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Kamiya Biomedical Company是一家1983年3月成立的美国生命科学技术公司，总部位于美国加利福尼亚州。本公司致力于为生命科学研究和医药机构提供高质量的具有创新性的基础研究和诊断试剂。

公司的zui早的生命科学研究产品是用于信号转导研究用蛋白酶抑制剂星形孢菌素和K252a。1990年，KAMIYA*家在美国推出凋亡研究的重要抗体anti-Fas单克隆抗体。1997年推出了一个完整的临床诊断和研究用免疫检测产品线，生产基于免疫投射比浊法的脂质测定、凝血、炎症、糖尿病、营养评估及血脂蛋白测定试剂及试剂盒。公司研发的K-ASSAY试剂无需搅拌、溶解和稀释样本等繁杂程序。

如今，KAMIYA供应的生命科学系列产品包括世界上zui大的ELISA试剂盒产品线，上万种人类的生物标志物分析的产品、酶抑制剂、单抗、多抗。产品广泛应用于细胞凋亡、多抗药性、氧化/ DNA损坏和修复、骨生物学、癌症、心脏健康、炎症、压力与应激、肥胖和糖尿病等研究领域。

zui近，KAMIYA又推出了创新性的基于K-ASSAY化学检测试剂的胰岛素、D-二聚体(D-Dimer)，Factor XIII，纤维蛋白原降解产物(Plasma FDP)，血清/尿液FPD及FDP-E(纤维蛋白原降解产物E片段)和总IgE等因子的检测试剂。

KAMIYA现在拥有zui全的血清蛋白免疫检测试剂产品线，为医院、医疗中心、临床实验室、临床参考实验室、研究所等众多机构提供专业的临床诊断和科研试剂产品。

货号：KT-642

品名：Monkey Cardiac Troponin-I, High Sensitive ELISA（高敏肌钙蛋白I ELISA试剂盒，猴子）

产品介绍

肌钙蛋白是横纹肌收缩调节蛋白复合物。它由三个亚单位组成：肌钙蛋白I、T和C。I存在三种异构体；一在快肌骨骼肌，一个在慢肌骨骼肌，另一个在心肌。肌肉损伤或缺血后，肌钙蛋白被释放到血液中，肌钙蛋白的含量水平与组织损伤密切相关。心肌肌钙蛋白I（cTnI）序列与骨骼肌亚型明显不同，从而促进了cTnI特异性抗cTnI抗体的生成和免疫特异性的发展。由于cTnI在心脏中的特异性表达，它提供了一种特异的心脏损伤生物标记物。

工作原理  

高敏猴肌钙蛋白I ELISA试剂盒使用两亲和纯化抗体，一种兔抗cTnI多克隆抗体用于将固相载体固定在微孔板上，另一种山羊抗cTnI肽特异性多克隆抗体与辣根过氧化物酶（HRP）结合，用于检测。样品（血清或血浆）和校准（200µL）被移进微孔板震荡孵化2h后，添加100ul稀释剂和100ulHRP共轭抗cTnI抗体到微孔板上，然后平板摇床孵化1h。在这个步骤中，cTnI被夹在固相和HRP结合的抗体之间。然后洗涤微孔板去除未结合的辣根过氧化物酶共轭抗体。添加HRP底物TMB 100µL，孵育20分钟，结果出现蓝色。加入100ul 1N HCl使发色终止，改变颜色为黄色，在450 nm处测量吸光度值。cTnI浓度与450 nm处吸光度值成正比，可由校准曲线得出。

校准品的制备

为制备至少两条校准曲线提供了足够的试剂。

• 试剂盒组成平衡至室温后使用。
• 加200 ul去离子水或蒸馏水使用储存的冻干血清cTnI复原。轻轻搅拌超过5min。
• 添加7支聚丙烯管标签分别为2.5，1.25，0.625，0.312，0.156，0.078和0.039 ng/ml。
• 在标记为2.5ng/ml的管中，移入983.06µL cTnI稀释剂，16.94µL cTnI库存产品轻轻混合。即为2.5ng/ml的校准液。
• 吸取0.50ml的cTnI稀释到标记1.25，0.625，0.312，0.156，0.078和0.039ng/ml的管中。
• 通过稀释和混合0.50ml 2.5ng/ml的校准液和0.50ml的稀释剂，即可配制得到1.25ng/ml的校准液。同样通过连续稀释制备0.625，0.312，0.156，0.078，和0.039ng/ml的校准液。

备注：复原后的cTnI库存产品应在使用后立即冻结。它在冷冻状态下保持稳定。-20°至少1个月，-70°保存6个月。使用后的校准液丢弃。

检测操作过程

1. 将所需用的微孔板固定到支架是；

2. 取200ul 校准液和样品到合适的微孔板上；

3. 150 rpm摇床25°C孵化2h；

4. 使用洗板洗涤微孔板5次，每孔400ul洗涤液，整个过程应快速进行；

5. 用吸附纸或纸巾吸附微孔板，以除去所有残留的液体；

6. 每孔添加100ul cTnI稀释剂；

7. 添加100ul HRP共轭复合物到每个微孔中；

8. 150 rpm摇床25°C孵化1h；

9. 按步骤4和5清洗微孔板；

10. 吸取100ul TBM试剂到每个微孔中；

11. 150 rpm摇床25°C孵化20min；

12. 每个微孔中添加100ul 终止液终止反应；

13. 轻轻混合直到所有的蓝色变成黄色；

14. 在5min内读取溶液450nm处的吸光度值；

15. 如果吸光度值超过了校准品的zui高值，样品就适当稀释并重新测定。

标准曲线的绘制

产品链接：http://www.k-assay。。ｃｏｍ/cgi-bin/search.cgi?search=KT-642&table=&species=&int=&app=&language=english