Favorgen FASOI 001-1说明书

 

 

Favorgen FASOI 001-1说明书

Favorgen位于中国台湾国家生物技术园区。它通过自动化系统建立了ISO合格工厂,
生产高质量的分子生物学产品和临床化学试剂。目前,Favorgen在美国,中国,韩国和丹麦设立分支机构,并在30多个国家设立了分销网络。自成立以来,Favorgen已经在其先进的生产设施上投入了大量资金,以竞争力的价格为客户提供高质量的产品。Favorgen致力于通过与学术和行业合作伙伴的内部和合作开展研究,以不断提供高质量的创新产品。

 

 

核酸提取土壤DNA分离迷你试剂盒

Nucleic-acids extraction Soil DNA Isolation Mini Kit

核酸提取土壤DNA小试剂盒

FavorPrepTM  Soil DNA Isolation Mini Kit

Favorgen FASOI 001-1说明书

Cat.No. : FASOI 000, 4 preps

FASOI 001, 50 Preps

FASOI 001-1, 100 Preps

(For Research Use Only)

 

FASOI 000

(4 preps_sample)

FASOI 001

(50 preps)

FASOI 001-1

(100 preps)

 

 

Glass Beads

1 g

12 g

25 g

SDE1 Buffer

3.6 ml

40 ml

70 ml

SDE2 Buffer

1.2 ml

15 ml

25 ml

SDE3 Buffer

1.2 ml

15 ml

30 ml

SDE4 Buffer

1.5 ml

25 ml

40 ml

Wash Buffer (concentrate) *

1.5 ml

20 ml

40 ml

Elution Buffer

1.5 ml

25ml

50 ml

SDE Mini Column

4 pcs

50 pcs

100 pcs

Collection Tube

8 pcs

100 pcs

200 pcs

Elution Tube

4 pcs

50 pcs

100 pcs

Bead tube

4 pcs

50 pcs

100 pcs

User Manual

1

1

1

 

* Preparation of Wash Buffer for first use:

Cat. No:

FASOI 000

FASOI 001

FASOI 001-1

ethanol volume for Wash Buffer

6 ml

80 ml

160 ml

 

规格:

 

原理:自旋柱(硅胶膜)样品:0.25~0.5g

 

手术时间:<60分钟排气量:50~200毫升

重要说明:

 

本系统中提供的缓冲区包含刺激物。在处理这些缓冲器时,戴上手套和实验室外套。

 

使用前检查SDE 1缓冲液,如有沉淀,应在60℃温10分钟。

 

使用前,在洗涤缓冲液中加入适量乙醇(96%-100%)。

 

准备加热块或水浴至70°C。如果从革兰氏阳性细菌中分离出DNA,则准备加热块或水浴至95°C进行另一次培养。

 

所有的离心步骤都是在微型离心机中全速进行的(~18,000 x g)。

 

预热洗脱缓冲液或ddH2O至60°C为洗脱步骤。

 

 

“一般性议定书”:

 

在开始以下步骤之前,请阅读重要说明。

 

加入200毫克玻璃珠到2.0毫升珠管(提供)。将0.25~0.5g的土样移入珠管,然后放置在冰上。

 

-如果样品是液体的,在2.0毫升的珠管中加入200毫升的样品。

 

在样品中加入600升SDE 1缓冲器,以大速度旋转5分钟。将样品在70℃下孵育10 min,在孵育过程中旋转两次。

 

-从革兰阳性杆菌中分离DNA,在95℃下进一步孵育5分钟。

 

简单地旋转管子,以去除从盖子内部滴下来。

 

冷却样品混合物,加入200升SDE2缓冲液。通过涡旋使混合均匀。将样品在冰上孵育5分钟。

 

全速离心(~18,000×g)5分钟。

 

仔细地将澄清的上清液转移到1.5毫升的微离心管(未提供)。测量上清液的体积。

 

-避免将任何碎片和弹丸打穿。

 

加入1体积异丙醇和涡旋混合均匀,全速离心10 min,使DNA颗粒化。

 

-例如:如果澄清的溶解液体积为450升,则在澄清的裂解液中加入450升异丙醇。

 

小心丢弃上清液,在纸巾上倒置管1分钟,去除残留液体。

 

-不要打乱佩尔号

 

加入200升预加热排放缓冲液或ddH2O,旋涡使DNA颗粒*溶解。

 

在样品中加入100升SDE 3缓冲器,通过涡旋将其混合均匀。将样品在室温下孵育3分钟。

 

-注:SDE 3缓冲器必须在每次使用前,通过大力vrotexing*暂停。

 

-切断1毫升针尖的末端,使SDE 3缓冲器的插入更容易。

 

 

v 0515

 

全速离心2分钟。

 

小心地将上清液转移到1.5毫升的微离心机上(未提供)。测量上清液的体积。

 

-避免将任何碎片和弹丸打穿。

 

(可选)如果需要无RNA的DNA,加入1升100毫克/毫升的RNase A(不提供)到样品中,混合好。室温培养2 min。

 

简单地旋转管子,以去除从盖子内部滴下来。

 

加入1份SDE 4缓冲液和1份乙醇(96%~100%)。通过脉冲旋涡充分混合.

 

例如:当澄清液体积为250 l时,加入250升SDE 4缓冲液和250升乙醇(96%~100%)。

 

将SDE柱放入收集管中,并将所有样品混合物转移到SDE柱。全速离心1分钟,然后丢弃流过,然后将sde柱放入ne中。 W收集管。

 

加入750升洗涤缓冲液(乙醇添加)到SDE柱。全速离心1分钟,然后丢弃流道.

 

-确保在次使用时将乙醇(96%~100%)加入到洗涤缓冲液中。

 

重复第17步。

 

全速离心3分钟,干燥SDE柱。

 

-重要的一步!这一步将避免残留液体抑制后续的酶反应。

 

将SDE柱放入1.5毫升的微离心管(未提供)。在SDE塔膜中心加入50~200μl预热排液缓冲液或ddH2O。将SDE柱放置2分钟 室温。

 

-重要的一步!为了进行有效的洗脱,确保洗脱缓冲液或ddH2O被分配到膜中心并被*吸收。

 

全速离心1 min以逃避DNA。

 

发现并修理故障,解决纷争

 

问题

可能的原因

解答

基因组DNA的低产率或无产率

 

样本存储不当

粪便样本存放在-20°C。

样本中细胞数量少

增加样本量

不良细胞溶解

细胞溶解能力差,因为打珠不够 time

延长珠子打浆时间。

DNA与柱膜结合不足

在dna结合之前,没有在样品中加入乙醇。

确保在DNA结合之前,在样品中加入一定量的乙醇(96%-100%)。

乙醇和样品裂解液在DNA结合之前没有很好的混合。

确保乙醇和样品裂解液在dna结合之前已*混合。

W1/W2洗涤缓冲液制备不当

次使用时不加乙醇。

次使用时不加乙醇。

在洗涤缓冲液中加入乙醇的体积或百分比是不正确的。

次使用时,一定要将适量的乙醇(96%-100%)加入到洗涤缓冲液中。

DNA洗脱无效。

洗脱用水(DdH2O)的pH是酸性的。

确保ddH2O的pH值在7.0-8.5之间。

使用洗脱缓冲液(提供)进行洗脱。.

洗脱缓冲液或ddH2O不能被柱膜*吸收。

加入萃取缓冲液或ddH2O后,在离心前将SD柱放置5 min。

基因组DNA质量差

A 260/A 280

 

洗脱DNA率低

不良细胞溶解

细胞溶解能力差,因为打珠时间不够

延长珠子打浆时间。

A 260/A 280

 

洗脱DNA率高

洗脱DNA中的大量残留RNA

在洗脱液中加入8升RNase A(50 mg/ml),37℃孵育10 min。孵育后,加入200升SD2缓冲液和200升乙醇(96%~100%),混合均匀。

 

-涡旋。然后从第7步开始遵循“一般协议”。

 

 

FASOI 000

FavorPrep™土壤DNA分离迷你试剂盒

4个准备。

Glass Beads 
SDE1 Buffer 
SDE2 Buffer 
SDE3 Buffer 
SDE4 Buffer 
Wash Buffer 
Elution Buffer 
SDE Mini Column 
2 ml Collection tube Elution Tube 
Bead tube

在室温(15~25℃)下保存2年。

FASOI 001

50个准备。

FASOI 001-1

100个准备。

FASOI 002

FavorPrep™土壤DNA分离Midi试剂盒

24个准备。

Glass Beads 
SDE1 Buffer 
SDE2 Buffer 
SDE3 Buffer 
SDE4 Buffer 
Wash Buffer 
Elution Buffer 
SDE Midi Column 
50 ml Elution Tube

在室温(15~25℃)下保存2年。

 

 

 

 

 

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