EUROIMMUN microplate ELISA
EUROIMMUN微孔板ELISA
测试原理
- 涂有纯化，生化特性已鉴定的抗原的聚苯乙烯微孔板条用作包含结合抗原的固相。
- 如果样品呈阳性，则稀释的血清样品中的特异性抗体会附着在与固相偶联的抗原上。
- 第二步，用过氧化物酶标记的抗人抗体检测附着的抗体。
- 第三步，使用能够促进显色反应的色原/底物溶液使结合的抗体可见。产生的颜色强度与血清样品中抗体的浓度成正比。
- 单特异性ELISA（具有单个抗原的酶免疫测定）为检测抗体提供了定量的体外测定。“ Profile ELISA”提供了一种半定量体外测定法，用于检测单个微孔板条上的不同抗体。
- “ Pool ELISA”的固相涂有抗原混合物，用于半定量检测抗体，其特异性必须随后通过单特异性测定进行研究。
可靠，经济的校准/评估
- 在定量ELISA的情况下，通常使用三个校准血清进行校准。
-校准血清1：测量范围的上限
-校准血清2：正常范围的上限（临界值）
-校准血清3：阴性
- 无需孵育空白值或重复测定。
- 仅使用一个校准器即可进行半定量ELISA。在某些ELISA中可找到扩展的校准曲线，用于免疫测定或CSF诊断。
- 以相对单位（RU / ml）进行校准，如果存在参考血清，则以单位（IU / ml）进行校准。
- 可以选择使用测试套件中包含的阳性或阴性对照血清来执行每个测试。提供了每种校准物和对照血清的试剂盒特定参考范围。
- 使用常规ELISA软件可以轻松执行所有校准方法。
简单，快速，经济的处理
- 含有断裂孔的微孔板条（Profile ELISA除外）。
- 为避免混淆，微孔板条或试剂孔上印有抗原缩写。
- 准备使用的试剂（洗涤缓冲液：浓缩液）。
- 颜色编码可以清楚地识别试剂。
– 暗红色：校准血清1
– 红色：校准血清2
– 淡红色：校准血清3
– 深蓝色：阳性对照血清
– 绿色：阴性对照血清
-样品缓冲液和抗人Ig POD缀合物：不同的颜色
- 传染性血清学ELISA（检测IgM类抗体）的样品缓冲液已经包含IgG / RF吸收剂。
- 与所有商用洗衣机和阅读器系统兼容。
低抗体抗体的测定
- 通过研究抗体的亲和力已经建立了新鲜感染的血清学诊断的替代原理。
- 感染后免疫系统的一个反应是低抗体的形成。随着感染的进行，越来越多的抗原适应性IgG形成，并且亲和力增加。只要尚未在血清中检测到高亲和力的IgG，就可以认为感染仍处于早期阶段。
- 为了鉴定患者血清中的低抗体抗体，平行进行了两次酶标板ELISA：一项以常规方式进行测试，另一项包括在患者血清与过氧化物酶标记的抗人IgG孵育之间进行尿素处理，结果低抗原性抗体与抗原的分离。
- 如果通过尿素处理显着降低ELISA的灭绝率，则存在低抗体抗体。为了客观地解释，可以在有和没有尿素孵育的情况下，从测量值中计算出相对亲和力指数（RAI）。
- 血清稀释度1：100，共轭类抗人IgG，POD标记。
- 3点校准，定量（IgG）。
- 可以使用以下检测试剂盒来确定亲和力：弓形虫，CMV，麻疹病毒，风疹病毒，VZV，TBE病毒，EBV-CA。
脑脊液中的抗体测定
- 适应症：大脑局部感染。
- CSF稀释度1：2，血清稀释度1：404。缀合类别抗人IgG或IgM，POD标记。
- 易于操作：即用型试剂。
- 4点校准，定量。相同的孵育条件和时间（室温； 60分钟/ 60分钟/ 15分钟）：用于CSF诊断的所有EUROIMMUN ELISA可以毫无困难地组合在一块相同的微孔板上。
- 在一块相同的微孔板上平行于CSF中的抗体浓度确定患者血清中的抗体浓度。CSF /血清商CSQ 路径。从两个测量值计算得出。
- 如果特异性抗体CSQ 路径的CSF /血清商数存在，则存在鞘内特异性抗体的合成。显着高于整个IgG的CSF /血清商（CSQ total）或CSQ lim（如有必要）。。这两个值的关系表示相对CSF /血清商CSQ rel。（同义词：抗体特异性指数，ASI）。
- 结果解释（根据Reiber教授的建议）：
- CSQ rel。<0.6：结果不可靠，请检查
CSQ rel是否存在错误。0.6-1.3：标准范围 - CSQ rel。1.3-1.5：边界范围
CSQ 相对。> 1.5：指示中枢神经系统中病原体特异性抗体的产生 - 用于CSQ rel的自动计算。EUROIMMUN免费提供特定的Excel表。
- 高的灵敏度，特异性和可重复性。血清和脑脊液中的抗体浓度可以在整个线性测量范围内确定。
- 提供以下用于CSF诊断的测试试剂盒：伯氏疏螺旋体，弓形虫，HSV-1，HSV-2，HSV-1 / 2池，CMV，风疹病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，VZV，TBE，EBV-CA。
- 所有用于CSF诊断的测试系统也只能用于血清学。
- *适合于孵化设备中的自动孵化。
孵化
微孔板ELISA孵育
移液器：
每孔100 µl
孵育：
30分钟
| 洗涤：每孔 300 µl洗涤缓冲液 |
3倍 |
移液器：
每孔100 µl
孵育：
30分钟
| 洗涤：每孔 300 µl洗涤缓冲液 |
3倍 |
移液器：
每孔100 µl
孵育：
15分钟
移液器：
每孔100 µl
评估：
波长为450 nm的光度测量
另请参阅自动化选项。
执行测试时，将使用当前有效的测试指令。