genebridges K002说明书


genebridges K002说明书

 

计数器选择BAC修改套件

对于使用反选择盒的BAC修饰,也用于细菌染色体

  • ID:K002

 

 

Counter Selection BAC Modification Kit

计数器选择BAC修改套件

 

特征

  • 快速BAC修改(2-3周)

  • 高红/ ET重组效率

  • 方便地去除Red / ET质粒

  • 效率远高于pSacB-neo系统

应用

  • 片段交换

  • 标记插入和删除,不留选择标记或任何不需要的序列

  • 引入短序列,例如点突变,loxP位点,限制性位点等。

  • 也可用于细菌染色体修饰和常见的ColE1起源质粒

 

描述

 

这是基于链霉素选择的反选择盒pRpsL-neo的新版本。该试剂盒设计用于通过使用反选择盒在2-3周内修饰任何类型的细菌人工染色体(BAC)。包括的反选择盒pRpsL-neo基于链霉素选择,其显示出比pSacB-neo或类似系统高得多的效率。该试剂盒还可用于细菌染色体和常见的ColE1起源质粒。该试剂盒结合了高Red / ET效率以及重组后方便去除Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET。

内容

  • 红/ ET重组蛋白表达质粒pRed / ET。通过用该质粒转化,可以使任何大肠杆菌菌株Red / ET熟练

  • BAC宿主大肠杆菌菌株DH10B已携带Red / ET质粒

  • pRpsL-新霉素模板用于您自己的实验

  • 在150kb BAC中引入点突变的阳性对照

  • 详细的方案,质粒描述,图谱和序列

 

Sequences

rpsL-kanR/neoR selection cassette

promoter  rpsL  kanR/neoR 

GGCCTGGTGATGATGGCGGGATCGTTGTATATTTCTTGACACCTTTTCGGCATCG CCCTAAAATTCGGCGTCCTCATATTGTGTGAGGACGTTTTATTACGTGTTTACGA AGCAAAAGCTAAAACCAGGAGCTATTTAATGGCAACAGTTAACCAGCTGGTACGC AAACCACGTGCTCGCAAAGTTGCGAAAAGCAACGTGCCTGCGCTGGAAGCATGCC CGCAAAAACGTGGCGTATGTACTCGTGTATATACTACCACTCCTAAAAAACCGAA CTCCGCGCTGCGTAAAGTATGCCGTGTTCGTCTGACTAACGGTTTCGAAGTGACT TCCTACATCGGTGGTGAAGGTCACAACCTGCAGGAGCACTCCGTGATCCTGATCC GTGGCGGTCGTGTTAAAGACCTCCCGGGTGTTCGTTACCACACCGTACGTGGTGC GCTTGACTGCTCCGGCGTTAAAGACCGTAAGCAGGCTCGTTCCAAGTATGGCGTG AAGCGTCCTAAGGCTTAAGGAGGACAATCATGATTGAACAAGATGGATTGCACGC AGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGCTATTCGGCTATGACTGGGCACAACAG ACAATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTTCCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGG TTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGTGCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGC AGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGGGCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGAC GTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCTGCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGG ATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCCGAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGC AATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGGCTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCG AAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCGGATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGG ATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTCGCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCT CAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATCTCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGC TTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCGCTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCC GGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGACATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGC TGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACCGCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCC GCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTATCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGA

 

 

genebridges K003说明书


genebridges K003说明书 

BAC Subcloning Kit

BAC亚克隆试剂盒

用于从BAC和粘粒亚克隆DNA片段

  • ID:K003

特征

  • 不需要限制站点

  • 高20 kb的碎片可以亚克隆

  • 高红/ ET效率

  • 重组后方便地去除Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET。

应用

  • Basepair将来自BAC的DNA片段亚克隆到高拷贝质粒骨架中

 

描述

可以包含大插入物的大肠杆菌载体,例如细菌人工染色体(BAC),为功能基因组学提供了若干优势。它们可携带足够的DNA以包含大多数真核基因,包括所有顺式作用调节元件,以及许多真核基因簇,原核调节子和许多完整的病毒基因组,在单个分子中。然而,常规克隆方法依赖于使用限制酶和体外纯化步骤,这阻碍了大分子的工程化。因此,这种分子的有用性直到近才受到限制。

BAC亚克隆试剂盒旨在通过Red / ET重组从任何类型的细菌人工染色体(BAC)有效地将高达20kb的大DNA片段亚克隆到质粒载体中。

红色/ ET重组(重组工程)是允许设计任何大小的DNA分子的方法,包括非常大的DNA分子,如BAC或大肠杆菌染色体。它依赖于在体内同源重组的大肠杆菌,并允许范围广泛的具有DNA分子修饰在任何选定的位置上。

内容

  • 红/ ET重组蛋白表达质粒pRed / ET,任何大肠杆菌菌株均可通过该质粒转化而成为Red / ET精通

  • 携带ColE1复制起点加上氨苄青霉素抗性基因的线性载体用于亚克隆实验

  • 阳性对照将来自对照BAC的15kb片段亚克隆到用试剂盒递送的载体中

  • 详细的方案,质粒描述,图谱和序列

 

Sequences

ColE1-amp minimal vector

 

ampR ColE1 ORI

 

GCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAAC GGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAA GCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTTGTTT ATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAA ATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCG CCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAAC GCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATC GAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTT TTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTGT TGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTG GTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAG AATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCT GACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGAT CATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACG ACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATT AACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAG GCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTA TTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACT GGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAG GCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTA AGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTACG CGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGAC CGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTT CTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAG GGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGA TGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTG GAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTTGAACAACACTCAACC CTATCTCGGGCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTG GTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTA ACGTTTACAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACC AAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGA TCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAAC AAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACT CTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTC TAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATA CCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGT CTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCT GAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACT GAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAG GCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGC TTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTG ACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAAC GCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACA TGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGA GTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGC GAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTA TTTCACACCGCATAGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGAC GCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGT

 

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