聚乙烯亚PEI-Pro(GMP)说明书

Jinpan Polyethyleneimine PEI Pro (GMP)聚乙烯亚PEI-Pro(GMP)说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EF10003-1L

1L

70,000.00

78EF10003-5ml

5ml

1,000.00

基本信息

    Jinpan Polyethyleneimine PEI PRO(GMP)是GMP级别转染试剂,本制品利用Jinpan公司生产的线性阳离子聚合物,按照符合GMP认证管理体系下,采用药用规格原辅料生产,所用起始材料及所需化学品和配制过程均在无菌环境中操作进行,以确保制造过程中每个步骤的特性、效力、纯度和安全性的一致性并严格控制重金属残留、细菌内毒素残留等,生产工艺符合 GMP 规范的产品生产与质量管理规程,保障生产过程及所有原辅料可追溯。

 

· PH值检测通过中国药典 2020 版第四部 pH 值测定法(通则 0631)

· 检测遵循《人用基因治疗总论-中国药典 2020》国家药典委。

· 检测遵循USP Chapter<1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于细胞治疗,基因治疗和组织工程产品中的辅料。

· 细菌内毒素检测符合中国药典2015版四部通则(1143)方法2光度测试法(动态浊度法)

· 重金属残留检测符合国药典 2020 版第四部重金属检查法(通则 0821)

· 支原体检测 使用支原体检测试剂盒

质量信息表

产品特点

     Jinpan-PRO GMP HEK293和CHO大多数表达系统中,Jinpan-PRO GMP 都能提供稳定的高表 达(96 孔板至 100L 生物反应器)。现在每年有更多的研究人员和公司选择使用 Jinpan-PRO GMP 进行细胞转染.。

· GMP级别定制监管,支持并满足合规要求。

· 不含动物源性成分。

· 严格遵循以下规范生产 1. ISO 9001:2015, certified facility。

· 严格按照《GMP 附录-细胞治疗产品》国家药品监督管理局。

· 从工艺开发到临床试验和商业化的无缝过渡生产细胞系(HEK-293 和衍生物、VERO 等的最高病毒产量。

操作方法参考

一、贴壁细胞转染 以 6 孔板转染 293T 细胞为例:

(一)转染前准备

1) 转染前一天:用胶原酶 I型(78CL10002)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。 按照每孔2×10 6的细胞量接种293T 至 6 孔板(每孔加入 2ml 新鲜的 DMEM:F12+5%FBS Complete medium 和 1ml 的细胞悬液)置于 37°C,5%CO2培养 箱培养 24h。

2) 24h 后,移除之前培养基,每孔加入 2ml 新鲜的 DMEM:F12+5%FBS。

注意:确保 293T 细胞生长状态良好传代 不超过 15 代。

(二)转染过程

3) 第一天:显微镜下检查细胞汇合度, 当细胞达到 70%到 80%的汇合度时,开始准备转染。

4) 对于每孔细胞,用 100µl 无血清培养基(如 OPTI-MEMⅠ培养基)稀释 DNA 使 DNA 终浓 度为 1ug/ml(DNA/总培养体积)。

5) 对于每孔细胞,用 100μL 无血清培养基(如 OPTI-MEMⅠ培养基)稀释适当比例的适量 Jinpan-PRO GMP DNA:Jinpan-PRO GMP 的比例要依据自己实验摸索最适比例。

6) 将稀释的 Jinpan-PRO  GMP转染试剂加入到稀释的质粒中(总体积 200µL)轻轻混匀, 室温孵育 30 分钟。

7) 小心地将 Jinpan-PRO  GMP复合物滴加到细胞培养板每个孔中,轻轻摇动培养板混匀。注 意加入混合液时轻轻沿着孔板边缘滴入,而不是在细胞的顶部以免破坏细胞的粘附性。

8) 将培养板放入 37°C,5%CO2培养箱培养中培养 24h。

(三)观察转染结果 9) 第二天:在荧光显微镜下观察细胞转染效率,通常超过 80%的 293T 细胞在转染后的 24h 可以观察到绿色荧光。 小贴士 :建议进行不同基因转染时应对 Jinpan-PRO GMP DNA 的比例进行优化,以达到最适比例, 通常筛选范围在 1:1 到 1:3 之间。如果之前用过进口品牌的 PEI,用Jinpan-PRO  GMP时应适当 降低使用浓度。

    通常情况下,分别准备Jinpan-PRO GMP GMP和 DNA 转染溶液时其体积一般是转染前每孔细胞培 养液体积总量的 1/10-1/20,如细胞培养液体积为 3ml,则稀释Jinpan-PRO  GMPI及 DNA 的体积为150ul。质粒 DNA 的浓度通常为 1ug/ml(DNA 质量/细胞培养总体积)[1][4]。 不同质粒种类以及大小会影响转染效率,如较大片段插入质粒可能转染效率低,可根据 实际实验需要调整,如适当增加转染质粒总量等。 ØHEK293 GnTI 细胞重悬浮可用枪头或移液管反复吹打,但 CHO-S 细胞的粘附性比较强 重悬浮时需要借助细胞刮刀。 一般建议用胶原酶消化细胞,如果表达的是膜蛋白,胰酶消化细胞可能会降低蛋白表达, 建议用胶原酶消化细胞,我们推荐用(78CL10002)的胶原酶。 对于贴壁性低的细胞系,可用明胶或鼠尾胶铺板,增加细胞与培养皿之间的粘附性。 一旦确定了细胞类型、培养基和78BioPEI GMP与 DNA 的最佳比例,就可以在转染后 24 至 96 小时内多次观察转染效率,以优化最大表达量时间点。

二、悬浮细胞转染 离心对数期生长的细胞用新鲜的培养基重悬浮使细胞密度达到 1×10 6cells/mL 小规模转 染时,如需大规模转染细胞密度要到达 2-3×10 6cellsml/mL。以 293F 细胞 于 100mL 培养瓶(溶液体积占瓶体积的 1/5)操作体系举例如下:

(一)转染前准备

1) HEK293F 细胞传代接种于 20mL 悬浮细胞生长培养基中(36.5℃,120rpm,5%CO2 )的条 件下培养。当细胞密度到 1X10 6cells/mL,然后旋紧瓶口放入摇床继续培养,2~4 小时 后可以进行转染。

(二)转染过程

2) 用 1mlOptiPRO™SFM(无血清培养基)稀释适量的 DNA,使 DNA 终浓度为 1ug/ml(DNA/总 培养体积)。混匀并静置 5min。

3) 用1mlOptiPRO™SFM(无血清培养基)稀释适当比例的Jinpan-PRO  GMP,混匀并静置 10min。

78BioPEI:DNA 参考比例范围,可参考上述贴壁细胞Jinpan-PRO  GMP DNA 优化方案优化)。

4) 将Jinpan-PRO  GMP转染试剂加入到稀释的质粒中轻轻混匀,室温孵育 30 分钟。

5) 将Jinpan-PRO  GMP转染复合物逐滴加入到细胞培养液中,摇匀后旋紧瓶口放回摇床 36.5℃,5%CO2,120rpm)。

6) 基因表达可在 24-72 小时后检测,具体时间取决于细胞系和转基因.

小贴士:在悬浮培养中,单个细胞的转染效率要高于聚集在一起的细胞,需要优化适合单细胞的 生长条件。 方形瓶应经过两个连续的干燥循环高压灭菌(每个 45 分钟,干燥 15 分钟) 盖子应尽可能松,不得脱落。应该让它们冷却拧紧盖子前,将其全部放入层流罩中。如 果瓶子向内塌陷,细胞将无法正常生长。 如果要获得更多的蛋白产量,有参考文献表明转染后 24 小时,可以适当稀释细胞,稀 释比例参考范围(1:2—1:5)之间,可以增加蛋白产量,稀释效应与最佳稀释比率应根 据经验确定, 可以把 DNA 和Jinpan-PRO  GMP 转染试剂直接加入到细胞悬液中进行转染,但必须经过上述 特定流程的 DNA 和转染试剂的比例和用量的相应优化。

注意事项

1. 不同质粒种类以及大小会影响转染效率,可如较大片段插入质粒可能转染效率低,可根据实际实验需要调整,如适当增加转染质粒总量等。

2. 细胞状态及代数会较大程度影响转染。刚复苏细胞需传代2-3次以上,待细胞生长稳定后做转染实验。为保证实验稳定性,转染细胞尽量选择20代以内进行实验。

3. 对于贴壁性低的细胞系,可用明胶或鼠尾胶铺板,增加细胞与培养皿之间的粘附性。

4. 初次使用应优化DNA浓度和 Jinpan-PRO GMP试剂量以得到最大的转染效率。 DNA 和转染试剂的比例, 通常推荐是1:2-1:3,通过调整DNA/Jinpan-PRO  GMP转染试剂比例优化转染效率,调整范围DNAμg:Jinpan-PRO  GMP(μL 比值在1:0.5-1:5

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒 分光法

脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒 分光法

¥673.00

货号:BL894A

规格:48T

品牌:Jinpan

商品详情:

Proline (PRO) Content Assay Kit

脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL894A

脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒

48T

 

产品简介:

植物体内游离脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性,抗旱性强的品种往往积累  较多的脯氨酸。因此测定脯氨酸含量可以作为抗旱育种的生理指标。另外,由于脯氨酸亲水性极强,能稳定原生质胶体及组织内的代谢过程,因而能降低凝固点,有防止细胞脱水的作用。在低温条件下,植物组织中脯氨酸含量增加,可提高植物的抗寒性,因此,亦可作为抗寒育种的生理指标。

当用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中,然后用酸性茚  三酮加热处理后,溶液即为红色,再用甲苯萃取红色色素,该红色物质在 520nm 处有最大吸收峰,进而通过比色法测定植物体内游离脯氨酸的含量

 

产品组成:

试剂名称

规格

提取液

液体60mL×1 

试剂一

液体30mL×1 

标准品

粉末×1 

 

注意事项

1.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

2.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

4保存三个月

货号 BL894A
规格 48T
品牌 Jinpan
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  • 脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒 分光法

脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒 微板法

脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒 微板法

¥1308.00

货号:BL894B

规格:96T

品牌:Jinpan

商品详情:

Proline (PRO) Content Assay Kit

脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL894B

脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒

96T

 

产品简介:

植物体内游离脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性,抗旱性强的品种往往积累  较多的脯氨酸。因此测定脯氨酸含量可以作为抗旱育种的生理指标。另外,由于脯氨酸亲水性极强,能稳定原生质胶体及组织内的代谢过程,因而能降低凝固点,有防止细胞脱水的作用。在低温条件下,植物组织中脯氨酸含量增加,可提高植物的抗寒性,因此,亦可作为抗寒育种的生理指标。

当用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中,然后用酸性茚  三酮加热处理后,溶液即为红色,再用甲苯萃取红色色素,该红色物质在 520nm 处有最大吸收峰,进而通过比色法测定植物体内游离脯氨酸的含量

 

产品组成:

试剂名称

规格

提取液

液体110mL×1 

试剂一

液体40mL×1 

标准品

粉末×1 

 

注意事项

1.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

2.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

4保存三个月

货号 BL894B
规格 96T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载
  • 脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒 微板法

BBI Solutions心肌标志物蛋白 NT Pro-Brain Natriuretic Peptide P305-1

BBI Solutions心肌标志物蛋白 NT Pro-Brain Natriuretic Peptide P305-1

英国BBI Solutions成立于1986年,是体外诊断试剂领域专业制造商,为生命科学行业和体外诊断行业提供诊断试剂原料、标准品及技术服务,现已从一家小型专业公司成长为业务生产基地横跨三个国家的大型企业。

BBI Solutions主要经营产品包括人源抗原、抗体、血清、血浆、临床化学酶和黄金纳米颗粒。

BBI Solutions人源蛋白

BBI Solutions人源蛋白是从人类血清或组织中纯化所得,符合伦理法规要求;重组蛋白使用大肠杆菌和毕赤酵母表达系统,在专业的实验室中进行生产;去血清产品,可显著消除基质效应,提高生物标志物的检测效果,并产生可重复的标准曲线。


NT Pro-Brain Natriuretic Peptide  N前端脑钠肽 货号:P305-1

The Natriuretic peptide family of hormones are secreted primarily from the heart, kidneys and brain that cause vasodilation and natriuresis.proBNP is cleaved on secretion into the bloodstream to produce the two biomarkers of 32-aa BNP and 76-aa NT-proBNP. NT ProBNP has a longer half-life than BNP in serum making it a preferable biomarker. BNP and NT-proBNP are released from cardiac myocytes in response to mechanical load and wall stress. Elevated levels of BNP and NT-proBNP are helpful to aid diagnosis of systemic sclerosis.

产品详情:https://www.bbisolutions.com/cn/product/nt-pro-brain-natriuretic-peptide-recombinant

金畔生物是英国BBI Solutions代理商,更多产品信息,欢迎直接与我们联系~

prospecbio PRO-2427说明书

prospecbio PRO-2427说明书

 

  •  
  • CD1A Human

  • CD1A Human Recombinant

  • PRO-2427

  • 1µg ($50)

    5µg ($130)

    50µg ($1200)

目录号

PRO-2427

同义词

T细胞表面抗原T6 / Leu-6,hTa1胸腺细胞抗原,R4,T6;CD1,FCB6,HTA1,CD1A。

介绍

CD1a是跨膜糖蛋白,在结构上与主要的组织相容性复合物(MHC)蛋白相关,并与β-2-微球蛋白形成异二聚体。CD1a介导主要将自身或微生物来源的脂质和糖脂抗原呈递给T细胞。人类基因组包含五个CD1家族基因,这些基因以1号染色体上的簇状组织。CD1家族成员被认为在细胞中的定位和对特定脂质配体的特异性不同。该基因编码的蛋白质定位于早期内吞系统的质膜和回收囊泡。已经观察到剪接的转录物变体,但尚未确定其生物学有效性。

描述

在Sf9杆状病毒细胞中产生的CD1A是一条单糖基化的多肽链,包含291个氨基酸(19-300a.a。),分子量为33.2kDa。(SDS-PAGE上的分子大小约为28-40kDa)。CD1A在C末端表达9个氨基酸的His标签,并通过专有色谱技术纯化。

资源

Sf9,杆状病毒细胞。

外观

无菌过滤无色溶液。

公式

CD1A蛋白溶液(0.5mg / ml),含磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)和10%甘油。

稳定性

如果整个小瓶将在2-4周内用完,请保存在4°C下。储存在-20°C冷冻更长的时间。
对于长期保存,建议添加载体蛋白(0.1%HSA或BSA)。
避免多次冻融循环。

纯度

通过SDS-PAGE测定,大于85%。

氨基酸序列

ADP DGLKEPL SFHVTWIASF YNHSWKQNLV SGWLSDLQTH TWDSNSSTIV FLCPWSRGNF SNEEWKELET LFRIRTIRSF EGIRRYAHEL QFEYPFEIQV TGGCELHSGK VSGSFLQLAY QGSDFVSFQN NSWLPYPVAG NMAKHFCKVL NQNQHENDIT HNLLSDTCPR FILGLLDAGK AHLQRQVKPE AWLSHGPSPG PGHLQLVCHV SGFYPKPVWV MWMRGEQEQQ GTQRGDILPS ADGTWYLRAT LEVAAGEAAD LSCRVKHSSL EGQDIVLYWE HHSSV HHHHHħ。

用法

ProSpec的产品仅供实验室研究使用。该产品不得用作药物,农产品或农药,食品添加剂或家用化学品。