Favorgen FABGK000-Maxi说明书
Favorgen位于中国台湾国家生物技术园区。它通过自动化系统建立了ISO合格工厂，
生产高质量的分子生物学产品和临床化学试剂。目前，Favorgen在美国，中国，韩国和丹麦设立分支机构，并在30多个国家设立了分销网络。自成立以来，Favorgen已经在其先进的生产设施上投入了大量资金，以竞争力的价格为客户提供高质量的产品。Favorgen致力于通过与学术和行业合作伙伴的内部和合作开展研究，以不断提供高质量的创新产品。
Nucleic-acids extraction Genomic DNA Extraction
核酸提取基因组DNA提取
Favorgen FABGK000-Maxi说明书
FavorPrepTM Blood / Cultured Cell Genomic DNA Extraction Maxi Kit
(For Research Use Only)
Cat. No.
/ preps
FABGK000-Maxi
(2 preps)
FABGK003
(10 preps)
FABGK003-1
(24 preps)
Proteinase K powder+ 11 mg x 2 11 mg x 10 11 mg x 24
FABG Buffer 22 ml 110 ml 265 ml
W1 Buffer* (concentrated) 6.5 ml 33 ml 88 ml
Wash Buffer** (concentrated) 3 ml 20 ml 40 ml
Elution Buffer 6 ml 30 ml 60 ml
FABG Maxi Column 2 pcs 10 pcs 24 pcs
Elution Tube (50 ml tube) 2 pcs 10 pcs 24 pcs
User Manual 1 1 1
Preparation of ProteinaseK solution (20mg/ml) and Wash Buffer for first use:
|
Cat. No:
|
FABGK000-Maxi
(2 preps)
|
FABGK003
(10 preps)
|
FABGK003-1
(24 preps)
|
|
+ ddH2O volume for Proteinase K
|
0.5 ml
|
|
* ethanol volume for Wash Buffer W1
|
2.5 ml
|
12 ml
|
32 ml
|
|
**ethanol volume for Wash Buffer W2
|
12 ml
|
80 ml
|
160 ml
|
规格:
原理：自旋柱(硅胶膜)
样本大小：新鲜/冷冻血液10毫升；培养细胞1×10 8
柱容量：500微克DNA
平均DNA产量：35g/1ml全血处理时间：1小时
洗脱体积：0.75~1.5ml
需由用户提供的材料
吸管和管尖
离心机：应能产生4，000克热孵化器的力
烘箱(可选)乙醇(96%~100%)涡旋
重要说明：
本系统中提供的缓冲区包含刺激物。在处理这些缓冲器时，戴上手套和实验室外套。
手术前将热孵化器预热至60°C。
在所有的离心步骤中，使用带有摆动桶转子的离心机和4，000~6，000克的力。
将500升无菌的ddH2O加入到延长K管中，制成22毫克/毫升的原液。确定蛋白酶K粉已*溶解。将库存溶液存放在4°C。
为步骤11(释放步骤)过热释放缓冲器或ddH2O。
血液DNA提取协议
在开始以下步骤之前，请阅读重要说明。
将多达10毫升的样本(全血、布菲大衣)转移到50毫升离心管(未提供)。
–如果样品体积小于10mL，则加入PBS使体积达到10mL。
在样品中加入500升蛋白酶K(20 mg/ml)，用旋涡法搅拌均匀。在样品混合物中加入10毫升的光纤光栅缓冲液。通过脉冲旋涡充分混合.
-不要直接将蛋白酶K添加到FABG缓冲液中。
将样品混合物在60℃下孵育15分钟，以使样品分离。在孵化过程中，每3-5分钟倒置一次.
(可选)：如果需要无RNA的基因组DNA，在样品混合物中加入80毫升100毫克/毫升的核糖核酸酶A(未提供)，在室温下孵育10分钟。
在样品中加入10 ml乙醇(96~100%)。通过漩涡充分混合。如果出现沉淀物，就用喷入的方法打破它。
将FABG Maxi柱放置在50毫升离心管上(未提供)。并将15毫升的样品混合物(添加乙醇)(包括任何沉淀物)仔细转移到FABG Maxi柱。关上盖子 4，000~6，000×g离心3 min。
一
英语字母表的第22个字母 1115
丢弃流道，将剩余的样品混合物转移到相同的FABG Maxi柱上.关闭盖和离心机在4，000~6，000 x g，3分钟，并丢弃流过.
8在FABG Maxi柱上加入4ml W1缓冲液(乙醇加乙醇)。关闭盖子，在4，000~6，000×g离心3 min。丢弃流道，将fbg maxi柱放回50毫升。 离心管。
-确保乙醇在次打开时已加入W1缓冲液。
在FABG Maxi柱上加入7毫升的洗涤缓冲液(加入乙醇)。关闭盖子，在4，000~6，000×g离心15 min。丢弃流道，将fbg maxi柱放回50毫升。 离心管。
–在次打开时，确保已将乙醇添加到清洗缓冲液中。
-重要的一步！确保离心后残余液体被*除去。可能需要在70°C的真空烘箱中继续干燥3英里。 lutes[人名] 卢茨
将FABG Maxi柱放入新的50毫升离心管中。(洗脱管，提供)
FABG Maxi柱膜中心加入0.75~1.5ml预热洗脱缓冲液或ddH2O(pH7.5-9.0)。将FABG马溪柱在室温下放置5 min。
-重要的一步！若要进行有效洗脱，需在FABG Maxi柱上放置5分钟，以确保洗脱缓冲液被柱膜*吸收。
-标准体积为0.75~1.5ml。如果需要更高的DNA产量，重复DNA排出步骤(步骤11)，以提高DNA恢复。
4，000×g离心2分钟，以逃避总DNA。
程序：(用于培养细胞DNA的提取)
将多达1×108个细胞转移到50毫升离心管(未提供)。4，000~6，000 x g离心5 min，使细胞颗粒化。(如果使用贴壁细胞，则在Harv之前将细胞胰蛋白酶化。 besting1。[口]打败，胜过( best的现在分词 )
用10毫升PBS刺激细胞。
从第4步开始遵循血液协议。
发现并修理故障，解决纷争
|
Possible reasons
|
Solutions
|
|
Low or no yield of genomic DNA
|
|
Poor cell lysis
|
|
Poor cell lysis because of insufficient Proteinase K activity
|
Repeat the extraction procedure with a new sample. Use a fresh
or well-stored Proteinase K stock solution.
|
|
Poor cell lysis because of insufficient mixing with FABG buffer
|
Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the sample and FAGB Buffer immediately and thoroughly by pulse-vortexing.
|
|
Poor cell lysis because of insufficient incubation time
|
Repeat the extraction procedure with a new sample. Extend the incubation time and make sure that no residual particulates remain.
|
|
Ethanol is not added into the lysate before transfer- ring into FAGB Maxi Column
|
Repeat the extraction procedure with a new sample.
|
|
Incorrect preparation of Wash Buffer
|
|
Ethanol is not added into W1 and Wash Buffer when first
|
Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample.
|
|
The volume or the percent- age of ethanol is not correct before adding into W1 and Wash Buffer
|
Make sure that the correct volumes of ethanol (96- 100 %) is added into W1 and Wash Buffer when first open. Repeat the extraction procedure with a new sample.
|
|
Possible reasons
|
Solutions
|
|
Elution of genomic DNA is not efficient
|
|
pH of water elution is acidic
|
(ddH2O)
|
for
|
Make sure the pH between 7.5- 9.0.
|
of ddH2O
|
is
|
|
Use Elution Buffer elution.
|
(provided)
|
for
|
|
Elution Buffer or ddH2O is not completely absorbed by column membrane
|
After Elution Buffer or ddH2O is added, stand the FAGB Maxi Column for 5 min before centrifuga-
|
|
Column is clogged
|
|
Blood sample contains clots
|
Repeat the extraction procedure with a new sample. Mix the blood sample well with anti-coagulant to prevent formation of blood clots.
|
|
Sample is too viscous
|
Reduce the sample volume.
|
|
Degradation of elutated DNA
|
|
Sample is old
|
Always use fresh or well-stored sample for genomic DNA extraction.
|
|
Buffer for gel electrophoresis contaminated with DNase
|
Use fresh running buffer for gel electrophoresis.
|
基因组DNA提取血液DNA Mini / Midi / Maxi试剂盒
|
FABGK 000
|
FavorPrep™血液/培养细胞基因组DNA提取迷你试剂盒
|
4个准备。
|
蛋白酶K粉末
FATL缓冲液
FABG缓冲液
W1缓冲液
洗涤缓冲液（浓）
洗脱缓冲液
FABG迷你柱
2ml收集管
1.5ml洗脱管
|
在室温（15~25℃）下保存2年。
除蛋白酶K粉外，贮存于4℃。
|
|
FABGK 001
|
50个准备。
|
|
FABGK 001-1
|
100个准备。
|
|
FABGK 001-2
|
300个准备。
|
|
FABGK 100
|
FavorPrep™血液/培养细胞基因组DNA提取迷你试剂盒
|
100个准备。
|
RBC裂解缓冲液 FATL缓冲液 FABG缓冲液 W1缓冲液 洗涤缓冲液（浓） 洗脱缓冲液FABG迷你柱 2ml收集管
|
在室温（15~25℃）下保存2年。
除蛋白酶K粉外，贮存于4℃。
|
|
FABGK 300
|
300个准备。
|
|
FABGK 002-S
|
FavorPrep血液/培养细胞基因组DNA提取Midi试剂盒
|
2个准备。
|
蛋白酶K粉末
FABG缓冲液
洗涤缓冲液W1（浓）
洗涤缓冲液W2（浓）
洗脱缓冲液
FABG Midi柱
15 ml洗脱管
|
在室温（15~25℃）下保存2年。
除蛋白酶K粉外，贮存于4℃。
|
|
FABGK 002
|
20个准备。
|
|
FABGK000-MAXI
|
FavorPrep™血液/培养细胞基因组DNA提取Maxi试剂盒
|
2个准备。
|
Proteinase K Powder
FABG Buffer
W1 Buffer
Wash Buffer（浓）
洗脱缓冲液
FABG Maxi Columns
50 ml Elution tubes
|
在室温（15~25℃）下保存2年。
除蛋白酶K粉外，贮存于4℃。
|
|
|
|
上海金畔生物是实验试剂一站式采购服务商
1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。
2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。
3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。
4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。
5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。
6：上海金畔生物还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。
7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。
