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Our company is working to develop improved technology for detecting, analyzing and manipulating genes. The core area of our research is PCR (Polymerase Chain Reaction), which is a method for amplifying targeted sequences of DNA. To this end, we are developing new enzymes capable of amplifying longer targets, with higher fidelity, more quickly, and in spite of inhibitory contaminants such as blood or soil. Our hot-start products improve the specificity of primer binding and help prevent “wrong bands”.

klentaq的5'-核酸外切酶缺陷Taq聚合酶可提供更高的保真度和热稳定性，尤其是作为LA（长效）酶混合物的一部分时。

• Klentaq1是Taq DNA聚合酶的Klenow片段类似物。它是Taq已知热稳定的形式，不具有核酸外切酶或核酸内切酶，并且其晶体结构已知。
• LA（长效）版本的酶是Klentaq1和校对酶的混合物。

klentaq产品 

KlenTaq-S说明书

           KlenTaq-S是一种热稳定性 DNA聚合酶，由基因的 5' 缺失和 Tabor 和 Richardson 的点突变 F667Y 表达，编码栖热菌 DNA 聚合酶。该酶进行聚合酶链反应的速度比 KlenTaq1 和全长 Taq DNA 聚合酶慢，但它接受的 ddNTP 是 Taq 的 100-5000 倍。已经发现这种酶 KlenTaq-S 最重要的特性是在焦磷酸解活化聚合 (PAP) 反应中，在该反应中可以在数十亿个野生型等位基因拷贝中检测到单个碱基突变（Liu 和 Sommer：生物技术，第 36 卷，第 156-166 页，2004 年）。到达后将酶储存在 -200°C。 

       储存缓冲液中的甘油可防止在 -200 C 下冻结，但非离子洗涤剂 Thesit 在此温度下会导致一些增稠。这是可选的，但建议在分配前在冰上加热至 00 C。对于长期储存，可以采用 -70 到 -800°C，但我们确保酶冷冻不超过两次。重新冷冻和解冻会导致酶活性降低。储存缓冲液为 50% 甘油 (v/v; 63% w/v)、50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。摩尔。重量 : ~ 62 kD

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KlenTaq1说明书

KlenTaq1是一种热稳定性 DNA 聚合酶，由基因的 5' 缺失表达，编码 Thermus Aquaticus DNA 聚合酶，留下高活性甚至更耐热的 DNA 聚合酶活性。在反应缓冲液 PC2 中反复暴露于 980°C 似乎不会降低酶活性。即使暴露于 990°C 后仍保持显着活性。全长酶不能耐受这些处理。              ‍‍‍

  所述   KlenTaq1 ™酶缺少野生型全长Taq DNA聚合酶的N-末端部分。这部分蛋白质与大肠杆菌 DNA 聚合酶 1 的 5' – 核酸外切酶区域同源。  因此，KlenTaq1 ™ 与 Hoffman LaRoche 的 Stoffel 片段相似但又不同。           

     对于KlenTaq1不含甘油（目录号1001 NGKT）：储存酶，并于4℃下的缓冲液中。储存缓冲液为 50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。               

对于50% 甘油中的KlenTaq1 （货号 1001）：将酶储存在 -200°C，将缓冲液储存在 40°C。储存缓冲液中的甘油可防止在 -20°C 下冻结，但 Thesit 在此温度下会导致一些增稠。它是可选的，但建议在分配前在冰上加热至 0°C。对于长期储存，可以采用 -70°C 或 -80°C，但我们建议酶不要冷冻超过一次。重新冷冻和解冻会导致酶活性降低。储存缓冲液为 50% 甘油 (v/v; 63% w/v)、50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。               

  浓度：5 个  KlenTaq1™单位（72°C 下 30 分钟内掺入 60 nmole）。活化的鲑鱼精z DNA 是模板；PC2（见下文）是缓冲区。注意，这些单位比标准单位大 6 倍。以标准单位（10 nmole/30 分钟）计算，此处的酶浓度约为 30 单位/毫升。                   

尽管该酶在各种条件下都能很好地发挥作用，但推荐的反应缓冲液 PC2 是：50 mM Tris-HCl pH 9.1、16 mM 硫酸铵、3.5 mM MgCl2 和 150 mg/ml BSA（随订单提供） . 请注意，与热稳定 DNA 聚合酶的其他缓冲液相比，不含 KC1 和明胶。dNTP 浓度可以从每个 50 µM 到每个 1.2 mM，但通常使用 200 µM。如果 DNA 掺入超过 500 bp，您将需要比 Taq 蛋白更多的KlenTaq1™蛋白。如果使用与全长 Taq DNA 聚合酶相同的量（罗氏推荐），KlenTaq1™ 以 25-30 u/µl 的浓度运输，因此它可以轻松整合 2000 bp。
                   

 1 DNA 掺入单位 = 10 nmoles / 30 min='标准单位'。罗氏的酶每微升含有 5 个“标准单位”。KlenTaq1™每微升含有 25-30 个“标准单位”。               

      罗氏建议每 100 微升反应使用 0.5 微升；也就是说，1 微升将催化 2 个反应。进行反应所需的KlenTaq1™量取决于掺入的长度。对于KlenTaq1™ ，在 100 微升反应中，1 微升将催化 15-20 次 500 bp 反应和 8-10 次 1 kb 反应和 3-5 次 2kb 模板 DNA 反应。由于过量的 KlenTaq1™ 是无害的，我们保守地建议每次反应使用 0.50 微升，以确保最大 2.5 kb 的所有物质都有效。这就是我们检查和滴定酶的方法。

参考巴恩斯，WM，基因，卷。112，第 29-35 页，1992 年。巴恩斯，WM，PNAS，卷。19，第 2216-2220 页，1994 年 3 月。Baskaran, N. 等，基因组研究，卷。6，第 633-638 页，1996 年。
NB 对于KlenTaq1不含甘油（目录号1001 NGKT）：储存酶，并于4℃下的缓冲液中。  对于50% 甘油中的KlenTaq1 （目录号 1001）：将酶储存在 -200°C，将缓冲液储存在 40°C。