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signosis是一家专业从事生命科学领域细胞因子分析,转录因子分析等方面的生物技术公司,signosis经过多年的发展,现已成为细胞因子行业品质产品的象征。signosis主要产品涉及细胞因子分析,转录因子分析,细胞与细胞的冻,miRNA的研究,基因表达分析,蛋白质相互作用分析,生物标志物分析等领域。signosis致力为客户带来更的产品与服务。
AR Luciferase Reporter MDA-MB-453 Stable Cell Line
AR荧光素酶报告基因MDA-MB-453稳定细胞系
品名 |
货号 |
AR Luciferase Reporter MDA-MB-453 Stable Cell Line |
SL-0008-FP |
描述:
AR响应性荧光素酶报告基因MDA-MB-453稳定细胞系来自人乳腺癌,并在AR反应元件的控制下稳定表达萤火虫萤光素酶报告基因。该细胞系是一种理想的细胞模型,用于监测由激素治疗,强制基因表达和基因敲除引发的雄激素受体途径的激活。
原理
雄激素受体(AR)在男性生殖器官的发育中起关键作用。当被刺激激活时,AR从细胞质转移到核中,然后结合DNA识别位点并调节基因表达。Signosis已建立了AR荧光素酶报告基因稳定细胞系,其中荧光素酶活性与AR的活性特异性相关。因此,细胞系可用作监测由刺激治疗引发的AR的激活的报告系统,强制基因表达和/或基因敲低。通过转染AR荧光素酶报道载体与G418表达载体,然后G418选择建立细胞系。随后筛选G418抗性克隆,以显示依托泊苷诱导的荧光素酶活性。选择具有zui高折叠诱导(22倍)的克隆并扩增以产生该稳定的细胞系。
TF荧光素酶报告原理。 TF荧光素酶报道稳定细胞株利用人工启动子构建体来驱动荧光素酶表达。启动子区域可以由顺式元件TF结合位点的多个重复序列,来自已知TF下游基因的启动子区域的DNA片段或含有推定/已知的TF结合位点的DNA片段组成。TF可以通过细胞外刺激或通过细胞内信号传导途径激活几种方式。一旦激活,TF易位于细胞核,并经常与相关因子相互作用以驱动基因表达。一旦荧光素酶表达,其可以在酶测定中产生光,并且测量的光量与TF活化的水平正相关。
数据
分析雄激素受体途径记录MDA-MB-453稳定细胞系对刺激的响应。 将细胞用包含10%FBS的DMEM在96孔板上接种过夜。然后在DMEM和0.1%FBS中分别用或不用20nM DHT处理细胞16小时。
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