Haematologic HCP-0010说明书
HTI HCP-0010
Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注册公司，是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质，以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质，包括酶原，酶，辅因子和抑制剂，以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管，用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化，蛋白质修饰，化验开发，合同制造和合同研究。
Haematologic HCP-0010说明书
Prothrombin and Fragments
凝血酶原和片段
凝血酶原
的结构域表示凝血酶原的结构域结构，其中：GLA =含有γ-羧基谷氨酸残基的区域，KRINGLE =内部序列同源性区域，催化域=含有丝氨酸蛋白酶催化三联体的区域。箭头表示在酶原激活期间被因子Xa蛋白水解切割的位点。
HCP-0010 人体凝血酶原
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尺寸 |
2毫克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
凝血试验 |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
HCP1-0010 人类凝血酶原片段1
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尺寸 |
1毫克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
N / A |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
HCP12-0010 人类凝血酶原片段1.2
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尺寸 |
1毫克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
N / A |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
HCP2-0010 人类凝血酶原片段2
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尺寸 |
1毫克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
N / A |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
HCP1-0011 人类凝血酶原-1
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尺寸 |
1毫克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
N / A |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
HCP2-0011 人类凝血酶原-2
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尺寸 |
1毫克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
N / A |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
BCP-1010 牛凝血酶原
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尺寸 |
2毫克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
凝血试验 |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
MCP-5010 鼠标凝血酶原
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尺寸 |
100微克 |
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公式 |
Hepes缓冲盐水 |
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存储 |
-80℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
凝血试验 |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
· 概观
凝血酶原是一种维生素K依赖性血浆蛋白，在肝脏中合成（1）。在分泌到血浆中之前，凝血酶原通过维生素K依赖性羧化酶进行翻译后修饰，该羧化酶将10种特异性谷氨酸残基转化为γ-羧基谷氨酸（gla）。10个gla残基位于成熟蛋白质的前40个氨基酸内，并且有助于凝血酶原结合带负电荷的磷脂膜的能力。凝血酶原包含两个内部同源区域，称为“kringle”结构。这些显着的二级结构区域位于成熟血浆蛋白的残基40和270之间，并取代在几种其他血浆丝氨酸蛋白酶中发现的生长因子结构域。到目前为止，这些地区没有任何功能，但有人怀疑它们可能在涉及凝血酶原的几种二元蛋白质相互作用中发挥作用。成熟的单链蛋白质作为酶原在血浆中循环，并且在凝固过程中，蛋白水解活化成有效的丝氨酸蛋白酶α-凝血酶。这种蛋白水解是由凝血酶原酶复合物催化的。在激活期间，凝血酶原在Arg271-Thr272（人）/ Arg273-Thr274（牛）和Arg320-Ser321（人）/ Arg323-Ser324（牛）切割成“pro”片段（片段1.2）和凝血酶，后者其中两条链由二硫键共价连接。在人凝血酶原/凝血酶的情况下，在Arg284-Thr285处存在另外的凝血酶反馈切割，导致从成熟凝血酶“A”链中除去另外的13个氨基酸。
如Bajaj及其同事所述，人凝血酶原由新鲜冷冻的人血浆制备（2）。使用Owen及其同事描述的方法的改进，从新鲜牛血浆制备牛凝血酶原（3）。纯化的凝血酶原以50％（vol / vol）甘油/ H2O供应，应储存在-20oC。通过SDS-PAGE分析测定纯度，并在凝血酶原转化为凝血酶后通过凝固和/或生色底物测定来测量活性。
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凝胶 |
Novex 4-12％Bis-Tris |
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加载 |
每道1微克; 纯化的人凝血酶原 |
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缓冲 |
MOPS |
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标准 |
SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脱氢酶（51 kDa），酒精脱氢酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌红蛋白红（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的） |
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本土化 |
等离子体 |
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血浆浓度 |
100μg/ ml（1） |
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分子量 |
72,000（1,4,5）。 |
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消光系数 |
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等电点 |
4.7-4.9（人类）（6） |
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结构体 |
单链，NH2-末端gla域，两个kringle区域 |
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碳水化合物百分比 |
8.2％（人类）（4） |
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翻译后修改 |
十个玻璃残渣（4,5） |
- Mann，KG等，Methods in Enzymology，45,156（1976）。
- Bajaj，SP，et al。，Prep。Biochem。，11,397（1981）。
- Owen，WG，et al。，J.Biol.Chem。Chem。，249,594（1974）。
- Kisiel，W.，et al。，Biochem。生物物理学。Acta，304,103（1973）。
- Magnusson，S.，et al。，In Proteases in Biological Control，ed。E. Reich，DB Rifkin，E。Shaw，pp.123-149。纽约：冷泉港实验室，1975年。
- Discipio，RG等，Biochemistry，18,899（1979）。
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