Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)说明书

Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)说明书



产品详情

货号

规格

价格

78EA10004-100T

1ml/100T

200

78EA10004-500T

5ml/500T

600

 

 

产品描述

      Jinpan的CCK-8试剂盒是用白色的WST-8固体粉末配置的,颜色为粉红色,保存期更长,实验重复性更好! WST-8(水溶性四唑(2-(2-甲氧基-4硝基苯)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,被线粒体内的脱氢酶还原成橙黄色的水溶性的甲臜染料(formazan,下图), 这种甲臜染料直接溶解在培养基中。水溶性四唑被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够。细胞增殖越多越快,则培养基的颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。正是利用这一特性开发的CCK-8试剂盒直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法应用非常广泛,可以用于生物活性因子的活性检测,抗肿瘤药物的筛选,细胞增值的测定,细胞毒性检测以及药敏等与细胞活性和增殖相关的实验。本试剂盒使用方便,试剂盒包含一管已经配制好的含有水溶性四唑的CCK-8溶液,即开即用,无需其他准备步骤。检测过程也无需采用额外的步骤去溶解甲臜,可直接使用96孔板或者384孔板在酶标仪上检测,适合大规模高通量的样品检测。

         

产品性质

      CCK8试剂盒提供了一种灵敏度高,操作简便,使用安全,重现性好的细胞增殖与活性检测方法。与传统的MTT相比无需有机溶剂和放射性同位素,步骤少,无损失,结果准确!本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作 。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。

      1.MTT实验生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO等有机溶剂溶解;而本方法产生的甲臜是水溶性的,不仅省去了溶解的步骤,更因此而减少了该操作步骤带来的误差。

      2.与MTT方法相比,本方法线性范围更宽,灵敏度更高。本方法对细胞无损害,因此加入CCK-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数多次测定从而找到最佳测定时间。

      3.本方法所用试剂在培养基中比MTT更加稳定,实验效果重复性好。

      4.MTT具有毒性,同时其生成的甲臜需要有机溶剂溶解,会对操作人员身体造成危害。本试剂无毒,使用中无需有机溶剂,操作更加安全。

      5.本试剂盒在4℃避光可长期保存,使用无需配制,即开即用。

      6.酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰(扣除空白孔即可)

产品特点

                                                      CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

      

检测方法

MTT法

XTT法

WST-1法

CCK-8法

甲臜产物的水溶性

需要加DMSO溶解

产品性状

粉末

2瓶溶液

溶液

1瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

现配现用

即开即用

即开即用

检测灵敏度

一般

较高

较高

重现性

中等

非常好

检测时间

较长

较短

较短

最短

检测波长

560-600nm

420-480nm

420-480nm

430-490nm

细胞毒性

细胞形态已消失

很低

细胞形态不变

很低

细胞形态不变

很低

细胞形态不变

试剂稳定性

一般

非常差

一般

很好

批量样品检测

可以

非常适合

非常适合

非常适合

便捷程度

一般,工作量大

便捷

便捷

非常便捷

注意事项

1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

运输及保存方法

CCK-8溶液在避光,0-5℃的条件下可以保存一年; -20℃下保存2年;如需经常使用请将试剂存放在0-5℃,为防止背景值增加干扰实验结果,请勿反复冻融。

CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

¥1400.00

货号:BS350C

规格:25X100T

品牌:Jinpan

细胞增殖毒性检测试剂盒

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)    

产品简介:

CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

使用方法:

1、在96孔板中接种细胞悬液(100 ul /),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)

2、按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间(例如: 6,12, 2448小时)

3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰检测,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。

4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5124小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。

6、如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/vSDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。

注意事项:

1、使用96 孔板进行检测时,如果细胞培养时间较长,请注意蒸发问题。可将96 孔板外围一圈加培养基、水或PBS 保湿。同时,可以把96 孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。

2、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入CCK-8 试剂后的培养时间。

3、铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀,建议铺板过程中注意时常混匀,防止因细胞沉淀造成不均匀。加入CCK-8 后请前后左右轻轻晃动培养板数次,使培养基和CCK-8 溶液充分混匀。

4、本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8 之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

5、加入CCK-8 时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH 值已变化,建议换用新鲜的培养基。

6、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。

7、本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中,请在生物安全柜内无菌操作,避免污染。

8、为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。

保存方法:

    0-5避光保存,长期保存建议-20保存,但不能反复冻融。

    0-5条件下可保存一年。

货号 BS350C
规格 25X100T
品牌 Jinpan
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  • CCK-8 试剂盒
  • CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

¥4200.00

货号:BS350D

规格:10000T

品牌:Jinpan

细胞增殖毒性检测试剂盒

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)    

产品简介:

CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

使用方法:

1、在96孔板中接种细胞悬液(100 ul /),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)

2、按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间(例如: 6,12, 2448小时)

3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰检测,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。

4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5124小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。

6、如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/vSDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。

注意事项:

1、使用96 孔板进行检测时,如果细胞培养时间较长,请注意蒸发问题。可将96 孔板外围一圈加培养基、水或PBS 保湿。同时,可以把96 孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。

2、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入CCK-8 试剂后的培养时间。

3、铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀,建议铺板过程中注意时常混匀,防止因细胞沉淀造成不均匀。加入CCK-8 后请前后左右轻轻晃动培养板数次,使培养基和CCK-8 溶液充分混匀。

4、本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8 之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

5、加入CCK-8 时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH 值已变化,建议换用新鲜的培养基。

6、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。

7、本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中,请在生物安全柜内无菌操作,避免污染。

8、为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。

保存方法:

    0-5避光保存,长期保存建议-20保存,但不能反复冻融。

    0-5条件下可保存一年。

货号 BS350D
规格 10000T
品牌 Jinpan
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  • CCK-8 试剂盒

D3100L4053-CCK-8说明书

订购信息: 

产品名称

货号

规格

保存

价格(元)

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4053

1ml

4

245

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4054

5ml

4

595

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4055

10ml

4

1050

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4056

30ml 

4

2080

活性检测CCK-8细胞增殖与活性检测试剂盒

D3100L4057

100ml

4

5850

产品描述

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 细胞增殖与活性检测试剂盒是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜(formazan,参考图1)。WST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

 

 

图1:WST-8分子结构及检测原理

运输与保存方法

冰袋运输。CCK-8在4℃可保存一年,在-20℃可以存放数年,反复冻融会造成测定背景O.D值升高,如经常使用,建议存放于4℃即可。

操作方法

1. 在96孔板中配制100 μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时 (在37℃,5% CO2的条件下)。

2. 向培养板加入10 μL不同浓度的待测物质。如果测定细胞活性,则不需要2-3步骤,直接从第四步操作。

3. 将培养板在培养箱孵育一段适当的时间 (例如: 6,  12, 24或48小时)。

4. 向每孔加入10 μL CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成气泡,它们会影响O.D值的读数)。

5. 将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

注意事项

1)CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化反应,如果待检测体系中有较多还原剂(或抗氧化剂)会造成背景O.D值升高,干扰检测结果。如果实验中有还原剂,请检查背景的O.D值,即测定、比较空白培养基加入药物与不加药物的培养基(含细胞)在加入CCK- 8试剂后的O.D值,如果空白O.D值明显偏高,则说明有反应,应设法去除或折算干扰因素。

2)如果细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化,应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。细胞培养基酚红不影响测定结果。

3)为使CCK-8试剂盒培养基充分混匀,减少CCK-8在移液器上的残留,建议加样前用培养基稀释CCK-8试剂,混匀后加样。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

CCK-8与同类试剂比较

检测方法

MTT

XTT

WST-1

CCK

产品性状

粉末

2瓶溶液

溶液

1瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

现配现用

即开即用

即开即用

检测灵敏度

很高

很高

检测时间

较长

较短

较短

zui短

检测波长

560-600nm

420-480nm

420-480nm

430-490nm

细胞毒性

高,细胞形态*消失

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

试剂稳定性

一般

较差

一般

很好

批量样品检测

可以

非常适合

非常适合

非常适合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便捷

 

CCK-8 试剂盒

CCK-8 试剂盒

¥600.00

货号:BS350E

规格:1000T

品牌:Jinpan

细胞增殖毒性检测试剂盒

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)    

产品简介:

CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。


使用方法:

1、在96孔板中接种细胞悬液(100 ul /),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)

2、按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间(例如: 6,12, 2448小时)

3、每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰检测,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。

4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5124小时后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。

6、如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/vSDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。


注意事项:

1、使用96 孔板进行检测时,如果细胞培养时间较长,请注意蒸发问题。可将96 孔板外围一圈加培养基、水或PBS 保湿。同时,可以把96 孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。

2、培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入CCK-8 试剂后的培养时间。

3、铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀,建议铺板过程中注意时常混匀,防止因细胞沉淀造成不均匀。加入CCK-8 后请前后左右轻轻晃动培养板数次,使培养基和CCK-8 溶液充分混匀。

4、本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8 之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

5、加入CCK-8 时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH 值已变化,建议换用新鲜的培养基。

6、用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。

7、本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中,请在生物安全柜内无菌操作,避免污染。

8、为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。


保存方法:

    0-5避光保存,长期保存建议-20保存,但不能反复冻融。

    0-5条件下可保存一年。

货号 BS350E
规格 1000T
品牌 Jinpan
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  • CCK-8 试剂盒