细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI)

细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI)

¥500.00

货号:BL776A

规格:200T-1000T

品牌:Jinpan

产品简介:

DiI 即 DiIC18(3)是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI 是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI 毒性很低,通常不会影响细胞的生存力。DiI 在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI 被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI 和磷酯双层膜结合后最大激发波长为 549nm,最大发射波长为 565nm。

本试剂盒可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为 5-20 分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

本试剂盒如果用于流式细胞仪,每个样品的检测体系体积为 0.5ml 时,可以进行 200 次检测,96 孔板每孔检测体系的体积为 100ul 时,可以进行 1000 次检测。

注意事项

1、不同细胞的最佳染色浓度略有不同,细胞膜染色工作液的最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系进行优化,可在 1:100-1:400 之间进行调整。DiI 的最终浓度提高时,染色增强剂的用量不变。
2、如果染色时间过长或染色后细胞继续培养,探针也可能进入细胞内而染色其它细胞器的膜。
3、染色缓冲液经过过滤除菌处理,在使用时须注意避免微生物污染,否则很可能严重影响染色效果。如果染色缓冲液发生浑浊等明显的微生物污染,就不能继续使用。
4、荧光染料不可避免的都存在一定的淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
5、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃避光保存,一年有效,避免反复冻融。染色增强剂(400X)和染色缓冲液也可保存在 4ºC。

货号 BL776A
规格 200T-1000T
品牌 Jinpan
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DiI (细胞膜红色荧光探针)

DiI (细胞膜红色荧光探针)

¥575.00

货号:BL1031A

规格:10mg

品牌:biosharp

商品详情:

产品简介:

DiDDiODiIDiR染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI色荧光),DiO(绿色荧光),DiD远红外荧光)和 DiR (深红色荧光),这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。

DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI和磷酯双层膜结合后最大激发波长为549nm,最大发射波长为565nm DiI 被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。还用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

 

产品信息:

CAS41085-99-8

英文名:1,1′-dioctadecyl-3,3,3′,3′-tetramethylindocarbocyanine perchlorate

分子式:C59H97ClN2O4

分子量:933.88

 

使用方法仅供参考

一、DiI细胞膜染色液制备

1.配置DMSOEtOH 储存液:用DMSOEtOH配置浓度1-2 mM的储存液

注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,稳定保存6个月;发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。

2.工作液制备:用合适的缓冲液(如无血清培养基,HBSSPBS)稀释储存液,配制浓度为15 µM的工作液。

注:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制,可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。  

二、细胞染色

a. 对于悬浮细胞

1.悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。

2.37℃培养细胞520分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

3.10001500rpm离心5分钟。

4.去除上清,再次缓慢加入37℃预温的培养液。

5.重复步骤34,两次以上。

b. 对于贴壁细胞

1.去多余的培养液。

2.加入染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

3.37 ℃培养细胞 520分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

4.染料工作液,用培养液清洗23次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养510分钟,然后吸干培养基。

结果分析

显微镜下观察或流式细胞仪检测

 

注意事项

1、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃干燥避光保存,有效期一年。

货号 BL1031A
规格 10mg
品牌 biosharp
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DiI碘化物

上海金畔生物科技有限公司提供DiI碘化物 ,欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 D-9115
英文名称 DiI iodide
中文名称 DiI碘化物
别    名 DiI iodide [1,1‘-Dioctadecyl-3,3,3’,3‘- tetramethylindocarbocyanine iodide]   
保存条件 Store at -20℃, protect from light.
产品介绍 DiI, DiO, DiD and DiR dyes are a family of lipophilic fluorescent stains for labeling membranes and other hydrophobic structures. The fluorescence of these environment-sensitive dyes is greatly enhanced when incorporated into membranes or bound to lipophilic biomolecules such as proteins although they are weakly fluorescent in water. They have high extinction coefficients, polarity-dependent fluorescence and short excited-state lifetimes. Once applied to cells, these dyes diffuse laterally within the cellular plasma membranes, resulting in even staining of the entire cell at their optimal concentrations. The distinct fluorescence colors of DiI (orange fluorescence), DiO (green fluorescence), DiD (red fluorescence) and DiR (deep red fluorescent) provide a convenient tool for multicolor imaging and flow cytometric analysis of live cells. DiO and DiI can be used with standard FITC and TRITC filters respectively. Among them DiI and its analogs are most frequently used since they usually exhibit very low cell toxicity. In addition, DiI is widely used for determining lipoproteins such as LDL and HDL.

DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(橙色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(红色荧光)和 DiR (深红色荧光)这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分别用标准的 FITC和TRITC的滤光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比DiI更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。 DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。
储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
溶解性:可溶于无水乙醇、DMSO和DMF,其中在DMSO中溶解度大于10mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。

使用方法
1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS细胞膜染色液制备
(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
注意:未使用的储存液保存在-20 oC,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~5 µM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2. 悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3. 粘壁细胞的染色
(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
5. 流式细胞仪的检测
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。