creativemolecules DSS-H12/D12 说明书
DSS-H12/D12
= H-DSS-H12 X = D-DSS-D12产品信息DSS-H12/D12二琥珀酰亚胺基亚丁酸酯12 x 1 mg的1:1摩尔比混合物(DSS-H12和DSS-D12
目录号:编号:creativemolecules 001S
分子式:C16H20N2O8/C16D12H8N2O8
分子量:368/380特征:同位素编码。
膜渗透性。
用于死端交联的240/252铵离子。
DSS-H12/D12是一种膜渗透性、同双功能、同位素编码的交联剂二琥珀酰亚胺基丁二酸酯。试剂的轻(H12)和重(D12)形式的区别在于重形式的12个氘原子,而不是轻形式的12个氢原子,否则在化学上是相同的。同位素编码能够在质谱中明确检测交联产物。
DSS-H12/D12的反应产物将在质谱中表现为强度相等的双峰,对应于试剂的轻(H12)和重(D12)形式,以12.07573 Da除以电荷状态(+ 1为12.07,+ 2为6.04,+ 3为4.03等)。
在pH 7-9缓冲液中,N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯主要与伯氨基(-NH2)反应,形成稳定的酰胺键。因此,交联反应应避免使用含胺的缓冲液(Tris、甘氨酸、铵盐等)。
DSS不溶于水,应在有机溶剂(如DMSO或DMF)中制备贮备液,然后加入水性反应混合物中。为制备50 mM DSS-H12/D12储备液,向含有1 mg试剂的预称重管中加入53 μL DMSO。
使用以下公式计算肽交联质量:[M12 + H]+ =[M1 + H]+ +[M2 + H]+ + 137.06025[M1OH + H]+ =[M1 + H]+ + 156.07864[M1i + H]+ =[M1 + H]+ + + 138.06808[M1NH2 + H]+ =[M1 + H]+ + + 155.09462,其中M1、M2-游离肽质量;M12-肽间交联质量;M1OH-死端交联质量;M1i–肽内交联的质量;M1NH2–死端酰胺的质量(如果用铵盐淬灭反应)。
MS-Bridge)桥元素组成:C8 H10 O2;–OH死角的修饰元素组成:C8 H12 O3;–NH2死角的修饰元素组成:C8 H13 O2 N。
FLAG(DYKDDDDK)肽测试反应的典型MALDI质谱图如图1所示。试剂的轻(H12)形式的反应产物的质量为:1013–无FLAG肽;1151–肽内交联;1169–死端交联;2163–肽间交联。
MSMS光谱中对应于试剂赖氨酸铵离子修饰的240/252双峰信号表明存在–OH死端交联(参考文献1)。1、2)、(图2)。