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chimerx 1140说明书

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chimerx 1140说明书

核酸外切酶III，大肠杆菌

货号1140

价格由： CA $ 50.00

    快速概述

    3'→5'核酸外切酶从DNA链的3'末端释放5'-单核苷酸

    细节

    资源

    大肠杆菌

    提供的试剂

    10X Exonuclease III反应缓冲液

    描述

    • 对双链DNA特异的3'→5'核酸外切酶
    • 包含DNA 3'-磷酸酶，可水解3'-末端磷酸单酯
    • 包含AP核酸内切酶，在嘌呤或嘧啶位点切割磷酸二酯键以产生5'-末端，该末端为无碱基的脱氧核糖5'-磷酸残基（1）
    • 具有核糖核酸酶H活性，优先降解DNA-RNA杂交双链体中的RNA链，推测是核酸外切（1）
    • 在切口处消化双链DNA，产生单链缺口
    • 不会降解具有至少4个碱基对的3'突出端的双链DNA，单链DNA或硫代磷酸酯连接的核苷酸
    • 超纯重组酶

    应用领域

    • 用于构建DNA片段的嵌套单向缺失（2）
    • 用于生成双链DNA的单链模板（3）
    • 用于定点诱变（4）和PCR产物的克隆（5）

    单位定义

    一个单位定义为在37°C下30分钟内产生1nmol酸溶放射性所需的酶量（6）。

    储存缓冲液

    25 mM Tris-HCl（pH 8.0）
    0.05 mM二硫苏糖醇
    50％甘油 

    测定条件

    请参阅下面的分析证书。

    纯度

    通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯度约为≥90％

    贮藏条件

    储存在-20°C 
    产品在干冰上运输

     

     

     

     

     

    chimerx 1065说明书

    发表于由

     

    chimerx 1065说明书

    E. coli DNA Ligase

    大肠杆菌DNA连接酶

    货号： 1065

    Price From: $125.00

    快速概述

    催化双链DNA中并置的5'-磷酸和3'-羟基内聚末端之间磷酸二酯键的形成

     

    细节

    资源

    大肠杆菌

    提供的试剂

    5X大肠杆菌反应缓冲液

    应用领域

    • 催化具有粘性末端的双链DNA的片段之间磷酸二酯键的形成
    • 适用于全长cDNA的高效克隆（1,2）
    • 5'-磷酰基与相邻3'-羟基的缩合与NAD +的水解结合

    单位定义

    一个单位是在20 µl含有0.12 µM（300 µg / ml）DNA末端的检测混合物中，在16°C下于30分钟内产生λDNA HindIII片段50％连接所需的酶量。

    储存缓冲液

    10 mM Tris-HCl（pH 7.4）
    50 mM KCl 
    0.1 mM EDTA 
    10 mM硫酸铵
    1 mM二硫苏糖醇  
    50％（v / v）甘油

    测定条件

    请参阅下面的分析证书。

    贮藏条件

    储存在-20°C 
    产品在干冰上运输

     

     

    chimerx 1261说明书

    发表于由

     

    chimerx 1261说明书

    T4多核苷酸激酶

    T4 Polynucleotide Kinase

    货号1261

    价格由： CA $ 110.00

    细节

    资源

    重组大肠杆菌菌株

    提供的试剂

    10X T4多核苷酸激酶反应缓冲液

    应用领域

    • 催化ATP的γ-磷酸转移到DNA或RNA中的5'-OH末端
    • 包含3'-磷酸酶活性（1）
    • 在DNA或RNA测序之前用于核酸的5'端标记（2，3）
    • 连接前磷酸化合成的接头和DNA或RNA的片段
    • 在部分限制酶消化之前标记5'-末端

    单位定义

    一个单位是在37分钟内在30分钟内将1纳摩尔的γ-磷酸盐从ATP转移到鲑鱼精子DNA的5'OH末端所需的酶量。

    热失活

    65ºC时15分钟

    浓度

    20-30单位/微升

    储存缓冲液

    50 mM Tris HCl（pH 7.6）
    0.1 mM EDTA 
    25 mM KCl 
    5 mM二硫苏糖醇
    0.1 µM ATP 
    50％（v / v）甘油

    测定条件

    70 mM Tris-HCl（pH 7.6）
    10 mM MgCl 2
    5 mM二硫苏糖醇
    50 ug 5'-OH终止的DNA（经微球菌核酸酶处理的鲑鱼精DNA）
    0.07 mM [γ-32P] ATP 
    反应体积为100 µl

    贮藏条件

    储存在-20°C 
    产品在干冰上运输

     

     

     

    chimerx 1025说明书

    发表于由

    chimerx 1025说明书

    碱性磷酸酶，小牛肠

    货号1025

    价格由： CA $ 68.00

    快速概述

    小牛肠源性磷酸酶（CIP），可催化磷酸单酯的水解

     

    细节

    资源

    小腿肠粘膜

    提供的试剂

    10X CIP反应缓冲液

    应用领域

    • 与细菌酶相比，具有更高的周转率和更温和的灭活条件（1）
    • 可用于在5'端标记之前从DNA或RNA中去除5'-磷酸（1）
    • 用于从线性化载体分子中去除5'-磷酸，以防止克隆过程中载体的自连接（1）
    • 适用于蛋白质的去磷酸化

    单位定义

    一个单位是在37°C下1分钟内将1 µmol对硝基苯基磷酸酯水解为对硝基苯酚所需的酶量（2）

    热失活

    没有

    浓度

    20-25单位/微升

    储存缓冲液

    10 mM Tris-HCl（pH 8.0）
    50 mM KCl 
    1 mM MgCl 2 
    0.1 mM ZnCl 2 
    50％（v / v）甘油

    测定条件

    请参阅下面的分析证书 

    贮藏条件

    储存在-20°C 
    产品在干冰上运输

     

     

     

    chimerx新产品NXT Taq PCR试剂盒

    发表于由

     

    chimerx新产品NXT Taq PCR试剂盒

    CHIMERx现在提供了一个热启动PCR试剂盒，旨在缩短PCR循环时间而又不影响产量或性能。NXT Taq PCR Kit包含现成的预混液，其中包括Hot Start NXT Taq DNA聚合酶，反应缓冲液，MgCl2和dNTP。还包括无核酸酶的水和10X彩色加载溶液。NXT Taq PCR Kit可以与任何热循环仪一起使用。

    NXT Taq PCR试剂盒

    chimerx 1108

     

    $ 56.00

      快速概述

      热启动PCR试剂盒，设计用于在任何热循环仪上进行快速循环PCR，而不会影响产量或性能

      细节

      提供的试剂

      NXT  Taq PCR预混液（2x）包含：

      • 热启动NXT Taq DNA聚合酶 
      • 反应缓冲液
      • 氯化镁2
      • dNTPs

      水，无核酸酶的
      10X彩色溶液

      描述

      • 甲 llows以获得宽范围的PCR产物的至多4个kb和从附加型或复杂的基因组DNA为10kb，分别
      • 即用型溶液，包含热启动  NXT  Taq DNA聚合酶，反应缓冲液，MgCl 2  和dNTP
      • 专为任何热循环仪上的快速循环PCR设计
      • 缩短PCR循环时间而不会影响产量或PCR性能
      • 不需要重新设计引物
      • 随附10X Color Load溶液，可直接在凝胶上加载PCR反应
      • 在72°C下复制DNA，并在95°C下显示40分钟的半衰期
      • 包含5'→3'核酸外切酶活性
      • 缺乏3'→5'核酸外切酶活性
      • 在3'末端添加额外的“ A”
      • 抗Taq抗体在中等温度下抑制聚合酶活性
      • 在初始变性步骤中，聚合酶活性得以恢复。

      应用领域

      • Taq DNA聚合酶和抗Taq抗体之间形成复合物，构成了热启动PCR的基础，可方便地进行室温反应。
      • 与常规PCR组装方法相比，热启动PCR可以提高PCR反应的特异性，灵敏度和产率。

      笔记

      • 不要使用大于20μl的反应体积，因为这会干扰获得成功结果所需的宜温度梯度
      • 使用前解冻，轻轻涡旋并短暂离心NXT Taq PCR Master Mix（2x），引物，DNA模板，以避免盐浓度的局部差异
      • 退火和延伸步骤每100 bp分别需要5 s和3 s
      • 在室温下设置PCR反应
      • 底漆可以单独添加，也可以作为预先准备的底漆混合物添加
      • 涡旋样品并短暂旋转
      • 反应可以在室温下放入热循环仪中
      • 使用10X Color Load Solution可使PCR反应直接加载到凝胶上，而无需事先添加凝胶加载缓冲液。10X Color Load Solution包含凝胶加载试剂和两种在电泳过程中分离的跟踪染料（红色染料和黄色染料）。在1％琼脂糖凝胶中，红色染料的迁移速率与600 bp DNA片段的迁移速率相同，而黄色染料的迁移速率高于20 bp。该染料不干扰大多数下游酶的应用，但是建议在酶操作之前纯化PCR产物。
      • 在大多数情况下，无需在PCR反应中添加添加剂。对于某些困难的目标，例如：富含GC的序列，可以添加具有复杂二级结构添加剂的序列（例如DMSO）以改善扩增。使用浓度为2-8％的DMSO。如果需要，建议的起始DMSO浓度为3％
      • 作为使用多少模板DNA的一般指南，请从少10 4  个目标序列拷贝开始，以25-35个周期获得信号（即1μg1 kb ds DNA等于9.1 x 10 11分子，1μg的大肠杆菌基因组DNA等于2 x 10 8分子，1μg人基因组DNA等于3 x 10 5分子）

      储存条件

      在-20°C下储存
      产品在干冰上运输

      分类目录

      聚合酶，嗜热DNA聚合酶