genebridges K002说明书

计数器选择BAC修改套件

对于使用反选择盒的BAC修饰，也用于细菌染色体

• ID：K002

Counter Selection BAC Modification Kit

计数器选择BAC修改套件

特征

• 快速BAC修改（2-3周）

• 高红/ ET重组效率

• 方便地去除Red / ET质粒

• 效率远高于pSacB-neo系统

应用

• 片段交换

• 标记插入和删除，不留选择标记或任何不需要的序列

• 引入短序列，例如点突变，loxP位点，限制性位点等。

• 也可用于细菌染色体修饰和常见的ColE1起源质粒

描述

这是基于链霉素选择的反选择盒pRpsL-neo的新版本。该试剂盒设计用于通过使用反选择盒在2-3周内修饰任何类型的细菌人工染色体（BAC）。包括的反选择盒pRpsL-neo基于链霉素选择，其显示出比pSacB-neo或类似系统高得多的效率。该试剂盒还可用于细菌染色体和常见的ColE1起源质粒。该试剂盒结合了高Red / ET效率以及重组后方便去除Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET。

内容

• 红/ ET重组蛋白表达质粒pRed / ET。通过用该质粒转化，可以使任何大肠杆菌菌株Red / ET熟练

• BAC宿主大肠杆菌菌株DH10B已携带Red / ET质粒

• pRpsL-新霉素模板用于您自己的实验

• 在150kb BAC中引入点突变的阳性对照

• 详细的方案，质粒描述，图谱和序列

Sequences

rpsL-kan^R/neo^R selection cassette

promoter  rpsL  kan^R/neo^R 

GGCCTGGTGATGATGGCGGGATCGTTGTATATTTCTTGACACCTTTTCGGCATCG CCCTAAAATTCGGCGTCCTCATATTGTGTGAGGACGTTTTATTACGTGTTTACGA AGCAAAAGCTAAAACCAGGAGCTATTTAATGGCAACAGTTAACCAGCTGGTACGC AAACCACGTGCTCGCAAAGTTGCGAAAAGCAACGTGCCTGCGCTGGAAGCATGCC CGCAAAAACGTGGCGTATGTACTCGTGTATATACTACCACTCCTAAAAAACCGAA CTCCGCGCTGCGTAAAGTATGCCGTGTTCGTCTGACTAACGGTTTCGAAGTGACT TCCTACATCGGTGGTGAAGGTCACAACCTGCAGGAGCACTCCGTGATCCTGATCC GTGGCGGTCGTGTTAAAGACCTCCCGGGTGTTCGTTACCACACCGTACGTGGTGC GCTTGACTGCTCCGGCGTTAAAGACCGTAAGCAGGCTCGTTCCAAGTATGGCGTG AAGCGTCCTAAGGCTTAAGGAGGACAATCATGATTGAACAAGATGGATTGCACGC AGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGCTATTCGGCTATGACTGGGCACAACAG ACAATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTTCCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGG TTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGTGCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGC AGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGGGCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGAC GTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCTGCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGG ATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCCGAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGC AATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGGCTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCG AAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCGGATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGG ATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTCGCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCT CAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATCTCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGC TTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCGCTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCC GGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGACATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGC TGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACCGCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCC GCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTATCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGA

genebridges K003说明书 

BAC Subcloning Kit

BAC亚克隆试剂盒

用于从BAC和粘粒亚克隆DNA片段

• ID：K003

特征

• 不需要限制站点

• 高20 kb的碎片可以亚克隆

• 高红/ ET效率

• 重组后方便地去除Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET。

应用

• Basepair将来自BAC的DNA片段亚克隆到高拷贝质粒骨架中

描述

可以包含大插入物的大肠杆菌载体，例如细菌人工染色体（BAC），为功能基因组学提供了若干优势。它们可携带足够的DNA以包含大多数真核基因，包括所有顺式作用调节元件，以及许多真核基因簇，原核调节子和许多完整的病毒基因组，在单个分子中。然而，常规克隆方法依赖于使用限制酶和体外纯化步骤，这阻碍了大分子的工程化。因此，这种分子的有用性直到近才受到限制。

BAC亚克隆试剂盒旨在通过Red / ET重组从任何类型的细菌人工染色体（BAC）有效地将高达20kb的大DNA片段亚克隆到质粒载体中。

红色/ ET重组（重组工程）是允许设计任何大小的DNA分子的方法，包括非常大的DNA分子，如BAC或大肠杆菌染色体。它依赖于在体内同源重组的大肠杆菌，并允许范围广泛的具有DNA分子修饰在任何选定的位置上。

内容

• 红/ ET重组蛋白表达质粒pRed / ET，任何大肠杆菌菌株均可通过该质粒转化而成为Red / ET精通

• 携带ColE1复制起点加上氨苄青霉素抗性基因的线性载体用于亚克隆实验

• 阳性对照将来自对照BAC的15kb片段亚克隆到用试剂盒递送的载体中

• 详细的方案，质粒描述，图谱和序列

Sequences

ColE1-amp minimal vector

amp^R ColE1 ORI

GCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAAC GGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAA GCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTTGTTT ATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAA ATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCG CCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAAC GCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATC GAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTT TTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTGT TGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTG GTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAG AATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCT GACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGAT CATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACG ACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATT AACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAG GCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTA TTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACT GGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAG GCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTA AGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTACG CGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGAC CGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTT CTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAG GGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGA TGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTG GAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTTGAACAACACTCAACC CTATCTCGGGCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTG GTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTA ACGTTTACAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACC AAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGA TCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAAC AAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACT CTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTC TAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATA CCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGT CTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCT GAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACT GAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAG GCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGC TTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTG ACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAAC GCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACA TGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGA GTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGC GAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTA TTTCACACCGCATAGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGAC GCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGT

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