议设定600nm(或600nm 以上)作为参比波长,扣除参比波长的OD 值即可;

4. CCK-8 试剂对细胞的毒性极低,经CCK-8 法检测后的细胞仍然可正常生长,但为避免CCK-8 试剂可能对后续检测造成影响,不推荐将CCK-8 试剂孵育过的细胞用于其它实验;

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

6. 本产品仅限科研使用。


CX001M 细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)说明书下载