jembio Tth 111 逆转录酶            

在 Mn2+ 存在下，Thermus thermopilus 逆转录酶在升高的温度下催化 RNA 逆转录为 cDNA。

来源：嗜热栖热菌

描述：

• 适用于DNA 的高温合成(1)。

• 从 RNA 模板合成 cDNA (2)。

• 导致引物杂交和RNA 延伸的特异性更高。

• 可以在高温下逆转录 (2)。

• 最大限度地减少RNA 强二级结构的问题。

• 用于对含有问题二级结构的DNA 进行高效PCR。

• 适用于RT-PCR；相同的酶用于逆转录和随后扩增获得的 cDNA 模板 (2)。• 对从有问题的样本中分离的模板 DNA 中存在的扩增抑制剂具有抗性 (3,4)。          

  单位定义：一个单位是在 50°C 下 10 分钟内将 1 nmol dTTP 掺入酸不溶形式所需的酶量。

储存条件：储存于 –20°C。

储存缓冲液：50 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 7.5）、5 mM 二硫苏糖醇、0.1 mM EDTA、50% (v/v) 甘油和稳定剂。检测条件：40 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 8.5）、1 mM MnCl2、1 mg/ml 牛血清白蛋白、10 mM 二硫苏糖醇、0.5 mM [α-??P] dTTP 和 0.4 mM poly(A)·( dT)50。

在 50°C 下在 50 ?l 反应体积中孵育 10 分钟。质量控制：检测所有制剂的污染核酸内切酶、核酸外切酶、非特异性 RNase 以及单链和双链 DNase 活性。

参考：

1. Wang, AM, Doyle, MV 和 Mark, DF (1989) Proc。纳特尔。阿卡德。科学。美国 86、9717-9721。

2. Myers, TW, Gelfanld, DH (1991) Biochemistry 30, 7661-7666。

3. Kather, HL, Schwartz, I. (1994) Biotechniques 16, 84-92。

4. Poddar, SK, Sawyer, MH, Connor, JD (1998) J. Med。微生物。47, 1131-1135。