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Cell Technology主要产品包括抗体和试剂,同时提供代谢试验,双传感器的检测,荧光酶检测,氧化应激检测的产品及服务。
JC10
Flow Cytometry Mitochondrial Membrane Potential Detection Kit
流式细胞仪线粒体膜电位检测试剂盒
产品编号:JC10FC
产品描述
介绍
线粒体膜电位的丧失是细胞凋亡的标志。APO LOGIX JC-10检测试剂盒可测量细胞中的线粒体膜电位。在非凋亡细胞中,JC-10作为胞质溶胶(绿色)中的单体存在,并作为聚集体聚集在染绿绿色的线粒体中。而在凋亡和坏死细胞中,JC-10以单体形式存在并染色细胞质绿色。开发了JC-10以增加水性缓冲液中的可溶性,与其对映体JC-1相比较。
主要优点
- 与JC-1相比,在水性缓冲液中具有优异的溶解性。
- 应用 – 细胞渗透不洗流式细胞仪测定。
- 将试剂直接添加到活细胞中,孵育30-60分钟并测量。
图(A)。将Jurkat细胞与DMSO一起培养2小时。然后用JC-10线粒体膜电位检测试剂盒对细胞染色15分钟,并通过流式细胞术进行分析。
图(B)。将Jurkat细胞与星形孢菌素一起培养2小时。然后将细胞用JC-10线粒体膜电位检测试剂盒染色15分钟并通过流式细胞术分析。
背景
线粒体通透性转换是诱导细胞凋亡的重要步骤。在此过程中,线粒体膜上的电化学梯度(称为DY)崩溃。认为崩解是通过二聚化的Bax或激活的Bid,Bak或Bad蛋白质在线粒体中形成孔而发生的。这些促细胞凋亡蛋白的激活伴随着细胞色素c释放到细胞质中(1-4)。
JC-1已被广泛用于检测线粒体膜电位,然而由于它在水性缓冲液中的溶解度差,特别是当需要高浓度时,难以处理。
JC-10检测试剂盒使用*的阳离子染料来表示线粒体膜电位的丧失。在健康细胞中,染料将线粒体染成鲜红色。由完整的线粒体膜电位建立的负电荷允许带有离域正电荷的亲脂性染料进入其累积的线粒体基质中。当超过临界浓度时,J-聚集体形式变成荧光的格林尼亚橙,因为它以单体存在于细胞质中并发出绿色荧光。在凋亡细胞中,线粒体膜电位崩溃,并且JC-10不能在线粒体内累积。
在这些细胞中,JC-10以其单体绿色荧光形式保留在细胞质中。主要显示绿色荧光的凋亡细胞容易从显示橙色和绿色荧光的健康细胞中分化。使用在FL1(绿色)和FL2(格兰尼克橙)中测量的490激发和发射,通过流式细胞术可同时观察凋亡和健康细胞。JC-10试剂易于使用,只需稀释提供的缓冲液或细胞培养基中的试剂并将其添加到细胞中即可。孵育30-60分钟后,通过流式细胞仪分析样品。