zenogenpharma STEM-CELLBANKER说明书

STEM-CELLBANKER ^® EX GMP 级
（化学定义的冷冻保存溶液

• 描述：

• STEM-CELLBANKER ^® EX GMP 级 (SCB EX) 是一种细胞冷冻保存解决方案，可扩展细胞治疗的可能性。SCB EX 是一种简单的成分，由经静脉注射证明的成分组成。它是一种含有 DMSO 的冷冻保存溶液和一种无异种物质的产品，配方不含血清和动物成分。SCB EX 还可以保存人类造血干细胞和人类脂肪来源的基质/干细胞。SCB EX 的制造符合日本、欧盟、美国和 PIC/S GMP 指南。所有将产品暴露在环境中的操作均在 A 级区域进行，以确保无菌。

  ※本产品已在 PMDA 内的 MF 中注册。
  ※本产品成分与HSC-BANKER ^® GMP等级相同。

• 应用：

• 使用脂肪衍生基质/干细胞 (ADSC) 进行冷冻保存性能测试

  测试：EMO生物医学

• 1. 细胞活力测试

  ADSC 与 SCB EX 一起冷冻保存 4、12、24 和 48 周。解冻后立即评估细胞活力（左图）和解冻后过夜（右图）。用 SCB EX 冷冻保存的细胞即使在长期冷冻保存后也显示出高活力，即使在过夜休息后也保持高活力。

  2. 细胞恢复测试

  ADSC 与 SCB EX 一起冷冻保存 4、12、24 和 48 周。然后，我们评估解冻后过夜的细胞附着（细胞恢复；左图）和解冻和培养 72 小时后的细胞生长速率（倍增时间；右图）。结果表明，即使经过长期冷冻保存，细胞恢复和细胞生长速度也没有受到影响。

  3. 小区身份测试

  ADSC 与 SCB EX 一起冷冻保存 4、12、24 和 48 周。然后，我们使用流式细胞仪的阳性和阴性标记评估解冻后的细胞身份。结果表明，即使在长期冷冻保存后，用每种标记物标记的细胞百分比也不受影响。

  阳性标记；CD29、CD73、CD90 和 CD105
  阴性标记；CD11b、CD19、CD34、CD45 和 HLA-DR

  阳性标记数据

  4. 细胞功能测试
  　（IDO 量化和抑制 T 细胞增殖测定）

  ADSC 与 SCB EX 一起冷冻保存 4、12、24 和 48 周。然后，我们评估了解冻后 ADSC 的细胞功能。结果表明，即使经过长期冷冻保存，在MSCs存在下IDO表达和T细胞增殖抑制率均不受影响。

  ※吲哚胺-2,3-双加氧酶（IDO）

• 协议（CELLBANKER ^®系列）

• 冷冻

  为获得最佳结果，冷冻保存的细胞应处于对数生长期。可以替代类似或标准的冷冻方案。

  重要提示：最佳方案可能会随细胞类型而变化。

  解冻

  ※如果成活率低，请尝试使用冷冻箱等慢速冷冻方法。

• 从储存中取出冷冻细胞，在 37 ℃ 振荡水浴中快速解冻。

• 立即将每 1ml 细胞与 10ml *细胞培养基稀释并轻轻混合。

• 轻轻离心沉淀细胞（3-5 分钟，1,000~2,000rpm，4 ℃）。取出上清液抽吸器。

• 用适当体积的*细胞培养基轻轻悬浮细胞。并放入培养瓶中。

• 根据标准协议继续进一步的培养程序。

• 检查并确保细胞培养物无污染、健康状况和适当融合等。

• 进行细胞计数以确定细胞的活力

• 轻轻离心沉淀细胞（3-5 分钟，1,000~2,000rpm，4℃）。使用吸气器去除上清液。

• 用 CELLBANKER 冷冻保存培养基轻轻悬浮细胞（1 ml 用于 5×105 – 5×106 细胞）。

• 将细胞悬液以 1ml 等分试样分装到已标有细胞系名称、细胞浓度、传代日期和其他重要信息的冷冻保存小瓶中。

• 将小瓶直接置于-80℃保存。如有必要，在小瓶冷冻至少 24 小时后，将冷冻小瓶转移到液氮储罐中。

• 储存和稳定性：

• 储存于 2 至 8 或低于 -20 摄氏度。该产品在此储存温度下自生产之日起可保持稳定 3 年。